江贤章
- 作品数：169 被引量：247H指数：9
- 供职机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金福建省自然科学基金福建省科技厅重大项目更多>>
- 相关领域：生物学化学工程轻工技术与工程农业科学更多>>
- 裂殖壶菌产DHA摇瓶培养优化被引量：1
- 2016年
- 在摇瓶条件下,利用SAS9.0.2软件中的响应面法对裂殖壶菌发酵生产DHA的培养基进行了优化。首先设计Plackett-Burman实验对影响裂殖壶菌(Schizochytrium sp.FJU-512)生产DHA的相关因素进行分析,结果表明,葡萄糖、甘油对DHA产量的影响极显著,(NH4)2SO4对DHA产量影响显著。采用Box-Behnken实验设计和响应面分析方法对Schizochytrium sp.FJU-512发酵产DHA复合碳氮源培养基进行了优化。实验优化确定最佳产DHA培养基配方为(g/L):葡萄糖63.94,甘油74.90,(NH4)2SO40.24,酵母浸粉10.00,蛋白胨10.00,海水晶15.00,KH2PO43.5,Mg SO43,维生素B10.005,维生素B120.005。在此优化条件下,Schizochytrium sp.FJU-512发酵得到DHA产量可达15.23 g/L,较优化前的6.18 g/L,提高了2.46倍,由此可见,Schizochytrium sp.FJU-512具有很好的工业化潜力。实验结果证明用响应面设计方法寻求菌体积累DHA的最佳培养基组分是可行的。
- 张明亮江贤章黄建忠
- 关键词：DHA裂殖壶菌PLACKETT-BURMAN设计响应面
- 酿酒酵母ADH3基因的敲除被引量：12
- 2006年
- 设计含有与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)编码乙醇脱氢酶Ⅲ的ADH3基因ORF两侧序列同源的长引物,以质粒pUG6为模板进行PCR构建带有Cre/loxP系统的敲除组件。转化酿酒酵母YS3(Saccharomyces cerevisiae),并将质粒pSH65转入阳性克隆子。半乳糖诱导表达Cre酶切除Kanr基因,在YPD培养基中连续传代培养丢失pSH65质粒,在原ORF处留下一个loxP位点,获得ADH3单倍体缺陷型菌株。利用同样的方法再次敲除双倍体的另一个等位基因。最终获得ADH3双倍体基因缺陷型突变株YS3-ADH3。
- 宋浩雷郭晓贤杨月梅江贤章黄建忠
- 关键词：酿酒酵母乙醇脱氢酶基因敲除PCR
- 基因工程化类球红细菌及其制备方法和法尼醇的生产方法
- 本发明公开了基因工程化类球红细菌及其制备方法和法尼醇的生产方法。本发明通过将来自于鼠疫耶尔辛杆菌Yersinia pestis CO92的磷酸酶PgpB基因转化到类球红细菌能够在胞内表达，并产生具有活性的磷酸酶PgpB，...
- 祁峰黄建忠陈学端江贤章张明亮
- 文献传递
- 海洋真菌Thraustochytrium sp.FJN-10△4脱饱和酶基因的cDNA克隆及结构分析
- 海洋真菌Thraustochytrium sp.FJN-10是二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA,C22:6n-3)的高产菌株,为阐明其DHA生物合成机制及采用基因工程技术提高DHA生物合成...
- 刘丽霞江贤章黄建忠
- 关键词：海洋真菌二十二碳六烯酸脂肪酸脱饱和酶
- 文献传递
- 敲除SNF1基因提高酿酒酵母乙醇生物合成的研究被引量：2
- 2009年
- SNF1基因编码的Snf1p对起始受葡萄糖阻遏基因的转录是必需的。通过重叠延伸PCR和两步PCR法合成了两端各带有352bp和345bp与SNF1序列上下游同源的基因敲除组件。将该敲除组件转化至酿酒酵母YS2,获得被loxP-kan-loxP序列组件替换而产生kanr的阳性克隆子。然后将质粒pSH65转入阳性克隆子并诱导表达Cre酶切除kan基因,进而通过传代丢失质粒pSH65后得到SNF1单倍体缺陷型菌株。重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除,得到SNF1双倍体缺陷型菌株YS2-△snf1::loxp-kan-loxp。厌氧发酵试验表明该突变株的乙醇产量较出发菌株YS2提高了8.74%。残糖量试验表明在培养基中葡萄糖消耗殆尽后,突变株相对于出发菌株而言并没有利用乙醇作为碳源,乙醇产量保持稳定未有下降。敲除SNF1基因是提高酿酒酵母生物合成乙醇的一条有效途径。
- 雷娟娟王艳尊江贤章高媛媛李欣蓝灿华陈由强吴松刚黄建忠
- 关键词：酿酒酵母基因敲除乙醇
- 卷枝毛霉△6-脂肪酸脱氢酶分子机理的研究
- ＜正＞△6-脂肪酸脱氢酶是γ-亚麻酸（γ-linolenic acid,简称GLA）生物合成途径中的限速酶。本论文通过采用酶分子定向进化和理性设计等蛋白质工程和酶工程技术对△6-脂肪酸脱氢酶进行分子改造。为了探究Muco...
