梁爽
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 供职机构：江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程更多>>
- 三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质被引量：9
- 2007年
- 三相分离（TPP）是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明：利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2＋和Ag＋离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。
- 王龙刚梁爽王武
- 关键词：胆固醇氧化酶分离纯化三相分离酶学性质
- 从乳化体系中分离纯化短杆菌产胆固醇氧化酶被引量：2
- 2004年
- 添加剂W对酶的分离纯化造成很大困难,用异丙醇沉淀发酵液的同时加入(NH4)2SO4能够有效地破除乳化体系,去除添加剂W,酶收率达到90%.在pH值为8.0的条件下用SepharoseDEAEFastFlow离子交换透析酶液,比酶活从3.21U/mg提高到29.21U/mg,酶收率达70.1%.
- 王龙刚梁爽杨海麟汪建军王武
- 关键词：胆固醇氧化酶破乳化分离纯化
