王鸣
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划“十一五”国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向人fgl2的微小RNA腺病毒对裸鼠肝癌皮下瘤的抑制作用
- 2018年
- 目的比较不同剂量的靶向人纤维介素蛋白(fibrinogen-like protein 2,fgl2)的微小RNA(micro RNA,miRNA)腺病毒注射液(Ad-hfgl2-miRNA)对裸鼠人肝癌皮下移植瘤生长的抑制作用。方法建立HCCLM3裸鼠人肝癌皮下移植瘤模型,瘤内注射高、中、低剂量(3.3×10^(10)IU、1.0×10^(10)IU、3.3×10~9IU)Ad-hfgl2-miRNA注射液及非相关对照(Ad-neg-miRNA),每6 d干预1次,共干预4次,期间测量肿瘤大小,计算相对肿瘤体积及相对肿瘤增殖率。结果各个干预组不同测量时间点的肿瘤体积均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),且干预剂量越高,肿瘤生长的抑制作用更明显;高、中剂量干预组各时间点的相对肿瘤体积均显著小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),低剂量干预组和对照组比较差异无统计学意义。干预第16天和第19天时高、中、低剂量组相对肿瘤增殖率分别为28.37%、47.50%、57.65%及17.86%、44.50%、53.31%,抑制肿瘤生长效果明显。结论 Ad-hfgl2-miRNA腺病毒注射液显著抑制裸鼠人肝癌皮下瘤生长,干预效果明显,且干预效应和注射剂量有一定依赖关系,为探索肝癌生物治疗提供了新思路。
- 王鸣习东周海荔宁琴
- 关键词：微小RNA腺病毒肝细胞癌
- 小鼠Fas及TNFR1的miRNA表达质粒的构建及体内外干预的初步研究
- 2018年
- 目的:探讨针对小鼠Fas及TNFR1的miRNA表达质粒在体外对相应基因表达的干预效应及体内分别对重型肝炎小鼠的治疗作用。方法:分别构建产生小鼠Fas-miRNA、TNFR1-miRNA的表达载体P-m Fas-miRNA、P-m TNFR1-miRNA,将其与相应表达质粒(pc DNA3.1-m Fas或pc DNA3.1-m TNFR1)分别共转染到中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中。通过实时荧光定量PCR及Western Blot观察Fas或TNFR1在转录水平及蛋白水平表达量的改变。建立重型肝炎小鼠模型,通过尾静脉高压注射P-m FasmiRNA或P-m TNFR1-miRNA,分别观察P-m Fas-miRNA或P-m TNFR1-miRNA对重型肝炎小鼠的治疗作用。结果:成功构建了针对小鼠Fas及TNFR1的miRNA。在CHO细胞中,干预组Fas及TNFR1在RNA水平及蛋白水平的表达均较对照组显著降低。Pm Fas-miRNA、P-m TNFR1-miRNA分别提高重型肝炎小鼠生存率至11.1%和20%。结论:Fas及TNFR1可作为重型肝炎基因治疗的靶点,利用miRNA沉默Fas及TNFR1基因将有利于重型肝炎的治疗,为后续的进一步研究奠定了基础。
- 王鸣叶华丽刘君慧陈佳佳习东宁琴
- 关键词：重型肝炎FASTNFR1MICRORNA
- 抗MDA5抗体阳性皮肌炎患者临床特点与预后分析
- 2023年
- 目的探讨抗黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)抗体阳性皮肌炎(DM)患者临床特点与预后的关系。方法回顾分析2021年1月至2022年2月在华中科技大学同济医学院附属同济医院确诊为抗MDA5抗体阳性DM患者15例,根据转归情况分为好转组(9例),死亡组(6例),收集相关临床资料,比较分析临床特点与预后的关系。结果15例抗MDA5抗体阳性DM患者中,好转组与死亡组年龄、性别差异无统计学意义(均P>0.05);两组Gottron征、眶周皮疹、溃疡性皮疹、技工手、关节炎、肺间质病变(ILD)发生率差异无统计学意义(均P>0.05);而死亡组发热、快速进展性间质性肺病(RPILD)的发生率明显高于好转组,差异具有统计学意义(均P<0.05);两组患者白细胞计数、淋巴细胞计数、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、铁蛋白、血沉(ESR)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平差异均无统计学意义(均P>0.05),而死亡组干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(hsCRP)水平明显高于好转组,差异有统计学意义(均P<0.05);两组患者淋巴细胞亚群各项指标较参考值均明显下降,但两组间差异无统计学意义(均P>0.05);两组患者在合并其他肌炎抗体方面差异无统计学意义,检测到其他肌炎抗体最多的为肌炎相关抗体抗Ro-52抗体,好转组7例,死亡组5例。结论抗MDA5抗体阳性DM患者入院时INF-γ、IL-6及hsCRP明显升高,病程中合并发热、RPILD的患者提示预后较差。
