王亚刚
- 作品数：20 被引量：10H指数：2
- 供职机构：湖北省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 猪胚胎的移植器械及其移植方法
- 本发明涉及一种猪胚胎的移植器械及其移植方法，器械包括移卵管、输卵管移植用外套管或子宫角移植用外套管，移卵管在各外套管内部，各外套管均是长65－70mm、管腔直径3－4mm、管壁厚0.1－0.2mm的硬质、有弹性的塑料细管...
- 魏庆信郑新民李莉肖红卫王亚刚
- 文献传递
- 转基因鼠及基因沉默技术的研究
- 郑新民刘西梅乔宪凤魏庆信谷习文华文君肖红卫王亚刚丁军涛周荆荣李莉田永祥刘中华赵永贞李聚学
- 该成果中的相关技术比较成熟：其中①原核注射构建转基因鼠技术较广的应用于医学模型和功能基因验证，先后进行多种基因功能测试，构建成功转单基因小鼠8种，转双基因小鼠2种；②鼠基因沉默技术除在遗传工程小鼠上的大量工作和应用外，还...
- 关键词：
- 关键词：转基因鼠动物实验
- 微卫星DNA对外源基因遗传的影响
- 2009年
- 试验通过转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素(oMT-pGH)基因和转绵羊金属硫蛋白启动子-猪生长激素-微卫星DNA(oMT-pGH-microsatellite DNA)基因猪的连续传代,分析了后代中转基因阳性猪的比例,并比较了两种转基因猪的遗传效果。结果发现,外源基因的传代不稳定,世代中转基因个体的比例在逐代降低;Microsatellite DNA片段在转基因猪的传代中没能显现出提高整合率的作用。
- 郑新民丁军涛乔宪凤魏庆信华文君李莉王亚刚肖红卫程妮
- 关键词：转基因猪微卫星DNA
- 成熟液中不同添加物对猪卵母细胞体外成熟及孤雌胚胎发育的影响被引量：3
- 2009年
- 试验研究了在成熟液中分别添加0.1%PVA、10%FBS和不同浓度的EGF(20、30、40、50 ng·mL-1)对猪卵母细胞体外成熟的影响,以确立猪卵母细胞体外成熟的最佳条件。结果表明,在成熟液中添加0.1%PVA和10%FBS后,对猪卵母细胞的成熟率影响无显著差异(P>0.05),对猪卵母细胞孤雌激活后36 h的卵裂率和第6天的桑葚胚率无显著差异(P>0.05);添加不同浓度的EGF对猪卵母细胞体外成熟率无显著差异(P>0.05);但是添加30和40 ng·mL-1 EGF组在36 h的卵裂率要极显著地高于添加20和50ng·mL-1 EGF的两组(P<0.01);而分别添加30、40和50 ng·mL-1 EGF 3组处理在第6天的桑葚胚率无显著差异,且极显著地高于添加20 ng·mL-1 EGF组的(P<0.01)。所以,在成熟液中添加0.1%PVA可以替代10%FBS,尤以添加30 ng·mL-1 EGF组对猪卵母细胞的体外成熟效果较好。
- 张立苹王亚刚李莉刘西梅乔宪凤许生成
- 关键词：猪卵母细胞体外成熟孤雌胚胎
- 不同激素处理对猪排卵效果的影响被引量：2
- 2009年
- 试验采用孕马血清促性腺激素(PMSG)、人绒毛膜促性腺激素(HCG)、前列腺烯醇(PG)3种不同的激素,处理后备母猪并进行配种、手术取卵,观测卵巢,收集胚胎并进行胚胎计数。结果表明,孕马血清促性腺激素与人绒毛膜促性腺激素的组合能显著提高母猪胚胎的数量(P<0.05);而前列腺烯醇处理只表现出诱导发情并能正常排卵的效果,但没有提高胚胎数量的作用(P>0.05)。
- 刘西梅乔宪凤李莉肖红卫王亚刚华文君魏庆信程妮
- 关键词：超数排卵激素
- 猪孤雌胚胎体外序贯培养
- 2010年
