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罗阿东: 作品数：21 被引量：63H指数：4; 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>; 发文基金：贵州省“十一五”农业科技攻关项目教育部科学技术研究重点项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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猪源多杀性巴氏杆菌的生物学鉴定与荚膜PCR分型被引量：25: 2007年; 从表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离出13株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida,Pm),采用Pm种特异性的KMT1-KMT2引物进行PCR扩增,结果与传统的生化反应鉴定完全一致。基于对甘露醇、卫茅醇、山梨醇、海藻糖的发酵能力和产生鸟氨酸脱羧酶的特性,Q_1、Q_3、Q_6、Q_7、Q_(10)、Q_(13)和C_(48-1)鉴定为Pm多杀亚种(Pm subsp.multocida);Q_2、Q_4、Q_5、Q_8、Q_9、Q_(11)、Q_(12)鉴定为Pm败血亚种(Pm subsp.septica)。对13株Pm分离物采用A型、B型和D型引物进行PCR扩增,8株鉴定为A血清型(61.5%);5株鉴定为D血清型(38.5%);没有发现B血清型的菌株。同时对金黄色葡萄球菌抑制试验、中性吖啶黄沉淀试验与荚膜PCR分型的相关性进行了讨论。; 李永明罗阿东徐景峨袁翠霞; 关键词：萎缩性鼻炎多杀性巴氏杆菌生物学鉴定

山羊痘病毒ITR基因片段的克隆与序列分析被引量：1: 2008年; 应用PCR方法扩增山羊痘病毒QL、LD、Y和B株ITR基因片段,插入pMD18-T载体,转化DH5α感受态细胞,提取重组载体经PCR和酶切鉴定后测序,并与GenBank上8株羊痘病毒相应序列进行同源性分析。结果经PCR扩增,4株病毒均可得到一条均一的DNA片段,该片段可被内切酶AluⅠ特异酶切,而且该PCR的DNA模板最小检出量为24.40pg。经测序,该基因片段长度为289bp;序列比较发现,4株病毒ITR片段与GenBank上2株山羊痘病毒的核苷酸与氨基酸序列同源性均为100%,与3株绵羊痘病毒分别为98.2%和96.5%,与3株牛疙瘩皮肤病病毒为98.2%～99.3%和96.5%～97.7%。这表明ITR基因片段在羊痘病毒属中较为保守,可以针对ITR基因建立羊痘病毒的PCR检测方法。; 王开功岳筠徐春志程振涛周思旋罗阿东周碧君许乐仁; 关键词：山羊痘病毒 PCR

产气荚膜梭菌肠毒素基因原核表达载体的构建: 2009年; 以含C型产气荚膜梭菌分离株(CP2)肠毒素基因的克隆载体pMD18-T-cpe为材料,根据产气荚膜梭菌开放阅读框设计合成一对特异性引物,采用PCR技术对其进行扩增,经BamHI和EcoRI双酶切后,从胶上回收目的基因,与经过相同两种内切酶处理的原核表达载体pET32a连接,转化大肠杆菌DH5a感受态细胞后,提取质粒进行PCR和BamHI/EcoRI双酶切鉴定后测序。结果表明,肠毒素基因已成功地克隆到原核表达载体上(重组质粒命名为pET32a-cpe),从而构建了产气荚膜梭菌肠毒素基因的原核表达质粒。; 唐源赵健湖罗阿东王开功周碧君文明; 关键词：产气荚膜梭菌肠毒素基因原核表达载体

猪源多杀性巴氏杆菌的生物学鉴定与荚膜PCR分型: 从表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离出13株多杀性巴氏杆菌(Pasteurella multocida Pm),采用Pm种特异性的KMT1-KMT2引物进行PCR扩增,结果与传统的生化反应鉴定完全一致,而猪鼻腔和肺组织...; 李永明罗阿东徐景峨袁翠霞; 关键词：猪萎缩性鼻炎巴氏杆菌生物学鉴定 PCR分型; 文献传递

