赵俊伟
- 作品数:21 被引量:19H指数:2
- 供职机构:河南中医药大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项上海市科委科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 结核分枝杆菌RD5区编码蛋白在结核病血清学诊断中的应用
- 赵俊伟张苗苗玄松花周业成郭晓奎张舒林
- 结核分枝杆菌Rv3914抗原的克隆表达与纯化被引量:1
- 2011年
- 目的构建结核分枝杆菌Rv3914蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达及纯化,为结核病血清学诊断提供候选抗原。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增Rv3914基因片段,插入到pET-28b(+)载体中,构建pET28b-Rv3914重组质粒,转化大肠埃希菌E.coli BL21plysS(DE3),经IPTG诱导表达后,应用Ni-NTA亲和柱纯化重组蛋白。结果 PCR扩增出Rv3914基因序列,重组质粒经测序并经BLAST分析后发现无点突变。pET28b-Rv3914重组质粒在大肠埃希菌E.coli BL21plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,重组蛋白占细胞蛋白总表达量的30%以上,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度超过90%、相对分子质量约为14.7×103的目的蛋白质。结论高纯度结核分枝杆菌Rv3914重组蛋白的获得为研究结核互补特异性抗原组合在结核病血清诊断中的价值奠定了基础。
- 陈永金赵俊伟杨红国孙战强余晓丽张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌克隆纯化
- 核分枝杆菌RD区特异性抗原ESXO和Rv3117的重组制备及其免疫原性评估
- 目的 应用免疫蛋白组学从结核分枝杆菌H37Rv基因组中的RD区筛选出两个新的结核特异性抗原,通过肽指纹质谱及其生物信息学的方法鉴定为结核分枝杆菌ESXO和Rv3117,构建重组蛋白ESXO和Rv3117,并对其免疫原性进...
- 叶娟赵俊伟陈翠翠封莉王凤平吴兴福刘文第张舒林
- 关键词:分枝杆菌结核克隆免疫原性
- 文献传递
- 结核分枝杆菌蛋白Rv0315克隆表达及其抗原性研究
- 2012年
- 目的评价结核分枝杆菌重组蛋白Rv0315在结核病血清学诊断中的价值。方法采用常规分子克隆方法获得重组Rv0315蛋白,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测84份确诊结核病人血清和48份健康人血清中相应的抗结核抗体水平,并与结核分泌蛋白ESAT-6的检测结果进行比较。结果成功构建了重组蛋白Rv0315,其在E.coliBL21plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,分子量(30.3kDa)与预期相符,ELISA血清学活性评估显示其特异性和敏感性分别为94.0%(45/48)和35.7%(30/84)。结论重组蛋白Rv0315有望成为新的结核病血清学诊断候选抗原。
- 陈苏芳周业成赵静赵俊伟吴兴福孙战强玄松花张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌克隆血清学诊断
- 一种Cel-CSO/Taxol NPs纳米药物及应用
- 本发明公开了一种Cel‑CSO/Taxol NPs纳米药物及应用,属于抗癌药物技术领域;制备方法包括以下步骤:将雷公藤红素壳寡糖偶联物Cel‑CSO和紫杉醇Taxol分别溶于甲醇中;将溶解后的雷公藤红素壳寡糖偶联物Cel...