- 宋芬芬江贤章柯崇榕吴松刚黄建忠
- 关键词：随机突变定点突变Γ-亚麻酸
- 文献传递
- 共表达分子伴侣PDI和Ero1对灰盖鬼伞过氧化物酶在毕赤酵母中表达的影响被引量：7
- 2015年
- 来源于灰盖鬼伞长度为1 092 bp的CiP目的基因与AOX1启动子一起整合进酵母染色体基因组中。重组蛋白CiP在酿酒酵母信号肽的引导下成功分泌到胞外,质谱鉴定为目的蛋白,成功在毕赤酵母中表达灰盖鬼伞过氧化物酶(CiP)。将伴侣蛋白内质网氧化还原酶1(Ero1)、二硫键异构酶(PDI)分别单独及同时转入CiP酵母受体菌中,研究它们对CiP在毕赤酵母中表达的影响。结果表明:在摇瓶中,相对于无分子伴侣的菌株,单独整合PDI及同时整合Ero1、PDI菌株的CiP酶活分别提高了2.43和2.62倍,活力达到316 U/m L和340 U/m L。挑选同时整合Ero1、PDI伴侣蛋白的CiP菌株,5 L发酵罐进行高密度发酵,酶活最高达到3 379 U/m L,比摇瓶提高约10倍。本实验结果较目前已报道的1 200 U/m L已是最高水平。
- 陈飞胡美荣江贤章陶勇黄建忠
- 关键词：毕赤酵母二硫键异构酶
- 基因重组大肠杆菌及5-羟色胺的生产方法
- 本发明公开了一种基因重组大肠杆菌及5‑羟色胺的生产方法。本发明的基因重组大肠杆菌包含色氨酸羟化酶TPH基因和色氨酸脱羧酶TDC基因，且所述色氨酸羟化酶TPH基因和色氨酸脱羧酶TDC基因能够在所述大肠杆菌的胞内表达，形成具...
- 祁峰黄建忠沈培杰江贤章杨金花
- 卷枝毛霉孢子原生质体的制备与再生被引量：3
- 2011年
- 为了构建高产γ-亚麻酸的卷枝毛霉稳定遗传转化体系,利用酶解法对卷枝毛霉(Mucor circinelloides sp.)EIM-10的孢子进行原生质体制备。研究酶液组成、渗透压稳定剂、酶解温度、酶解时间等对卷枝毛霉孢子原生质体形成和再生的影响,建立了制备卷枝毛霉孢子原生质体的最适条件:1%纤维素酶和2%溶壁酶为酶解体系,0.5mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,酶解温度32℃,酶解时间2.5 h,再生培养基为0.5 mol/L NaCl高渗培养基。用双层平板培养法进行原生质体再生,在此条件下原生质体的形成量为1.2×106个/mL,再生率为70.5%。
- 陈清霞江贤章刘锦清宋芬芬黄建忠
- 关键词：Γ-亚麻酸原生质体孢子
- 一种裂殖壶菌的选育方法及一种裂殖壶菌
- 本发明提供了一种裂殖壶菌的选育方法，包括(1)制备裂殖壶菌初始菌体的菌悬液；(2)将所述菌悬液涂布于甘蔗渣水解液固体培养基上培养；(3)挑选所述甘蔗渣水解液固体培养基上成活的单菌落，分别传代培养；(4)选择能够稳定传代且...
- 黄建忠祁峰张明亮江贤章徐威
