王国富
- 作品数：44 被引量：132H指数：6
- 供职机构：大理学院基础医学院更多>>
- 发文基金：云南省教育厅科学研究基金云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 幽门螺杆菌融合蛋白HCTV的保护性研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨幽门螺杆菌融合蛋白HCTV(HpaA-CtxB-VacA,HCTV)小鼠口服后的免疫应答。方法以Ni2+-NTA柱纯化HCTV为抗原,与重组蛋白HpaA和VacA分别给小鼠灌胃免疫,ELISPOT检测小鼠胃黏膜和派伊尔小结(Peyer patches,PP)特异性抗体分泌细胞(Antibody-secreting cells,ASC),ELISA检测血清IgG和IgA、小肠黏液sIgA和粪便sIgA。结果ELISPOT和ELISA检测结果表明,胃黏膜和PPsIgA-ASC、IgG-ASC数量明显增加,尤以sIgA-ASC为甚,同时血清IgA和IgG、粪便sIgA、肠黏液sIgA也明显高于HpaA组、VacA组和对照组,差异均有显著意义。结论已成功获得纯化的融合蛋白HCTV,小鼠灌胃免疫可有效诱导黏膜免疫应答,产生高水平的sIgA,可作候选Hp口服疫苗。
- 王国富吴利先白丽王晶郭利军潘云华
- 关键词：幽门螺杆菌黏附素霍乱毒素B亚单位融合蛋白
- 屎肠球菌类毒力基因hyl功能的动物实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的构建屎肠球菌透明质酸酶基因(hyaluronidase,hyl)突变株(*hyl),通过动物实验来研究hyl基因的功能。方法通过小鼠腹膜炎模型和兔心内膜炎模型来评价屎肠球菌hyl基因突变株(*hyl)的毒力下降情况。结果突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,存活率也明显高于野生株,引起的兔心内膜炎的病理改变也较野生株轻微。结论hyl基因在屎肠球菌致病中起着重要的作用,可能是屎肠球菌的毒力因子之一。
- 吴利先王国富黄文祥
- 关键词：屎肠球菌
- 尖锐湿疣患者HPV亚型及免疫功能被引量：3
- 2004年
- 尖锐湿疣容易复发,这与尖锐湿疣患者感染的人乳头瘤病毒亚型及机体免疫功能密切相关。以人乳头瘤病毒16/18型为代表的高危感染,外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞异常,以及细胞因子产生失衡所引起一系列细胞免疫抑制是最主要原因。本文就这两方面的研究进展作了综述,为尖锐湿疣的防治提供理论依据。
- 王国富白丽
- 关键词：尖锐湿疣HPV亚型免疫功能T淋巴细胞亚群自然杀伤细胞
- 志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术的建立被引量：3
- 2012年
- 目的探讨多重PCR技术在志贺菌感染快速诊断中的应用。方法用多重PCR法对临床分离的68株志贺菌毒力基因shet1A、shet1B、ial和ipaH进行扩增检测。结果 68株志贺菌均在423bp(ipaH)处出现条带,在147bp(shet1B)、309bp(shet1A)、320bp(ial)处均出现了至少一个条带,与常规鉴定法的符合率达100%。结论成功建立了志贺菌感染的多重PCR快速诊断技术。
- 王国富吴利先薛士鹏
- 关键词：志贺菌多重PCR
- 福氏志贺菌ipaB基因的克隆及序列测定
- 2012年
- 目的:克隆福氏志贺菌(Shigella flexneri,S.flexne)的ipaB基因。方法:以福氏志贺菌2a 2457T(Nal)r为模板,用PCR扩增ipaB目的基因片段,克隆至pQE-30表达载体中,构建含目的基因的表达质粒pQE-ipaB。结果:构建了重组质粒pQE-ipaB,ipaB基因全长1 743 bp,经测序分析与预期相符。结论:成功克隆了ipaB基因。
- 王国富白丽薛士鹏吴利先
- 关键词：福氏志贺菌克隆
- 幽门螺杆菌融合蛋白HCTV的表达及免疫原性研究被引量：1
- 2006年