- 曾华辉武香香曾小虎侯益民张婷婷赵俊伟
- 分枝杆菌脂聚糖的分离、纯化及其结构和功能分析被引量:2
- 2014年
- 【目的】建立分离、纯化分枝杆菌脂聚糖的方法,初步比较分析不同菌株来源的脂阿拉伯甘露聚糖(Lipoarabinomannan,LAM)和脂甘露聚糖(Lipomannan,LM)的结构差异及研究脂聚糖刺激对巨噬细胞环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)蛋白表达的影响。【方法】应用Triton X-114液相法提取脂聚糖,电洗脱法分离纯化,基质辅助激光解析电离串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF-MS)进行分子量鉴定;基于特异性识别非还原性末端α-D-甘露糖基的刀豆球蛋白(Concanavalin A,Con A)分析新诺分枝杆菌JDM601、结核分枝杆菌H37Rv标准株和耻垢分枝杆菌mc2155脂聚糖的结构差异;进一步用Western blot检测脂聚糖刺激的RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结果】通过电洗脱法成功纯化出3种菌株脂聚糖;MALDI-TOF/TOF-MS鉴定发现,分子量从小到大依次为新诺分枝杆菌JDM601、耻垢分枝杆菌mc2155和结核分枝杆菌H37Rv来源的脂聚糖。Western blot显示,Con A能与结核分枝杆菌H37Rv标准株来源的LAM相互作用,而不能与新诺分枝杆菌JDM601和耻垢分枝杆菌来源的LAM相互作用;并且发现Con A与新诺分枝杆菌JDM601来源的LM有很强的反应,然而与其余两种来源的LM反应很弱。3种菌株来源的脂聚糖均能刺激RAW 264.7巨噬细胞COX-2蛋白的表达。【结论】首次成功对来源于中国临床分枝杆菌分离株的脂聚糖进行了分离纯化,初步探讨了不同菌株来源分枝杆菌脂聚糖的结构差异,并表明LAM和LM均能刺激巨噬细胞诱导COX-2蛋白的表达,为进一步研究其对宿主的毒力和免疫机制奠定了基础。
- 玄松花赵俊伟孙战强周业成张朝宝余晓丽郭晓奎刘文第张舒林
- 关键词:分枝杆菌脂阿拉伯甘露聚糖
- 基于ESB的数字化放射摄像系统控制台的开发
- 随着医疗需求急剧发展,对X光设备的需求也正在迅速地提高,而其中医疗影像设备是病人接触最多的设备之一,同时也是放射科技师使用比较多的检查设备。放射科医师需要通过数字化放射摄像控制台来操作设备。纵观国内外现有的数字化放射摄像...
- 赵俊伟
- 关键词:ESB控制台
- 文献传递
- 结核分枝杆菌Rv3120的重组蛋白、其制备方法及其在细胞免疫诊断中的应用
- 本发明提供一种结核分枝杆菌特异性标志物Rv3120的重组蛋白,其具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明还提供所述结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白的编码核苷酸序列、所述重组蛋白的制备方法及其用途。本发明基于免...
- 张舒林孙战强赵俊伟余晓丽王洪海
- 文献传递
- 结核分枝杆菌蛋白Rv0315的克隆表达及其抗原性研究被引量:6
- 2012年
- 目的评价结核分枝杆菌重组蛋白Rv0315在结核病血清学诊断中的价值。方法采用常规分子克隆方法获得重组Rv0315蛋白,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测84份确诊结核病人血清和48份健康人血清中相应的抗结核抗体水平,并与结核分泌蛋白ESAT-6的检测结果进行比较。结果成功构建了重组蛋白Rv0315,其在E.coli BL21plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,分子量(30.3kDa)与预期相符,ELISA血清学活性评估显示其特异性和敏感性分别为94.0%(45/48)和35.7%(30/84)。结论重组蛋白Rv0315有望成为新的结核病血清学诊断候选抗原。
- 陈苏芳周业成赵静赵俊伟吴兴福孙战强玄松花张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌克隆血清学诊断
- 结核分枝杆菌特异性抗原ESXO的重组制备及其免疫原性评估被引量:1
- 2012年
- 目的评估结核分枝杆菌(MTB)重组特异性抗原ESXO在大肠埃希菌中的高效表达,并评价其免疫原性。方法采用常规分子克隆方法获得MTB重组蛋白ESXO。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测84份确诊结核病(TB)患者血清和48份健康人血清中相应的抗结核ESXO抗体水平,评价血清学抗原活性,并与结核早期分泌蛋白ESAT-6和CFP-10的检测结果进行比较。结果重组特异性抗原ESXO在大肠杆菌中获得成功表达,其在E.coli BL 21 plysS(DE3)中以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量(27 300)与预期相符,血清学抗原活性评估结果显示其特异度和敏感度分别为94.0%(45/48)和32.1%(27/84),特异度与ESAT-6和CFP-10相当,敏感度高于ESAT-6。结论结核特异性抗原ESXO有望成为新的TB诊断与疫苗设计的候选抗原。
- 封莉叶娟王凤平赵俊伟吴兴福张舒林
- 关键词:克隆基因表达血清学诊断