范国华
- 作品数：30 被引量：44H指数：4
- 供职机构：上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金上海市教育发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学机械工程更多>>
- 中性氨基酸对帕金森病发生干预的实验研究
- 2006年
- 目的探讨中性氨基酸干预帕金森病发生的作用机制。方法分别在应用百草枯建立的帕金森病小鼠模型的前后腹腔注射中性的左旋缬氨酸(L-Val)、左旋苯丙氨酸(L-Phe)、右旋缬氨酸(D-Val)及碱性的左旋赖氨酸(L-Lys),采用免疫组化、Western 印迹法观察小鼠脑黑质部位百草枯沉积以及多巴胺能神经元变性和α-突触核蛋白(α-Syn)聚集的改变。结果在应用百草枯之前注射 L-Val、L-Phe,小鼠脑黑质部位百草枯染色明显减弱,多巴胺能神经元变性及α-Syn 聚集均明显减少;而在应用百草枯之后注射,则变化不明显。以同样方式注射 D-Val 及 L-Lys,多巴胺能神经元变性及α-Syn 聚集改变也不明显。结论 L-Val、L-Phe 等左旋中性氨基酸具有竞争性抑制百草枯进入中枢神经系统的作用,并且具有结构特异性,对帕金森病的发生可以起到预防性保护作用。
- 杜芸兰刘振国陈生弟陆国强范国华
- 关键词：帕金森病神经变性突触蛋白类
- α-synuclein与帕金森病(综述)被引量：1
- 2001年
- α-synuclein是一种位于突触前末梢的蛋白 ,NACP是 α-synuclein的人类同系物。α-synuclein基因的两种错义突变与家族性帕金森病 (FPD)密切相关。目前大量研究发现在 PD的路易小体中有 NACP的免疫阳性反应 ,推测 α-synuclein可能参与路易小体的形成及神经变性过程。本文就 α-synuclein基因、α-synuclein蛋白的聚集及其在 PD发病机制中作用等方面的研究做一综述。
- 范国华刘振国陈生弟
- 关键词：帕金森病路易小体病理
- 成年大鼠脑内ATP敏感性钾通道亚型mRNA表达的研究被引量：3
- 2005年
- 为探讨ATP敏感性钾通道(KATP)亚型在大鼠脑组织中的表达,本研究采用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)检测了大鼠小脑、大脑皮质、海马、纹状体、黑质的KATP亚型mRNA的表达。结果显示Kir6. 1、Kir6. 2、Sur1、Sur2B在小脑、大脑皮质、海马、纹状体、黑质中均有表达,Sur2A在脑组织中未见表达。Kir6. 1mRNA在海马和黑质的相对表达水平明显高于小脑、大脑皮质和纹状体(P<0.01);Kir6. 2和Sur1mRNA在黑质的相对表达水平明显高于小脑、大脑皮质、海马和纹状体 (P<0.01 );Sur2BmRNA在黑质、海马和纹状体的相对表达水平明显高于小脑和大脑皮质(P<0.01 )。以上结果提示KATP在脑内具有广泛表达,其表达水平在不同部位存在着差异性。
- 王刚陈生弟杜芸兰范国华陆国强
- 关键词：黑质纹状体大脑皮质小脑ATP敏感性钾通道
- 早期康复在脑卒中急性期治疗体系中的作用被引量：1
- 2000年
- 范国华杨佩君陈俊宁胡大萌刘建荣杨松珍
- 关键词：中风急性期早期康复
- 帕金森病小鼠模型黑质区的热休克蛋白的表达
- 目的:观察1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的帕金森病(PD)小鼠模型的中脑黑质区热休克蛋白的表达。方法:C57BL小鼠分成四组,MPTP组为腹腔注射MPTP5天制备PD小鼠模型,另三组为正常对...