- 李增莲王鸣
- 关键词：皮肌炎
- 靶向TNF-α的miR-181c在乙型重型肝炎发病中的作用研究
- 王鸣习东王发席张忠威马文文罗小平宁琴
- 重组hfgl2-miRNA腺病毒在裸鼠人肝癌模型中的安全性初探被引量：1
- 2018年
- 目的:探讨针对人hfgl2-miRNA的腺病毒颗粒(Ad-hfgl2-miRNA)在裸鼠人肝癌模型中的体内分布及安全性。方法:利用人肝癌细胞系HCCLM6建立裸鼠人肝癌细胞皮下移植瘤模型,每只裸鼠瘤内注射1×10~9 IU的Ad-hfgl2-miRNA,于给药后第1、3、7、9、11、15、19、24天采用qRT-PCR检测Ad-hfgl2-miRNA在裸鼠心、肝、脾、肺、肾、瘤、小肠中的表达,通过检测体内生化指标及组织病理改变,初步评估药物的安全性。结果:Ad-hfgl2-miRNA在裸鼠心、肝、脾、肺、肾、瘤、小肠中均有表达,以心、肝、肾、瘤、小肠表达较强,维持至停药后第24天。各生化指标检测值无明显异常或仅有轻度异常。组织病理学未见明显病理改变。结论:Ad-hfgl2-miRNA在荷瘤裸鼠体内及瘤内能够安全表达,未见有器官损害表现,为今后开展Ad-hfgl2-miRNA的基因治疗奠定了基础。
- 王鸣刘君慧习东宁琴
- 关键词：腺病毒肝癌微小RNA
- 应用N-乙酰半胱氨酸治疗慢性乙型肝炎重度患者临床疗效初步研究被引量：6
- 2020年
- 目的探讨应用注射用N-乙酰半胱氨酸(NAC)治疗慢性乙型肝炎重度患者的临床疗效。方法 2015年1月~2018年12月我院诊治的慢性乙型肝炎重度患者62例,被分为观察组32例和对照组30例。在对照组,给予护肝、降黄、抗病毒等综合治疗,观察组在对照组治疗的基础上加用NAC静脉滴注,连续治疗6 w。采用放射免疫法检测血清Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、血清透明质酸(HA)和层黏连蛋白(LN)]水平,采用ELISA法检测血清白介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。结果在治疗6 w末,观察组血清ALT和AST水平分别为(45.4±2.9) U/L和(74.3±8.7) U/L,与对照组比较无显著性差异[分别为(54.0±3.9) U/L和(83.6±12.1) U/L,P> 0.05],观察组血清TBIL水平为(85.1±54.6)μmol/L,显著低于对照组[(172.4±66.3)μmol/L,P<0.05];观察组血清PC-Ⅲ、Ⅳ-C、HA和LN水平分别为(87.1±15.8)μg/L、(74.5±15.2)μg/L、(95.7±13.7)μg/L和(83.9±16.5)μg/L,显著低于对照组[分别为(122.1±14.3)μg/L、(95.6±12.6)μg/L、(153.1±18.0)μg/L和(132.6±10.1)μg/L,P<0.05];观察组血清IL-6、IL-8和TNF-α水平分别为(15.1±2.8)μg/L、(5.2±2.9)μg/L和(13.7±0.9)μg/L,显著低于对照组[分别为(32.95±6.2)μg/L、(10.5±3.4)μg/L和(23.9±3.4)μg/L,P<0.05];观察组病情控制率为87.1%,显著高于对照组[64.3%,P <0.05]。结论应用NAC治疗慢性乙型肝炎重度患者临床疗效显著且无明显的不良反应,能降低血清胆红素和肝纤维化指标水平,减轻炎症相关的细胞因子水平。
- 艾国王鸣朱纪玲邢铭友
- 关键词：慢性乙型肝炎N-乙酰半胱氨酸细胞因子
- hfg12凝血酶原酶短干扰RNA表达质粒的构建及其效应被引量：1
- 2008年