- 试验旨在探索不同培养体系和不同序贯培养法对猪孤雌胚胎体外发育的影响。采用普通培养和序贯培养2种培养方法进行猪卵母细胞的体外培养。结果表明,孤雌激活卵母细胞在NCSU23+0.4%BSA中分裂效果较好,而mTCM199+0.1%PVA则更有利于孤雌胚胎突破4细胞阻滞达到桑葚胚。在4种序贯培养中,NCSU23(0.4%BSA)+mTCM199(0.1%PVA)一组更适合于猪孤雌胚胎的体外培养。
- 张立苹王亚刚李莉刘西梅刘西梅乔宪凤郑新民
- 关键词：孤雌胚
- 缓解奶牛热应激的措施
- 2008年
- 从遗传角度来讲，当前我国主要的奶用品种牛源自北欧的不耐热品种荷斯坦牛，而从奶牛生理角度来讲．其在瘤胃发酵和产奶过程中产生大量的热，加之奶牛汗腺不发达、单位体重散热面积小等生理原因，导致了奶牛具有“耐寒不耐热”的生理特性。随着其生产性能的不断提高，其热应激的表现也越来越严重。特别是在南方农区热应激造成的经济损失十分明显。
- 王亚刚肖红卫李莉郑新民乔宪凤
- 关键词：热应激奶牛耐热品种生理原因荷斯坦牛瘤胃发酵
- 猪分级卵母细胞体外成熟时间规律的研究被引量：2
- 2011年
- 试验根据猪卵丘-卵母细胞复合体（COCs）的颗粒细胞层数,把COCs分成A、B、C和D级,A、B级用于体外分别培养24、32、38、44、48和54 h,C级用于体外分别培养24、32、38、44、48、54和60 h,观察它们不同时间排出极体数,然后将排出极体的卵母细胞孤雌激活。结果发现,A和B级COCs培养48 h时成熟率最高（83.2%和78.0%）,明显高于同级水平培养24、32和38 h的成熟率;不同级别COCs体外培养相同时间,A与B级成熟率差异不显著（P〉0.05）,但二者与C级的成熟率差异显著（P〈0.05）;体外培养48 h COCs卵裂率最高（81.7%）,与培养38 h前的卵裂率差异显著（P〈0.05）。结果表明,A、B级卵母细胞更适于体外培养,能获得高的成熟率和卵裂率,COCs周围颗粒细胞对卵母细胞的成熟有显著影响;COCs培养38 h之前,部分虽能看到极体,但激活后卵裂率极低,说明卵母细胞并未真正成熟,通常通过排出极体判断卵母细胞成熟是不够准确的,COCs体外培养44~48 h是成熟的最佳时期,能为体细胞核移植提供大量优质的MⅡ期卵母细胞。
- 华再东郑新民魏庆信许厚强乔宪凤刘西梅李莉肖红卫王亚刚
- 关键词：体外成熟极体孤雌激活
- 转绿色荧光蛋白标记基因猪整合检测的研究
- 2008年
- [目的]为转基因猪生产的整合效率、外源目的基因表达水平、目的基因在猪体内组织特异性表达分布等相关领域的进一步研究奠定基础。[方法]用显微注射法将GFP标记的转基因猪表达载体PM1导入湖北白猪和通湖猪1-细胞、2-细胞胚胎中,胚胎移植妊娠后生产仔猪,取耳或尾组织样提取基因组总DNA,用PCR法检测PM1在猪基因组中的整合情况。[结果]在所有生产的78头仔猪中,有6头猪用PCR检测为转PM1基因阳性猪,这6头猪在3次PCR扩增反应中都得到650 bp目的扩增片段。其他样品没有得到目的扩增片段的为阴性猪。[结论]载体PM1可以用于携带外源基因进行转基因猪生产。
- 华文君乔宪凤郑新民王亚刚李莉肖红卫
- 关键词：绿色荧光蛋白转基因猪
- α-1,3-半乳糖苷转移酶基因沉默小鼠的建立初探
- 2008年
- 目的获得转α-1,3-半乳糖苷转移酶沉默基因的小鼠。方法将α-1,3-半乳糖苷转移酶沉默基因用显微注射的方法导入小鼠受精卵。结果移植注射胚853枚,其中移植312枚1-细胞胚于11只受体鼠,6只受孕(54.5%)均中途流产(解剖发现子宫角明显增粗、充血、残骸);移植注射胚541枚2-细胞胚于23只受体鼠,18只受孕(78.3%),11只受孕均中途流产了,3只足日剖宫产获14只死胎,平均体重2.14g,未检测到阳性;4只12日龄左右剖宫获21只残骸有7只阳性。结论通过显微注射的方法,α-1,3-半乳糖苷转移酶沉默基因可以整合,但要得到整合成活个体还有待进一步研究。
- 李莉刘西梅谷习文肖红卫王亚刚田永祥郑新民
- 关键词：基因沉默小鼠小干扰RNA转基因
