谭波
- 作品数：7 被引量：26H指数：4
- 供职机构：四川大学华西医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 组织工程化尿路上皮结构体内外构建研究被引量：2
- 2008年
- 目的探讨工程化尿路上皮结构的构建方法。方法机械分离获取膀胱黏膜层,胰蛋白酶消化法获取膀胱移行上皮细胞,用DKSFM培养基体外培养扩增。以自制的猪小肠黏膜下层(SIS)为支架材料,将培养的膀胱移行上皮细胞接种到支架材料表面,观察细胞在支架材料表面的生长增殖情况;并将体外构建的细胞-支架材料复合物植入裸鼠背部皮下,不同时间点取材进行组织学和免疫组织化学检测。结果膀胱移行上皮细胞在SIS表面能够黏附、生长和增殖。体外复合培养9d后,膀胱移行上皮细胞铺满SIS表面,呈单层细胞结构。裸鼠体内植入4周和8周后,SIS上种植的膀胱移行上皮细胞形成多层结构,抗细胞角蛋白免疫组化染色,细胞胞浆成棕黄色阳性反应。结论采用组织工程技术能够在体内外初步构建尿路上皮结构,为进一步组织工程泌尿道修复重建实验奠定了基础。
- 韩平罗静聪智伟谭波李秀群杨志明
- 关键词：尿路上皮移行上皮细胞小肠黏膜下层
- 组织工程在食管修复重建外科中的应用被引量：6
- 2011年
- 食管替代术是很多食管疾病的常用治疗手段。采用自身组织进行食管替代创伤大,术后并发症多,而现有的人工食管很难满足食管替代的要求。利用组织工程技术进行食管的替代研究,为解决这些问题带来了希望。本文就组织工程在食管修复重建外科中的应用及前景进行综述。
- 谭波解慧琪
- 关键词：食管
- 猪小肠黏膜下层与兔骨髓间充质干细胞的体外复合培养被引量：1
- 2012年
- 背景:小肠黏膜下层细胞外基质材料免疫原性低,具有良好生物相容性,是构建单一结构工程化组织的较好支架材料。目的:观察体外兔骨髓间充质干细胞与猪小肠黏膜下层复合培养的生物相容性。方法:采用密度梯度离心法结合贴壁法分离纯化培养兔骨髓间充质干细胞,在其接种前用红色免疫荧光标记,然后将第2代已标记的兔骨髓间充质干细胞接种在猪小肠黏膜下层上。结果与结论:①组织学观察:骨髓间充质干细胞与小肠黏膜下层上复合培养1周时细胞呈单层生长,荧光显微镜下观察标记的骨髓间充质干细胞显示均匀红色荧光,复合培养2周细胞呈多层生长,并显示更密集的红色荧光。②扫描电镜观察:复合培养2d,骨髓间充质干细胞黏附于材料表面并伸展;复合培养1周,小肠黏膜下层被骨髓间充质干细胞分泌的胶原覆盖;2周后细胞在材料上已大量增殖形成融合,细胞连接紧密,细胞分泌大量基质,并分层。表明小肠黏膜下层与骨髓间充质干细胞具有良好的相容性。
- 魏人前曹兴海邓睿杨志明谭波靳安民
- 关键词：小肠黏膜下层骨髓间充质干细胞生物材料生物相容性
- 新型软骨脱细胞基质海绵的制备及生物相容性评价被引量：4
- 2009年
- 目的探讨利用猪耳软骨脱细胞基质制备海绵状多孔支架材料的方法,及其用作组织工程关节软骨支架材料的可行性。方法取新鲜猪耳软骨低温粉碎后,筛取粒径90μm以下软骨微粒经低温脱细胞处理,冻干,用1.5%乙酸分散制备质量体积比为2%的胶状悬液,低温冻干成型。行理化性能检测测定其孔径、孔隙率及吸水率,并行组织学及扫描电镜观察。24只SD大鼠脊柱两侧皮下分别植入制备的软骨脱细胞基质海绵(实验组)和ColⅠ海绵(对照组);于术后1、2、4、8周取材行组织学观察,分析软骨脱细胞基质海绵在体内的吸收降解情况。取1周龄新西兰大白兔股骨骨髓,培养获取第3代BMSCs,分别采用浓度为50%(A组)及100%(B组)的软骨脱细胞基质海绵浸提液及DMEM培养液(C组)进行培养,于培养后2、4、6dMTT法测定细胞增殖。结果制备的软骨脱细胞基质海绵呈白色多孔状,组织学观察示材料中无软骨细胞碎片残留,主要由胶原构成。扫描电镜显示材料呈多孔蜂巢状,孔洞相互连接,孔径均匀。吸水率为2029%±253%,孔径为(90.66±21.26)μm,孔隙率为90.10%±2.42%。支架材料植入SD大鼠皮下后可见组织长入材料,血管生成,炎性反应较对照组轻,材料可按一定速率降解吸收。MTT法检测结果示,浸提液培养2、4d,3组间吸光度(A)值差异无统计学意义(P>0.05);6d,3组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论将软骨脱细胞基质进行改性处理制备的海绵支架材料脱细胞彻底,保留了软骨ECM主要成分,无毒,具备合适的孔径和孔隙率,孔隙分布均匀,生物相容性好,可作为软骨组织工程的支架材料。
