王荫静
- 作品数：21 被引量：44H指数：4
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- 感光受体外周蛋白结合蛋白对虫荧光素酶体外折叠的促进作用
- 2003年
- 目的 探讨感光受体外周蛋白结合蛋白 (PBP)在体外是否有促进变性蛋白质复性的作用。虫荧光素酶用盐酸胍变性 ,然后在 PBP、HSP70、HSP6 0存在下进行体外复性 ,用虫荧光素酶分析系统检测该酶的复性程度。结果显示 PBP对虫荧光素酶的复性能力很低 ,当与 HSP70同时作用时 ,酶活力明显高于 PBP或 HSP70组 ,而 PBP与 HSP6 0组合对酶的复性能力较HSP6 0组未见有明显差异 ;当 PBP,HSP70 ,HSP6 0三者同时存在时 ,酶活力恢复率最高。去除复性缓冲液中的 ATP及其再生系统 ,酶活力的复性率明显下降。结果表明 PBP具有协助 HSP70 ,在 ATP依赖的情况下促进变性虫荧光素酶体外复性的分子伴侣功能。
- 刘成刚朱美财占志王荫静李文刘亚宁
- 关键词：虫荧光素酶热休克蛋白质类突变
- 人内皮抑素基因克隆及在大肠杆菌中的表达
- 2000年
- 目的 :获得具有抑制血管内皮细胞生长活性的重组人内皮抑素蛋白。 方法 :从人胎肝中分离总 RNA,经反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)得到 endostatin全基因。用原核细胞表达载体构建了 p BV2 2 0 /endostatin重组质粒 ,经 DNA测序确认后 ,将其转化大肠杆菌 DH5 a进行表达、初步纯化及活性测定。 结果 :经 SDS- PAGE电泳分析表达产物分子量约 2 0 Kda,薄层扫描显示表达产物可达细菌总蛋白的 30 %。 结论 :经生物学活性测定 ,表达蛋白能够抑制 b FGF(碱性成纤维细胞生长因子 )对牛毛细血管内皮细胞 (BCEC)的增殖作用。
- 李文朱美财王荫静占志刘成刚向培德
- 关键词：人内皮抑素基因克隆大肠杆菌血管内皮生长因子聚合酶链反应基因表达
- 全文增补中
- 一种新型纤溶酶原激活剂(TPA)突变体的结构与用途
- 本发明是根据TPA的结构特点，在将TPA分子中指状区和Kringlel区去掉的基础上，将TPA分子中PAI-1结合位点氨基酸进行突变，构建具有TPA活性且其活性不被PAI-1抑制的新一代TPA突变体。主要内容是扩增出天然...
- 朱美财李文占志王荫静刘成刚
- 文献传递
- 人内皮抑素克隆表达及对血管内皮细胞生长的抑制作用被引量：4
- 2000年
- 目的 获得具有抑制血管内皮细胞生长活性的重组人内皮抑素 (recombinanthumanen dostatin)。方法 从肝细胞中分离总RNA ,经反转录多聚酶链反应 (RT PCR)得到endostatin全基因。用原核细胞表达载体构建了pBV2 2 0 /endostatin重组质粒 ,经DNA测序确认后 ,将其转化大肠杆菌DH5α进行表达、初步纯化及活性测定。结果 经SDS PAGE分析 ,表达产物相对分子质量 (Mr)约 2 0× 10 3,薄层扫描显示表达产物可达细菌总蛋白的 30 %。结论 经生物学活性测定 ,表达蛋白能够抑制碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对牛毛细血管内皮细胞 (BCEC)
- 李文朱美财王荫静占志刘成刚向培德
- 关键词：内皮抑素基因表达抗血管生成作用
- 卡维地洛对高血压大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合酶-一氧化氮系统的影响被引量：8
- 2004年
- 观察基础和卡维地洛干预条件下,自发性高血压大鼠和Wistar大鼠心肌成纤维细胞一氧化氮合酶-一氧化氤系统活性的变化。胰酶消化法分离、培养大鼠心肌成纤维细胞,采用硝酸还原酶法和分光光度法观察基础和卡维地洛干预条件下,培养基中一氧化氮合酶活性及一氧化氮含量的变化。结果发现,在基础状态下72 h,高血压大鼠组心肌成纤维细胞一氧化氮含量(66.6±3 5/μmol/L)及一氧化氮合酶活性(16.7±0.7 kU/L)较Wistar大鼠组(80.8±6.2/μmol/L和29.1±2.1 kU/L)显著降低,并有统计学意义(P<0.01);一氧化氮含量及一氧化氮合酶活性随卡维地洛浓度的增高而增加,均呈别量依赖性;另外,在不同浓度卡维地洛作用下,高血压大鼠组心肌成纤维细胞的一氧化氮含量随一氧化氮合酶活性的增强而增高,二者呈显著正相关(r=0.911,P<0.01)。结果提示,高血压大鼠心肌成纤维细胞的一氧化氮合酶一氧化氮系统功能异常,表现为一氧化氮合酶活性降低,一氧化氮含量减少。卡维地洛使心肌成纤维细胞内一氧化氯合酶一氧化氮系统活性显著增高,并呈浓度依赖性,其中对高血压大鼠的影响远远高于正常血压组,这可能是卡维地洛抑制血压增高的重要机制之一。
- 张海涛赵连友刘朝中罗慧兰王荫静于心亚田建伟
- 关键词：内科学心肌成纤维细胞卡维地洛一氧化氮一氧化氮合酶自发性高血压大鼠
- 一种新型纤溶酶原激活剂(TPA)突变体的结构与用途
- 本发明是根据TPA的结构特点,在将TPA分子中指状区和Kringle1区去掉的基础上,将TPA分子中PAI－1结合位点氨基酸进行突变,构建具有TPA活性且其活性不被PAI－1抑制的新一代TPA突变体。主要内容是扩增出天然...
