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重组hBMP7基因转染成纤维细胞及其表达被引量：1: 2004年; 目的探讨重组骨形态发生蛋白-7腺病毒载体(AdCMV-BMP7)在人真皮成纤维细胞获得稳定表达的可行性。方法重组腺病毒载体AdCMV-BMP7经293细胞包装、扩增后,转染人真皮成纤维细胞。转染48 h后以免疫组织化学、RT-PCR等方法检测hBMP7基因在人真皮成纤维细胞内的表达情况。结果在合适的滴度下,重组腺病毒载体AdCMV-BMP7对成纤维细胞的增殖能力无明显影响。转染48 h后免疫细胞化学显示已转染AdCMV-BMP7的成纤维细胞内有大量的hBMP7表达,RT-PCR也检测到特异的hBMP7基因片段的表达。结论重组腺病毒载体AdCMV-BMP7能够被转导入成纤维细胞内,并稳定表达hBMP7。; 陈付国祝联刘德莉魏娴刘天一王敏柴岗王晓云周广东夏万尧崔磊刘伟曹谊林; 关键词：骨形态发生蛋白-7 腺病毒转基因技术成纤维细胞 RT-PCR

BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞生物学的影响被引量：1: 2005年; 目的探讨BMP7腺病毒基因转染对骨髓基质干细胞(BMSCs)的体外、体内的生物学功能影响。方法抽取羊的骨髓,分离、培养骨髓基质干细胞。用重组骨形成蛋白7腺病毒(adenovirus bone morphogenetic protein 7;Adeno-BMP7)转染(M．O．I=100)70％-80％融合时的第二代细胞,三天后分别进行透射电镜观察、流式细胞仪检测、Western-blot、钙结节染色以及珊瑚和细胞复合物皮下回植。结果在体外:细胞超微结构观察显示Adeno-BMP7基因转染后的BMSCs的物质合成代谢功能活跃;流式细胞仪检测表明Adeno-BMP7基因转染对BMSCs的细胞周期无明显影响;Western-blot检测证明转染Adeno-BMP7后的BMSCs有BMP7在蛋白水平上的表达;染色表明转染Adeno-BMP7后的BMSCs可形成较大的钙结节。在体内:转染Adeno-BMP7的BMSCs可明显促进新骨的形成,与没转染Adeno-BMP7的BMSCs有差异。结论Adeno-BMP7转染可促进BMSCs的体外成骨定向分化,Adeno-BMP7转染后的BMSCs具有更强的体内成骨能力。; 祝联周广东陈付国刘德莉崔磊刘伟曹谊林; 关键词：重组腺病毒骨形成蛋白7 骨髓基质干细胞

游离背阔肌肌皮瓣移植修复头皮恶性肿瘤切除后的复杂创面被引量：2: 2009年; 目的修复头皮恶性肿瘤切除后的复杂创面，尤其是伴有部分颅骨缺损，甚至部分硬脑膜缺损的创面。方法应用游离背阔肌肌皮瓣，修复17例头皮恶性肿瘤切除后的创面（〉200cm2）。结果17例皮瓣全部存活，1例皮瓣下局部感染，经换药后愈合。9例术后4周开始放疗。17例均未要求颅骨修补。随访6—25个月，4例肿瘤复发，其中3例死亡；1例肺转移；12例无瘤生存。结论游离背阔肌肌皮瓣是修复头皮恶性肿瘤切除后复杂创面的理想选择之一。; 徐华董佳生祝联王露萍常利民; 关键词：头颈部肿瘤修复外科手术外科皮瓣