- 目的探索人fg12凝血酶原酶（hfg12）短干扰RNA（siRNA）在体外对hfg12凝血酶原酶基因表达的干预效应。方法构建产生hfg12短发夹状RNA（shRNA）的载体Phfg12shRNA，将其与hfg12-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）融合基因表达质粒pEGFPhfg12共转染到中国仓鼠卵母细胞（CHO细胞），转染48h后，倒置荧光显微镜下观察EGFP在CHO细胞中的表达，并通过流式细胞仪检测荧光细胞阳性率。将Phfg12shRNA和hfg12表达质粒pcDNA3．1-hfg12共转染到CHO细胞，通过实时荧光定量PCR和免疫组织化学检测hfg12基因转录和蛋白表达水平的变化。分为4组：共转染P—hfg12shRNA和pcDNA3．1-hfg12为干预组，共转染无关序列shRNA表达质粒和pcDNA3．1-hfg12为非相关干预组，仅转染pcDNA3．1-hfg12为未干预组，不转染任何质粒为空白组。结果在CHO细胞中，含Phfg12shRNA的干预组较未干预组和非相关干预组的绿色荧光强度明显减弱，荧光细胞数明显减少；荧光表达阳性细胞率：干预组α为6．5％±0．2％，未干预组α为40．1％±1．8％，两组比较，Χ^2=8．056，P〈0．01，差异有统计学意义。抑制效率达85．5％。hfg12shRNA显著抑制了hfg12mRNA和蛋白质的表达，干预组hfg12mRNA水平为0．11±0．01，未干预组为0．84±0．06，两组比较，F=10．7，P〈0．01，差异有统计学意义。结论P—hfg12shRNA可在体外高效特异地抑制hfg12基因转录和蛋白的表达，为进一步的体内干扰实验奠定了基础。
- 习东李黎高随朱传龙郭健文王鸣罗小平宁琴
- 关键词：肝功能衰竭RNACHO细胞
- 腺病毒载体在小鼠肝脏的分布及其表达规律研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究腺病毒载体介导的β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因在小鼠肝脏的分布及表达情况,评价腺病毒载体作为基因治疗转导系统的有效性及安全性,为进一步的目的基因导入及表达奠定基础。方法将Balb/cJ小鼠随机分为正常组及暴发性肝炎组,给小鼠经尾静脉注射2×108PFU腺病毒,收集24h、48h、72h、96h、120h和第7天小鼠血清,检测谷丙转氨酶和总胆红素,同时取肝脏、肺脏、心脏、肾脏标本进行X-gal染色,以观察腺病毒载体在各脏器的表达情况。取MHV-3诱导的暴发性肝炎组小鼠24h、48h、72h、96h肝脏,检测腺病毒载体在肝脏的表达情况。结果腺病毒载体主要在小鼠肝脏表达,并于72小时表达最高,在正常小鼠及暴发性肝炎小鼠肝脏中表达效率分别约55.7%和25.7%,之后逐渐消减;正常组小鼠注射腺病毒载体后,肝功能无明显变化。结论腺病毒载体介导的报告基因可在肝脏高效表达且未见明显的肝损害,可作为基因治疗中安全有效的基因传递系统用于治疗肝脏疾病。
- 王鸣郭建文习东刘君慧叶华丽罗小平宁琴
- 关键词：暴发性肝炎腺病毒载体基因治疗
- 小鼠纤维介素蛋白2微小RNA表达质粒的构建及其对体内外相应基因的干预效应
- 2012年
- 目的:探讨小鼠纤维介素蛋白2(fgl2)的miRNA(微小RNA)表达质粒在体外对相应基因表达的干预效应及在体内对重型肝炎小鼠的治疗作用。方法:分别构建产生小鼠fgl2-miRNA的表达载体(P-mfgl2-miRNA),将其转染到中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中。实验分组:将P-mfgl2-miRNA与小鼠fgl2的表达质粒(pcDNA3.1-mfgl2)共转染到CHO细胞作为干预组,无关序列miRNA表达质粒(irrelevant P-miRNA)与pcDNA3.1-mfgl2共转染为非相关对照组,仅转染pcDNA3.1-mfgl2为阳性对照组,未转染任何质粒为空白对照组。通过实时荧光定量PCR及Western blot观察fgl2在基因转录水平及蛋白水平表达量的改变。建立重型肝炎小鼠模型,通过尾静脉高压注射P-mfgl2-miRNA者为治疗组,注射irrelevant P-miRNA者为非相关组,注射相同剂量生理盐水者为阴性对照组,观察P-mfgl2-miRNA对重型肝炎小鼠的治疗作用。结果:成功构建了针对小鼠fgl2的miRNA。在CHO细胞中,干预组fgl2在RNA水平及蛋白水平的表达均较非相关对照组显著降低。P-mfgl2-miRNA可提高重型肝炎小鼠生存率至8.3%。结论:Fgl2可作为重型肝炎基因治疗的靶点,利用miRNA沉默fgl2基因将有利于重型肝炎的治疗,为后续的进一步研究奠定了基础。
- 王鸣习东叶华丽刘君慧马文文罗小平宁琴
- 关键词：重型肝炎RNA干扰微小RNA
