王克剑
- 作品数：23 被引量：46H指数：4
- 供职机构：中国水稻研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省农业科技自主创新基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种培育蜡质减少的转基因植物的方法
- 本发明公开了一种培育蜡质减少的转基因植物的方法。该培育蜡质减少的转基因植物的方法，包括如下步骤：使出发植物中的SEQ ID NO：1所示蛋白的编码基因的功能丧失，得到蜡质减少的转基因植物。本发明基因影响叶片蜡质形成，是一...
- 程祝宽覃宝祥李明唐丁王克剑
- 文献传递
- 与水稻株型相关蛋白LPA1及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种与水稻株型相关蛋白LPA1及其编码基因与应用。本发明提供了一种蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基...
- 程祝宽吴新儒唐丁李明王克剑
- 文献传递
- 利用CRISPR/Cas9系统定向改良水稻粒长和穗粒数性状被引量：23
- 2017年
- 【目的】基因组定点编辑技术已成为分子育种的重要手段。本研究拟对GS3和Gn1a功能缺失突变对目标性状的改良效应进行分析,以期为培育高产水稻提供理论基础。【方法】利用CRISPR/Cas9系统,以控制粒型基因GS3和控制每穗粒数基因Gn1a为编辑对象,构建了共敲除载体p C1300-2×35S::Cas9-g^(GS3)-g^(Gn1a)a,用农杆菌介导法转化4个优质水稻品种,分析了基因突变的特征和相应农艺性状。【结果】构建的敲除载体成功地实现了对GS3和Gn1a基因的定点编辑。在4个转化受体的T_0代均分别获得了gs3和gs3gn1a的移码突变体。对T_1 代中无选择标记突变体的农艺性状分析表明,突变体gs3和gs3gn1a与野生型相比粒长变长,千粒重增加;突变体gs3gn1a与突变体gs3相比,每穗粒数显著增加。【结论】利用CRISPR/Cas9系统进行水稻基因编辑可以快速改良品种的目标性状,在水稻品种的定向改良方面具有巨大的潜力。
- 沈兰李健付亚萍王俊杰华宇峰焦晓真严长杰王克剑
- 关键词：水稻
- 水稻雄性不育蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种水稻雄性不育蛋白及其编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中的SEQ ID №.2的氨基酸残基序列组成的蛋白质；2)将序列表中的SEQ ID №.2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...
- 程祝宽洪丽兰李明唐丁王克剑
- 文献传递
- 水稻DMP1、DMP2、DMP3基因突变体的创制及其单倍体诱导能力鉴定
- 2025年
- 【目的】探究水稻DMP家族基因的单倍体诱导能力,为单倍体育种提供新的基因资源。【方法】筛选与ZmDMP基因高同源且在花粉中高表达的水稻DMP家族基因作为候选基因;利用CRISPR/Cas9多基因编辑技术,在籼粳杂交稻“春优84”中对筛选的DMP家族基因和单倍体诱导基因OsMTL创制单基因敲除以及多基因组合敲除突变体;对突变体进行形态学观察和花粉育性鉴定;调查统计转基因T0材料的结实率和单倍体诱导率。【结果】在水稻RAP-DB数据库中共检索到13个玉米单倍体诱导基因ZmDMP的同源基因。OsDMP1和OsDMP2与ZmDMP同源性最高,相似度分别为41.24%和37.32%;OsDMP1和OsDMP3在花药中表达量最高。因此,选择OsDMP1、OsDMP2、OsDMP3基因为候选基因。