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王艳林: 作品数：241 被引量：485H指数：10; 供职机构：三峡大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金湖北省高等学校优秀中青年科技创新团队计划项目更多>>; 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>

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天花粉蛋白突变体的构建及其与重组天花粉在原核系统中的表达和纯化: 2011年; 目的:对天花粉蛋白(TCS)的第120-123位氨基酸进行缺失突变,并在原核系统中对其进行表达和纯化。方法:利用重叠延伸PCR的方法得到TCS突变体cDNA,并克隆入原核表达载体pET-28(a+)。酶切和测序鉴定后,将突变体质粒pET-28(a+)-mTCS转化BL21(DE3)表达菌,经IPTG诱导表达后,对表达产物用Ni2+-NTA亲和层析柱进行纯化和Western-blot鉴定。结果:利用重叠延伸PCR成功获得突变天花粉蛋白的编码序列,并构建pET-28(a+)-mTCS原核表达质粒。在BL21(DE3)菌中,突变体蛋白(mTCS)可被IPTG诱导性表达,并被Ni2+-NTA树脂有效纯化。结论:本实验成功获得一种突变体TCS,并建立该突变TCS的原核表达和纯化的实验方法。; 曹卫红黄利鸣王艳林刘朝奇彭平平宋华梅尤程程黄益玲谭寒星吴燕珍; 关键词：天花粉蛋白基因突变原核表达

整合素αvβ3拮抗剂HYPOO23对耐药神经胶质瘤细胞U251凋亡的影响被引量：2: 2018年; 目的观察整合素αvβ3拮抗剂HYPOO23对耐药神经胶质瘤细胞凋亡的影响。方法用替莫唑胺溶液浓度递增的方法,培养耐药胶质瘤细胞U251TR。将U251TR分为4组:对照组、HYPOO23组、替莫唑胺组和HYPOO23+替莫唑胺组,分别采用对照试剂、HYPOO23、替莫唑胺和HYPOO23+替莫唑胺处理。用流式细胞术Annexin V FITC/PI双染法测细胞凋亡;用Western blot检测MGMT、P-gp、MRP和GST蛋白表达水平。结果成功培养耐药细胞U251TR,耐药指数RF=8.03。HYPOO23+替莫唑胺组凋亡率较其他3组升高(P<0.05)。与对照组和替莫唑胺组相比,HYPOO23组和HYPOO23+替莫唑胺组的MGMT和P-gp蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论整合素拮抗剂可以调节耐药胶质瘤细胞对替莫唑胺的敏感性,促进凋亡,这现象可能与MGMT和P-gp表达下降有关。; 吕帅王艳林刘彦廷蔡宏新艾文兵; 关键词：神经胶质瘤整合素耐药凋亡

花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用研究被引量：24: 2008年; 目的研究花椒挥发油抗宫颈癌Hela细胞作用及其可能机制。方法花椒挥发油按不同时间（24、48、72、96 h）及不同浓度（0.125-16 mg/mL）分别处理Hela细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。结果4 mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72 h可显著抑制Hela细胞增殖,1 mg/mL花椒挥发油处理Hela细胞72 h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少。结论花椒挥发油可抑制Hela细胞增殖并激发细胞凋亡。; 袁太宁王艳林汪鋆植; 关键词：花椒 HELA细胞细胞凋亡

膜上高表达钙网蛋白的凋亡肿瘤细胞在肿瘤预防中的应用: 目的：近年来研究发现,紫外线、射线及某些化疗药物诱导肿瘤细胞凋亡时,能使肿瘤细胞由非免疫原性转变为具有免疫原性,发生免疫原性转化的肿瘤细胞,内质网上的钙网蛋白(CRT)转位到肿瘤细胞膜表面。由于肿瘤细胞免疫原性转化并非所...; 吴红艳王艳林; 关键词：钙网蛋白细胞疫苗

重组人ERP57蛋白克隆和原核表达: 2010年; 目的:克隆人ERP57蛋白进行原核表达和纯化。方法:采用巢式RT-PCR从人非小细胞肺腺癌A549细胞总RNA中克隆人ERP57 cDNA,构建ERP57原核表达质粒(pET-28a/ERP57)并转化E.coli的BL21菌株。IPTG诱导蛋白表达,并在变性条件下经Ni-NTA树脂亲和层析纯化。分别用SDS-PAGE和Western blotting鉴定。结果:成功获得大小为1518bp的人ERP57基因片段,转化菌诱导性表达61kDa的人ERP57蛋白,该蛋白可经Ni-NTA树脂亲和层析高度纯化。结论:成功获得纯化的重组人ERP57蛋白,为后续ERP57蛋白功能研究奠定了基础。; 杨建林韩钰王艳林张伟; 关键词：基因克隆原核表达蛋白纯化

多胺检测技术与临床应用: 2017年; 多胺是一类带有正电荷的有机小分子,参与机体生长发育、基因表达调控、细胞凋亡等重要的生理过程。研究发现,多胺代谢紊乱与包括肿瘤在内的多种疾病的发生与发展密切相关,由此多胺代谢也成为疾病治疗的重要新靶点。近年来,多种分析技术被应用于生物样品中多胺及其代谢衍生物的检测与分析,包括色谱层析、色谱-质谱联用、核磁共振波谱和抗体依赖的分析等。这些技术的应用结果提示,多胺检测在临床疾病的诊断和鉴别中具有重要的潜在应用价值。文章就该领域的研究进展做一简要综述。; 徐珊王艳林