- 刘天军谭波罗静聪邓力解慧琪
- 关键词：软骨组织工程生物相容性
- 口腔黏膜上皮细胞与猪小肠黏膜下层体外复合培养的实验研究被引量：8
- 2010年
- 目的探讨体外快速培养犬口腔黏膜上皮细胞(OMECs)及其与猪小肠黏膜下层(SIS)体外复合培养的方法,为组织工程化黏膜研究提供实验依据。方法采用混合酶消化法,于6%胎牛血清的上皮细胞无血清培养基(DKSFM)中培养OMECs,观察OMECs的形态特征、绘制生长曲线并进行细胞表面标志物检测。将第2代犬OMECs接种在SIS上,行苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色、扫描电镜等观察OMECs在SIS上的生长状况。结果OMECs在DKSFM中生长良好,CK19细胞角蛋白免疫组化染色阳性。OMECs接种在SIS上呈单层生长,多角形,铺路石样排列,复合培养8d呈多层生长。结论采用混合酶消化法,用含6%胎牛血清的DKSFM培养犬OMECs,方法简便,适合推广应用。SIS与OMECs有良好的相容性,可作为构建组织工程化黏膜的理想支架材料。
- 谭波魏人前杨志明李秀群韩平智伟解慧琪任燕谭中侠
- 关键词：口腔黏膜上皮细胞小肠黏膜
- 上皮细胞条件培养液对BMSCs分化的影响被引量：3
- 2009年
- 目的探讨上皮细胞条件培养液(epithelial cell conditioned medium,ECCM)体外诱导犬BMSCs向上皮细胞分化的可行性。方法成年健康雄性比格犬1只,体重10kg。于犬髂后上棘采用骨髓穿刺法取骨髓5mL,分离培养BMSCs。取犬口腔黏膜下组织,剪成约4mm×4mm大小,制备ECCM。取第2代BMSCs以2×104个/孔细胞密度接种,实验组于ECCM中培养,对照组于低糖DMEM完全培养基中培养。观察两组细胞形态特征,MTT法绘制生长曲线,诱导培养21d免疫组织化学染色鉴定上皮细胞特异性标志物——细胞角蛋白19(cytokeratin19,CK-19)和细胞角蛋白AE1/AE3,透射电镜观察细胞超微结构。结果倒置相差显微镜下见两组细胞均呈长梭形,均匀分布,折光性较强,增殖迅速。两组细胞生长曲线均呈"S"形,实验组生长曲线较对照组右移,提示ECCM对细胞增殖有抑制作用。实验组CK-19和细胞角蛋白AE1/AE3免疫组织化学染色均呈阳性反应,对照组呈阴性。透射电镜下实验组细胞胞浆内可见紧密连接。结论ECCM体外有诱导同种BMSCs向上皮细胞分化的作用。
- 杨朋魏人前谭波李秀群王佳周昆鹏左潇李顺解慧琪
- 关键词：BMSCS上皮细胞诱导分化
- 食管黏膜上皮细胞与SIS复合培养及生物学特性研究被引量：5
- 2008年
- 目的探讨体外快速培养犬食管黏膜上皮细胞(esophageal mucosa epithelial cells,EMECs)及其与SIS体外复合培养的方法,为组织工程食管研究提供实验依据。方法取2～5周龄幼犬5只,无菌获取其食管组织,采用混合酶消化法,分离培养EMECs,于倒置相差显微镜下观察细胞生长情况,取第2代细胞培养1～5 d绘制生长曲线并进行细胞表面标志物细胞角蛋白19(cytokeratin 19,CK-19)检测。取第2代EMECs与SIS复合培养4、8 d,行形态学、组织学及扫描电镜观察。结果倒置相差显微镜下EMSCs呈典型铺路石样。CK-19免疫组织化学染色可见细胞胞浆呈阳性染色。MTT法测定第2代细胞在传代培养2 d生长达高峰。EMECs与SIS复合培养4 d,细胞呈多角形,细胞间连接紧密,呈铺路石样排列;SIS表面形成1～2层细胞组成的复层上皮样结构。8 d时,细胞密度增大,SIS表面形成2～3层细胞组成的复层上皮样结构;扫描电镜见细胞在材料上已大量增长,呈层状排列。结论采用混合酶消化法,用含6%FBS的DKSFM培养犬EMECs,方法简便,适合推广应用。SIS与EMECs有良好的相容性,可作为构建组织工程食管的理想支架材料。
- 谭波魏人前杨志明李秀群韩平智伟解慧琪
- 关键词：SIS生物学特性