- 范国华陈生弟戚辰赵静陆国强
- 关键词：帕金森病热休克蛋白MPTP
- 文献传递
- 帕金森病小鼠模型脑黑质区热休克蛋白的表达被引量：1
- 2005年
- 目的应用1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备帕金森病小鼠模型,观察中脑黑质部位热休克蛋白(hsps)的表达。方法175只C57BL小鼠分为4组:MPTP组,56只小鼠连续5d腹腔注射MPTP眼30mg/(kg·d)演,制备帕金森病小鼠模型;生理盐水组,56只小鼠连续5d腹腔注射生理盐水0.3ml/d(容积与MPTP组同);假手术组,56只小鼠仅用注射器刺穿腹部皮肤;另7只小鼠作为正常对照组。分别于最后1次注射后4h(视为0d)及第2、4、7、10、14、21、28天处死小鼠,应用免疫印迹法(West鄄ernblot)和免疫组化检测方法观察热休克蛋白的动态变化以及在中脑的定位;经原位杂交法检测MPTP对hsp40和hsp70mRNA表达的影响。结果免疫印迹法检测显示,MPTP组小鼠于药物注射后4h即出现hsp70表达升高,两周内与正常对照组、生理盐水组和假手术组相比差异均有显著性意义(P<0.01),其中以第2,4天为表达高峰,之后缓慢下降,至第21天降至正常水平。MPTP组小鼠在注射后2～14d,hsp40/HDJ鄄1表达水平高于其余各组(P<0.01),第4天为表达高峰。HDJ-2表达不如HDJ鄄1明显,仅第4天与另3组相比差异有显著性意义(P<0.01)。MPTP组小鼠在注射后第2～4天,hsp90表达水平高于正常对照组、生理盐水组和假手术组(P<0.01);
- 范国华陈生弟戚辰赵静陆国强
- 关键词：MPTP小鼠模型帕金森病免疫印迹法脑黑质
- 丙炔苯丙胺对鱼藤酮致多巴胺能神经细胞损伤的保护机制研究被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨丙炔苯丙胺对多巴胺能神经细胞保护机制的研究。方法:用神经生长因子(NGF)将PC12细胞诱导分化成多巴胺能神经元的细胞模型,经鱼藤酮处理后给予不同浓度的丙炔苯丙胺,观察细胞形态改变,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态,磷脂酰丝氨酸外翻法(Annexin-V)检测细胞凋亡,JC-1检测线粒体膜功能及DCFH-DA检测细胞内ROS。结果:经鱼藤酮处理24h后PC12细胞突起样结构消失,应用丙炔苯丙胺后细胞形态逐渐变大,突起也有恢复,细胞贴壁能力增强,与鱼藤酮组比较,在丙炔苯丙胺50μmol·L-1作用24h时即出现细胞活力恢复,A570值为0.39±0.01(P<0.01);Annexin-V检测凋亡细胞明显减少;JC-1检测丙炔苯丙胺处理组的线粒体膜电位较鱼藤酮处理组有明显恢复,DCFH-DA检测鱼藤酮组ROS水平升高,丙炔苯丙胺组ROS降低。结论:鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,丙炔苯丙胺能够明显减少鱼藤酮诱导的PC12细胞的死亡。其机制可能是抑制氧化应激及拮抗细胞凋亡。
- 戚辰刘振国范国华陈生弟陆国强
- 关键词：丙炔苯丙胺鱼藤酮帕金森病氧化应激
- 人HSP40基因真核表达载体的构建及表达被引量：3
- 2006年
- 目的构建人热休克蛋白40(HSP40)的2种同源物HDJ-1和HDJ-2基因真核表达载体,观察其在人成神经细胞瘤细胞株(SK-N-SH)中的表达。方法从流产胚胎脑组织中抽提总RNA,RT-PCR扩增HDJ-1和HDJ-2cDNA,经限制性内切酶双酶切后,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)和pEGFP-N1质粒中。HDJ-1和HDJ-2基因测序结果与基因库登录序列比对,序列正确的重组质粒用脂质体转染SK-N-SH细胞,Western blot和荧光显微镜观察基因表达情况。结果HDJ-1和HDJ-2基因测序结果与基因库登录序列比对显示完全一致。Western blot证实pcDNA3.1(+)/HDJ-1转染SK-N-SH细胞24h后有HDJ-1的过表达,至少持续72h;pEGFP-N1/HDJ-1和pEGFP-N1/HDJ-2转染的细胞有HDJ-1/GFP和HDJ-2/GFP融合蛋白的表达,至少持续72h。荧光显微镜观察到pEGFP-N1/HDJ-1和pEGFP-N1/HDJ-2转染的细胞中有绿色荧光蛋白的表达。结论本实验成功构建pcDNA3.1(+)/HDJ-1、pEGFP-N1/HDJ-1和pEGFP-N1/HDJ-2真核表达质粒,并在SK-N-SH细胞中表达。
- 范国华陈生弟杨卉戚辰李琳巴茂文
- 关键词：转染
- 脑卒中偏瘫患者的平衡功能检测
- 维持人体平衡的机制十分复杂，平衡功能是人体坐、立、行等运动的基础，脑卒中偏瘫患者为提高日常生活能力，需要通过康复训练以改善平衡功能，故对患者的平衡功能定量检测越来越引起人们的重视，PJ-I电脑型人体平衡功能检测仪器能客观...
- 杨佩君蒋斌范国华王美芬
- 关键词：脑卒中偏瘫
- 文献传递
- PACAP27抑制鱼藤酮诱导细胞凋亡的实验研究被引量：5
- 2005年
- 目的探讨垂体腺苷酸环化酶激活肽27(PACAP27)对鱼藤酮诱导的PC12细胞损伤的保护作用。方法诱导分化后的PC12细胞,经不同浓度的鱼藤酮处理后,观察其形态改变;四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态;磷脂酰丝氨酸外翻法(AnnexinV)检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果经鱼藤酮处理24h后PC12细胞活性明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.01);PACAP27(10-12～10-7mol·L-1)对鱼藤酮诱导的细胞凋亡具有明显的抑制作用;与鱼藤酮处理组(250nmol·L-1)相比,PACAP27保护组(10-8mol·L-1)AnnexinV和碘化丙啶(propidiumiodide,PI)呈双阳性的晚期凋亡细胞数明显减少;流式细胞仪结果显示,PACAP27可明显减少凋亡细胞的比值,提高细胞的生存率(P<0.01);而PACAP/VIPⅠ型受体拮抗剂PACAP627可逆转这一效应。结论PACAP27可通过PAC1受体介导对鱼藤酮诱导的细胞凋亡进行有效抑制。
- 王刚陈生弟戚辰杜芸兰范国华陆国强
- 关键词：垂体腺苷酸环化酶激活肽鱼藤酮帕金森病凋亡