山羊痘病毒SYBR Green I荧光PCR检测方法的建立被引量：7: 2008年; 为建立山羊痘病毒(goat pox virus,GPV)的SYBR Green I荧光PCR方法,根据GPV的反向末端重复序列(Inverted Terminal Repeat,ITR)的核苷酸序列设计引物。以此引物和山羊痘皮肤痘疹提取的DNA为模板,建立并优化SYBR Green I模式荧光PCR检测GPV的ITR基因的方法,并与普通PCR方法进行敏感性比较。结果表明,此次建立的检测GPV的SYBR Green I荧光PCR方法能检测出7×102拷贝数的DNA模板,此法比文献报道的普通PCR法更敏感、准确、快速。; 罗阿东唐源文明岳筠程振涛徐春志; 关键词：山羊痘病毒实时定量PCR 熔解曲线

猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌PCR检测方法的建立被引量：8: 2007年; 对表现猪萎缩性鼻炎临床症状的猪群中分离得到的34株支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb),采用针对Bb flagellum gene的一对引物进行PCR扩增,结果所有分离物均能扩增出237bp特异性DNA条带,与传统生化鉴定结果相一致,且其最小检出量为0.64pg;而猪鼻腔和肺组织中常见的多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌及大肠埃希氏菌均未能出现任何DNA条带。这表明,本试验建立的PCR方法具有特异性强、灵敏度高、可靠性好等特点,可用于猪萎缩性鼻炎的临床诊断。; 袁翠霞罗阿东徐景峨唐源李建华文明李永明周碧君; 关键词：猪萎缩性鼻炎支气管败血波氏杆菌 PCR方法

猪繁殖障碍疫病的三重PCR法鉴别诊断被引量：1: 2007年; 为建立一种简便、快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)3种病原的多重PCR方法,针对PRRSV N基因、PPV VP 2基因及PRV gp50基因分别合成了1对特异性引物,通过PCR均扩增出分子长377bp、445bp和217bp的DNA条带,与预期扩增片段相符。以3对引物同时对PRRSV、PPV和PRV疫苗株进行多重PCR扩增及反应条件的优化,同时扩增出3条特异性条带。利用所建立的多重PCR方法,对贵州省11个养猪场的40份疑似病料进行检测,结果显示,PRRSV、PPV和PRV的阳性检出率分别为62.5%、17.5%和0%。; 周思旋周碧君岳筠徐春志鲍娟罗阿东史开志陈琼乖; 关键词：猪蓝耳病细小病毒病伪狂犬病三重PCR

猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查与RT-PCR鉴定被引量：10: 2007年; 对贵州省11个猪场出现的疑似猪繁殖与呼吸综合征病例进行流行病学调查和病原RT-PCR鉴定,结果表明,发病仔猪主要表现高热,死亡率为40.35%(642/1 591);3个种猪场的待产母猪群发生繁殖障碍,流产率为8.11%(38/469);成年猪群发病率为24.47%(162/662),死亡率为4.35%(30/662);感染猪群PRRS血清抗体平均阳性率为28.12%(45/160)。对病死猪病料进行PRRS病原核酸鉴定,其平均检出率为84.44%(38/45),变异毒株试剂盒检测显示,11个临床发病猪场病例是由变异毒株引起的高致病性猪繁殖与呼吸综合征。; 史开志王开功杨鹤峰岳筠徐春志韩健保罗阿东周思旋; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征流行病学血清抗体 RT-PCR

产气荚膜梭菌cpe^+菌株的筛选与鉴定被引量：1: 2009年; 参考相关资料,针对产气荚膜梭菌肠毒素基因(cpe)设计合成1对特异性引物,对34株贵州分离株进行PCR扩增,并将扩增产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序和分析。结果在34株产气荚膜梭菌贵州分离株中有1株C型菌株扩增出与预期大小相一致的目的片段,经克隆测序后,该片段大小为233 bp,其与产气荚膜梭菌参考株肠毒素基因序列的核苷酸同源性为99.6%~100%,推导氨基酸同源性为98.7%~100%,表明所扩增产物为产气荚膜梭菌的肠毒素基因片段。本试验筛选鉴定出1株产气荚膜梭菌cpe+菌株,为今后进一步探讨产气荚膜梭菌性食物中毒机制奠定了基础。; 唐源杨鹤峰王开功周碧君罗阿东文明; 关键词：产气荚膜梭菌肠毒素基因克隆

贵阳市鸡群中禽流感不同亚型抗体的检测与分析被引量：2: 2008年; 罗阿东唐源文明周碧君汪德生岳筠周思旋; 关键词：禽流感抗体监测鸡群

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