自体骨髓间充质干细胞复合β-磷酸三钙修复犬下颌骨节段缺损被引量：6: 2006年; 目的探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)复合β-磷酸三钙(β-TCP)构建的组织工程骨修复犬下颌骨节段缺损的可行性方法体外成骨诱导犬BMSCs,将第2代细胞复合β- TCP后修复6只犬右侧3cm的下颌骨节段缺损；6只犬以单纯β-TCP植入作为对照,术后4,12,26,32周分别通过影像学、大体形态、组织学和生物力学检测判断骨缺损的修复效果。结果诱导后第2代细胞已具成骨活性。4～26周X线片示实验组新骨形成增加,密度增高,对照组则材料吸收形成明显阴影区,只有少量骨痂。32周实验组骨愈合良好,有较多板层骨；对照组为纤维性愈合骨不连,骨密度检测实验组显著高于对照组。实验组力学强度与正常下颌骨差异无统计学意义。结论自体成骨诱导BMSCs复合β-TCP形成的织工程骨可良好修复犬下颌骨节段缺损。; 袁捷祝联刘广鹏许锋翁雨来崔磊刘伟曹谊林; 关键词：下颌损伤骨髓基质干细胞 Β-磷酸三钙

病毒介导的基因转染在组织工程中的应用: 2004年; 目的构建重组病毒载体,将较多细胞因子通过病毒载体转入种子细胞,提高细胞增殖及分泌基质能力,维持表型,延缓老化。方法应用基因工程技术,构建缺陷型逆转录病毒重组载体和缺陷性腺病毒重组载体。分别通过PT67包装细胞筛选克隆及293细胞扩增,获得假病毒上清液,经浓缩纯化后转染靶细胞。结果成功构建胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、Fas配体(Fas-Ligand)、绿色荧光蛋白(GFP)等逆转录病毒载体以及TGFβ1、人骨形成蛋白因子-7(hBMP7)、端粒酶、Smad3、Smad7等腺病毒载体,其中GFP-逆转录病毒重组载体在软骨细胞表达至2月。结论通过有效的含目的基因重组载体转染种子细胞,延缓体外培养细胞的老化及促进细胞的增殖与基质分泌,获得组织工程所需要的大量种子细胞,为组织工程构建奠定了基础。; 刘德莉刘方军吴娟娟胡晓洁祝联刘伟崔磊曹谊林; 关键词：基因转染逆转录病毒载体腺病毒载体种子细胞基因工程技术

口内斜形弧线下颌骨截骨术改善下面部轮廓被引量：1: 2006年; 目的为探寻更精细的下面部轮廓整形方法。方法根据术前X线评估结果及与受术者充分讨论,对52例求美者进行口内斜形弧线截骨方法,15例同期进行颧骨整形,26例同时施行了咬肌部分切除,14例同时施行了颊脂垫切除,8例同时进行隆颏手术。结果52例中40例表示非常满意,11例满意,1例截骨稍过度,觉得效果较差。非常满意的受术者表示下面部宽度变窄,不论从正面、侧面都具备了一个优美精致的轮廓线,达到了术前的期望值。结论使用口内斜形弧线截骨方法可使下面部轮廓不管是在正面上还是在侧面上都能得到理想的效果,而且操作较简单、切口隐蔽。; 戴传昌王碧菠祁佐良董佳生王毅敏祝联王炜; 关键词：面部轮廓受术者部分切除颊脂垫

重组BMP7腺病毒的构建及转染骨髓基质干细胞后的表达被引量：5: 2005年; 根据Clonetech公司的腺病毒载体构建流程 ,原核表达载体pBlue- BMP7经一系列特定的限制性内切酶酶切 ,重组成BMP7的腺病毒载体 ,并转染 2 93细胞进行大量扩增、滴度测定。重组Adeno- BMP7经限制性内切酶PI SceⅠ和Ⅰ CeuⅠ双酶切获得BMP7基因片段 ,PCR扩增得到特异的扩增片段 ,表明重组的Adeno-BMP7载体构建成功 ,其中携带有目的基因BMP7cDNA片段。Adeno- Lac- Z的体外转染骨髓基质干细胞 (BMSCs) ,染色表明转染率可达90 %以上 ;RT- PCR、免疫组化证明Adeno -BMP7转染BMSCs后BMP7在基因和蛋白水平上均有表达 ;转染Adeno- BMP7后的BMSCs细胞悬液裸鼠肌肉内注射后 ,x光片和组织学观察都表明BMP7转染可明显促进新骨的形成 ,与没转染Adeno -BMP7的BMSCs有显著差异。; 祝联刘伟刘德莉吴娟娟王丹茹崔磊曹谊林; 关键词：重组腺病毒骨髓基质干细胞骨形成蛋白7