- 朱美财李文占志王荫静刘成刚
- 文献传递
- 飞行员血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性及其血清水平的研究
- 2001年
- 目的 了解飞行员血管紧张素转换酶 (ACE)基因插入 /缺失 (I/ D)多态性及其血清水平 ,探讨 ACE基因多态性与飞行员耐力可能的关系。 方法 飞行员 118例 ,健康对照者 96例 ,用聚合酶链反应 (PCR)扩增技术检测 ACE基因 I/ D多态性 ,用比色法测定血清 ACE水平。 结果 位于 ACE基因第 16内含子的 I/ D多态性经 PCR扩增后呈三种基因型 :纯合子插入型 (II)、纯合子缺失型 (DD)和杂合子插入 /缺失型 (I/ D)。飞行员组 II基因型 (4 4.0 7% )和 等位基因频率 (0 .6 5 )显著高于健康对照组 (分别为 31.2 5 %和 0 .5 2 )。 ACE基因多态性与血清 ACE水平明显相关 (DD>ID,DD>II)。 结论 ACE
- 刘红巾蔡庆纪桂英朱美财占志王荫静
- 关键词：肽基二肽酶A身体耐力航天医学
- 感光受体外周蛋白结合蛋白对虫荧光素酶体外折叠的促进作用被引量：2
- 2002年
- 探讨感光受体外周蛋白结合蛋白 (PBP)在体外是否有促进变性蛋白质复性的作用。虫荧光素酶用盐酸胍变性 ,然后在PBP、HSP70、HSP6 0存在下进行体外复性 ,用虫荧光素酶分析系统检测该酶的复性程度。结果显示PBP对虫荧光素酶的复性能力很低 ,当与HSP70同时作用时 ,酶活力明显高于PBP或HSP70组 ,而PBP与HSP6 0组合对酶的复性能力较HSP6 0组未见有明显差异 ;当PBP ,HSP70 ,HSP6 0三者同时存在时 ,酶活力恢复率最高。去除复性缓冲液中的ATP及其再生系统 ,酶活力的复性率明显下降。结果表明PBP具有协助HSP70 。
- 刘成刚朱美财占志王荫静李文刘亚宁
- 关键词：热休克蛋白虫荧光素酶复性
- 卡维地洛对高血压大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的抑制作用被引量：3
- 2003年
- 目的 :探讨卡维地洛、比索洛尔、哌唑嗪对培养的 SHR和 Wistar大鼠心脏成纤维细胞 ( CFs)胶原合成的影响。方法 :采用胰酶消化法培养 CFs,用3 H-脯氨酸掺入法分别观察卡维地洛、比索洛尔、哌唑嗪干预下两组大鼠 CFs胶原合成的情况。结果 :1各种浓度的卡维地洛 ( 0 .0 1～ 10μmol/ L )可以浓度依赖的方式抑制 CFs 3 H-脯氨酸掺入量 ,与 Wistar大鼠组相比 ,SHR组 CFs受抑制的效应更强。2同等浓度比索洛尔对两组大鼠 CFs3 H-脯氨酸掺入量表现出轻度抑制。 3同等浓度哌唑嗪对两组大鼠 CFs3 H-脯氨酸掺入量均无明显影响。结论 :卡维地洛呈浓度依赖性抑制 CFs合成胶原 ,其作用机制部分与阻滞β1 受体有关。
- 张海涛赵连友王荫静汪娜田建伟王士雯
- 关键词：卡维地洛比索洛尔哌唑嗪胶原合成
- 重组人粒细胞/巨噬细胞集落刺激因子的研究
- 朱美财蔡庆王荫静占志李文向培德
- 粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子是一个具有多项潜能的造血生长因子，因为它不仅能够促进造血前体细胞的增殖、分化和成熟，而且对其他的细胞，如抗原递呈细胞（APC）、成纤维细胞、角质细胞、皮肤粘膜细胞等，均有着不同程度的刺激作用。...
- 关键词：
- 关键词：基因重组集落刺激因子