- 目的构建表达幽门螺杆菌融合蛋白粘附素-细胞空泡毒素A-霍乱毒素B亚单位(HpaA-CtxB-VacA,HCTV)的原核表达载体,并诱导表达,为制备具有治疗与预防作用的多联疫苗奠定基础。方法用PCR技术从pQE-hctB扩增hpaA和ctxB目的基因片段,从pQE30-V质粒扩增出vacA基因,同时插入表达载体pQE-30,构建成pQE-hctv。再将pQE-hctv转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达。SDS-PAGE分析表达结果。Western blotting鉴定其抗原性。结果融合蛋白的相对分子量约为68000,可溶性表达占全菌的15%以上,经亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。Western blotting分析其能分别与HpaA抗血清、VacA抗血清和CT抗血清特异性反应。结论重组表达质粒pQE30-hctv表达成功,而且具有各自蛋白的抗原性,为进一步研究融和蛋白的功能和制备集预防和治疗为一体的Hp候选口服疫苗提供基础。
- 王国富吴利先白丽王晶郭利军
- 关键词：幽门螺杆菌粘附素细胞空泡毒素霍乱毒素B亚单位融合蛋白
- HpaA蛋白在幽门螺杆菌感染诊断中的应用被引量：2
- 2006年
- 目的建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,探讨以重组蛋白作为抗原在诊断H.pylori感染中的价值。方法将从临床分离菌株中获得的HpaA基因在大肠杆菌中表达,用Ni2+-NTA柱纯化表达的HpaA作为抗原,建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法,与诊断标准比较评价其应用的可行性。结果经超声破碎后,用SDS-PAGE分析显示,HpaA蛋白主要存在于上清中,纯化抗原检测临床标本中HpaA抗体的敏感性和特异性分别为100.0%和90.1%。结论以重组蛋白为抗原初步建立检测血清HpaA抗体的ELISA间接法敏感性、特异性高,为制备商品化的试剂盒奠定了基础。
- 吴利先王国富白丽王晶潘云华郭利军
- 关键词：幽门螺杆菌ELISA诊断试剂
- 解脲脲原体的耐药性分析及其耐氟喹诺酮的分子机制研究被引量：6
- 2007年
- 目的检测128株临床分离解脲脲原体(UU)对9种药物的敏感性,并检测喹诺酮类耐药UU对5种喹诺酮药物的MIC以及gyrA和parC基因突变情况。方法应用支原体分离鉴定、计数药敏试剂盒检测UU对9种药物的敏感性,用微量肉汤稀释法检测耐药UU菌株对5种喹诺酮类药物的MIC,用PCR和DNA测序及序列比较检测基因突变。结果UU对多西环素最敏感,其次为米诺环素、交沙霉素、司帕沙星及克林霉素,对大环内酯类药物阿奇霉素和罗红霉素高度耐药。而司帕沙星、加替沙星和左氧氟沙星的MIC范围在0.25～8μg/mL,抑制UU活性强于氧氟沙星和环丙沙星。10株喹诺酮类耐药UU中有3株只有parC基因第80位TCA→TTA的突变,氨基酸由丝氨酸→亮氨酸,1株GyrA基因第95位密码子GAC→GAA的突变,氨基酸由天冬氨酸→谷氨酸。6株两者同时存在。结论在UU治疗中可首选多西环素,其次为米诺环素和交沙霉素。gyrA基因95位密码子和parC基因80位的突变密码子与UU耐喹诺酮类药物密切相关。
- 吴利先王国富陶娅玲蔡涛
- 关键词：解脲脲原体氟喹诺酮类药物耐药机制
- 幽门螺杆菌粘附素基因的原核表达
- 2006年
- 目的:构建幽门螺杆菌粘附素(hpaA)基因的原核表达载体,并诱导表达。方法:用PCR扩增hpaA目的基因片段,克隆至pQE-30表达载体中,构建含目的基因的表达质粒pQE-hpaA,转化E.coli DH5α,经IPTG诱导表达蛋白HpaA;Western blot分析其免疫反应性。结果:经测序hpaA基因片段由783bp组成,可编码260氨基酸残基的多肽。经SDS-PAGE分析相对分子量(Mr)约为30000。可溶性表达占全菌的42%以上。Westernblot分析能与Hp全菌抗血清反应。结论:成功构建了粘附素hpaA基因的原核表达载体并能高效表达,为研制Hp疫苗提供理论依据。
- 吴利先王国富白丽王晶郭利军
- 关键词：幽门螺杆菌
- 慢性乙型肝炎患者血清细胞因子检测的临床意义
- 2008年
- 目的:探讨慢性乙型肝炎患者血清转化因子(αTGF-)α和白细胞介素-8(IL-8)水平的变化。方法:应用放免法对44例慢性乙型肝炎患者进行了血清TGF-α和IL-8水平检测,并与34名正常人作比较。结果:慢性乙型肝炎组患者血清TGF-α和IL-8水平均显著地高于正常人组(P<0.01)。结论:检测慢性乙型肝炎患者血清TGF-α和IL-8水平对疾病的预后估计具有重要临床意义。
- 吴利先王国富罗涛
- 关键词：慢性乙型肝炎细胞因子转化生长因子-Α白细胞介素-8