真皮来源细胞亚群修复小鼠颅骨缺损: 2015年; 背景:考虑到皮肤是全身最大的器官,拥有丰富的皮肤毛细血管网,可能存在足够的成体干细胞用于组织工程。目的:探讨真皮骨形成蛋白受体ⅠB亚型阳性细胞的成骨潜能和修复骨缺损的能力。方法:采用组织学方法分析骨形成蛋白受体ⅠB亚型细胞在皮肤中的定位和表达情况。新鲜皮肤组织制成单细胞悬液,以表面蛋白骨形成蛋白受体ⅠB亚型作为分选标志,采用免疫磁珠分选获得骨形成蛋白受体ⅠB亚型细胞。在体外进行成骨诱导分化,并分别通过碱性磷酸酶染色和茜素红染色检测其碱性磷酸酶和钙结节的表达。将骨形成蛋白受体ⅠB亚型细胞复合于珊瑚支架后修复小鼠颅骨缺损,术后6周通过组织学方法,术后24周通过影像学方法评估其修复骨缺损的能力。结果与结论:骨形成蛋白受体ⅠB亚型细胞在皮肤中呈单个分散存在,位于真皮网状层。通过免疫磁珠分选可获得表达骨形成蛋白受体ⅠB亚型的细胞亚群。体外成骨诱导后,碱性磷酸酶染色呈阳性表达,茜素红染色显示大量的钙结节形成,证实其在体外具有成骨分化能力。体内修复颅骨缺损6周后组织学结果显示在骨形成蛋白受体ⅠB亚型阳性细胞复合珊瑚组可见大量新生骨形成;24周影像结果显示骨形成蛋白受体ⅠB亚型阳性细胞复合珊瑚组的颅骨骨缺损组织基本完全修复。结果表明真皮来源的骨形成蛋白受体ⅠB亚型阳性细胞亚群拥有成骨的潜能,其可能是骨组织工程适合的种子细胞。; 王庭亮何金光张阳李丹董佳生祝联; 关键词：颅骨干细胞骨组织工程成体干细胞颅骨缺损

骨制松质骨螺钉内固定治疗内踝骨折被引量：2: 2002年; 目的　探讨骨制松质骨螺钉内固定治疗内踝骨折应用的可行性。方法　分别使用骨制松质骨螺钉和金属松质骨螺钉内固定治疗 2 4例内踝骨折 ,根据术后临床 (功能 )恢复情况和X线检查综合判定疗效 ,采用非参数法 (Wilcoxon)分析两组治疗效果。结果　两种治疗方法疗效差异无显著性(P >0 0 5 )。; 祝联洪天禄曹谊林; 关键词：骨螺丝骨折内固定术踝损伤

腹壁下动脉穿支横行下腹部皮瓣游离移植乳房再造被引量：6: 2004年; 目的对下腹部横行腹直肌(TRAM)肌皮瓣的术式进行改进和完善,从而避免腹部并发症,扩大皮瓣的临床应用范围。方法 TRAM瓣改进为保留腹直肌及其前鞘,分离出腹壁下动脉穿支横行下腹部皮瓣(DIEP),用于21例乳房再造。结果20例双侧腹壁下动脉的双蒂穿支皮瓣病例全部成活;1例仅保留单侧穿支的皮瓣远端出现缺血现象。随访5月～3年,再造乳房外形满意,未见腹壁薄弱、腹疝等腹部并发症发生。下腹供区疤痕隐蔽,同时也达到了腹壁整形减肥的效果。结论移植横行下腹部DIEP瓣再造乳房,供区损伤小,组织量充足,血供丰富,是目前最为理想的手术方法。DIEP瓣也能根据需要修复多种软组织缺损,因保留了腹直肌及其前鞘,对供区的创伤最小,对肥胖者还能起到腹壁整形的作用。该皮瓣的应用代表了整形外科的发展方向。; 董佳生王涛张莉戴传昌王毅敏祝联; 关键词：腹壁动脉穿支下腹部皮瓣乳房再造 TRAM

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