鸟氨酸脱羧酶基因反义RNA对肝癌细胞HepG2的影响被引量：4: 2010年; 目的:探讨鸟氨酸脱羧酶(ornithine decarboxylase,ODC)基因反义RNA对肝癌细胞HepG2的影响。方法:构建ODC反义RNA的真核表达质粒,将此质粒转染HepG2细胞后,RT-PCR和Western印迹法筛选ODC表达抑制的细胞株。以此细胞株为模型,分析ODC反义RNA对细胞生长、细胞周期和对抗癌药物米托蒽醌敏感性的影响。结果:成功构建ODC反义RNA真核表达载体并获得稳定低表达ODC的肝癌细胞株Hr1。与对照细胞相比,ODC低表达引起HepG2细胞生长抑制,72h生长抑制率为31%;流式细胞术检测细胞周期发现,Hr1G1期细胞数(56.2%)显著性高于对照(48.2%),而S期细胞(25.5%)则显著性低于对照(34.9%),提示ODC低表达导致G1期阻滞;用米托蒽醌(100μg/L)处理两种细胞后发现,Hr1对药物的敏感性显著性高于对照细胞,处理48h后药物对HepG2和Hr1的抑制率分别是33.4%和60.6%,72h后的抑制率分别是60.8%和83.8%。结论:ODC反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞生长,在抗肿瘤治疗中具有潜在的临应用价值。; 任玉珊韩钰秦烨王艳林; 关键词：鸟氨酸脱羧酶肝癌细胞反义RNA

高表达OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1细胞诱导抗肿瘤免疫应答的实验研究被引量：3: 2019年; 目的在细胞和实验动物水平上分析高表达OAZI-1对小鼠乳腺癌4T1细胞诱导抗肿瘤免疫应答的影响。方法RT-PCR和Western blot用于鉴定高表达OAZI-1的4T1细胞(4T1/OAZI-1);流式细胞仪检测Mφ下同和DC对4T1细胞的吞噬率以及成熟DC标志性表面分子的表达水平;ELISA检测细胞培养上清和小鼠血清中IFN-γ和TNF-α含量。用4T1/OAZI-1和4T1/3.1对照细胞分别接种Balb/c小鼠后,观察接种瘤的生长状况及荷瘤小鼠的生存期。结果1)成功构建OAZI-1高表达的4T1/OAZI-1细胞株;2)M?和DC对4T1/OAZI-1细胞的吞噬率(10.8%,58.4%)显著高于对照细胞(6.3%,19.6%);3)将DC与4T1/OAZI-1共孵育后,CD40、CD80和CD86(成熟DC细胞表面标志分子)表达阳性的DC比率(62.8%、77.9%和75.1%)显著高于和对照细胞共孵育的DC(43.9%、57.5%和49.6%);4)将4T1/OAZI-1活化的DC与Balb/c小鼠脾淋巴细胞共孵育后,细胞培养上清中IFN-γ含量(28.7 pg/ml)显著高于对照细胞(19.4 pg/ml);5)将4T1/OAZI-1和4T1/3.1细胞分别接种Balb/c小鼠右前肢腋窝皮下,小鼠体内4T1/OAZI-1接种瘤的生长速度显著低于对照细胞接种瘤,其生存期和血清TNF-α和IFN-γ水平也明显高于接种对照细胞的小鼠。结论高表达OAZI-1的小鼠乳腺癌4T1细胞能更有效地被抗原提呈细胞识别、吞噬并诱导T淋巴细胞活化与成熟,诱导机体的抗肿瘤免疫应答,抑制接种瘤在动物体内的生长。; 杨建林王艳林吕亚丰魏木兰曹春雨; 关键词：乳腺癌细胞抗肿瘤免疫

新多胺类似物TBP对人膀胱移行细胞癌T24细胞凋亡及迁移能力的影响: :肿瘤细胞的快速生长高度依赖于细胞内的多胺(腐胺、精眯和精胺)含量,由此干扰多胺代谢和拮抗多胺促细胞生长与分化的功能成为抗肿瘤药物设计的新靶点和临床治疗的新策略.; 杨建林韩钰王凯张贺吉王艳林; 关键词：多胺类似物 TBP 膀胱癌细胞迁移凋亡

肿瘤相关巨噬细胞在肿瘤发展及治疗中的作用被引量：3: 2014年; 巨噬细胞在不同的刺激因子作用下能够分化为具有抗肿瘤活性的M1型巨噬细胞和具有促肿瘤活性的M2型巨噬细胞。肿瘤组织中的巨噬细胞主要为M2型,它们参与肿瘤的发生、发展、侵袭和转移等过程。特定的刺激可将M2型巨噬细胞逆向分化为M1型巨噬细胞,由此抑制肿瘤的生长。本文将对肿瘤相关巨噬细胞的分化及与肿瘤的密切关系作简要综述。; 孙鹏王艳林; 关键词：肿瘤相关巨噬细胞肿瘤分化治疗靶点

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