通过CRISPR/Cas9基因编辑技术创制了OsDMP1、OsDMP2、OsDMP3的单基因敲除和组合敲除突变体(osdmp1、osdmp2、osdmp3、osdmp1-osdmp2、osdmp1-osdmp3、osdmp1-osdmp2-osdmp3),OsMTL单基因敲除突变体(osmtl),以及OsDMP1、OsDMP2、OsDMP3与OsMTL基因的组合敲除突变体(osmtl-osdmp1、osmtl-osdmp2、osmtl-osdmp3、osmtl-osdmp1-osdmp2、osmtl-osdmp1-osdmp3、osmtlosdmp1-osdmp2-osdmp3)。表型考察发现,相比较野生型,所有突变体的植株形态和花粉育性均未发生显著变化,而仅在包含osmtl的单基因敲除和多基因组合敲除突变体中结实率发生显著下降。单倍体鉴定结果显示,OsDMP1、OsDMP2、OsDMP3与OsMTL组合突变的单倍体诱导效率分别为0.4%±0.6%、2.6%±2.8%、1.4%±0.6%、1.5%±1.3%、2.1%±2.4%、2.2%±0.6%,与osmtl突变体(1.5%±0.5%)无显著差异。然而,当OsDMP家族基因单个突变或多个组合突变时均无单倍体产生。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功创制了水稻OsDMP1、OsDMP2、OsDMP3、OsMTL单基因和多基因组合敲除突变体,发现了OsDMP1、OsDMP2和OsDMP3均无独立单倍体诱导能力,也不能提升OsMTL基因的单倍体诱导效率。本研究促进了对�
- 胡风越王健王春王克剑刘朝雷
- 关键词：水稻单倍体诱导DMP
- 利用CRISPR/Cas9多基因编辑系统在水稻中快速引入遗传多样性被引量：10
- 2017年
- 成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)-核酸内切酶9(CRISPR/Cas9)系统已经成为许多物种特定基因组编辑的强大工具.利用CRISPR/Cas9多基因编辑系统成功构建共敲除水稻(Oryza sativa)中8个农艺性状基因的载体.通过遗传转化实验和DNA测序,发现8个基因在T_0代有较高的突变效率,并且T_0代突变株的突变类型包括杂合突变和纯合突变.此外,还在T_0代突变株中发现了纯合的六突突变株、七突突变株、八突突变株.由于T_0代植物中获得丰富的突变体组合类型,因而,观测到靶基因多样的突变表型.该研究表明,CRISPR/Cas9系统在作物育种过程中快速引入遗传多样性方面的潜力.
- 沈兰华宇峰付亚萍付亚萍李健刘庆焦晓真王俊杰王俊杰王兴春严长杰
- 关键词：CRISPR农艺性状基因水稻
- 水稻雄性不育蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种水稻雄性不育蛋白及其编码基因与应用。该蛋白，是如下1)或2)的蛋白质：1)由序列表中的SEQ ID №.2的氨基酸残基序列组成的蛋白质；2)将序列表中的SEQ ID №.2氨基酸残基序列经过一个或几个氨基...
- 程祝宽洪丽兰李明唐丁王克剑
- 一种水稻显性矮秆相关蛋白及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种水稻显性矮秆性状相关蛋白及其编码基因与应用。该蛋白是如下a)或b)的蛋白质：a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和...
- 程祝宽李明苗春波唐丁王克剑顾铭洪
- 文献传递
- OSWBC11蛋白在培育水稻雄性不育系中的应用
- 本发明公开了一种OSWBC11蛋白在培育水稻雄性不育系中的应用。本发明提供了沉默或失活目的植物中OSWBC11蛋白编码基因表达的物质在培育雄性不育植物中的应用。上述应用中，所述OSWBC11蛋白的氨基酸序列为序列表中的序...
- 程祝宽刘程捷李明唐丁王克剑马伯军
- 文献传递
- 水稻减数分裂基因OsMER3的图位克隆及功能研究
- 减数分裂是真核生物配子形成过程中发生的一种特殊细胞分裂方式。在减数分裂前期Ⅰ的偶线期，同源染色体配对形成二价体。继后从双线期到中期Ⅰ，同源染色体被交叉结维系在一起。交叉结的形成是同源染色体间发生交换的结果，因此交换的发生...
- 王克剑
- 关键词：水稻
