边疆
- 作品数：13 被引量：12H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 单端孢霉烯族毒素的气相色谱分析被引量：2
- 1990年
- 单端孢霉烯族毒素是一类真菌毒素,是由多种不完全真菌在低温条件下产生的代谢物质。它广泛存在于自然界,多见于久贮的发霉粮食中,误食后常发生中毒死亡。单端孢霉烯族毒素的结构如图1:
- 王令春朱厚础周方边疆邓颂冯尔玲
- 关键词：真菌毒素气相色谱分析
- 重组人白细胞介素-2的研制
- 1996年
- 白细胞介素-2(Inter leukin2,IL-2)是由辅助性T淋巴细胞产生的一种淋巴因子,它作为一种免疫活性物质通过对杀伤细胞的诱导、扩增和分化等介导机体免疫系统,具有抗肿瘤、抗病毒和抗感染等作用。临床资料显示它用在诸如黑色素瘤、肾癌等恶性肿瘤的治疗,已取得了较好的效果。
- 马清钧单传伟边疆王令春王令春刘新垣徐桂清虞建良刘新垣
- 关键词：重组人白细胞介素杀伤细胞黑色素瘤免疫活性物质淋巴因子
- 重组人白细胞介素6的制备被引量：2
- 1995年
- 我们采用本院基础医学研究所组建的ＩＬ—６工程菌Ｅ．ｃｏｉｌＤＨ５ａ（ｐＢＶ—ｈｌＬ－６），在选定的培养基及ｐＨ值下，采用３０升发酵罐进一步观察了工程菌的生长和ｒＩＬ－６的表达，确定了发酵工艺条件。在此条件下连续进行了三批次的培养试验。结果表明，工程首的生长密度达到２．５１±０．０２ｇ［干重］／Ｌ［发酵液］，ｒＩＬ—６产率为１８２．４±２．０ｍｇ／ｇ［干重］。ｒＩＬ—６以包涵体形式表达于大肠杆菌细胞中，破菌后选用非离子型去垢剂或尿素等变性剂提取包涵体中的杂蛋白，可使ｒＩＬ—６的纯度达到７０．１±１．３％，收率为７１．９±１．９％。洗涤后的包涵体，经过凝胶柱纯化和复性，ｒＩＬ—６纯度达到９５％以上，柱纯化的收率为７２．３±０．９％；采用依赖ＩＬ—６，小鼠杂交瘤细胞系７ＴＤ１及ＭＴＴ比色法测定生物活性，ｒＩＬ—６比活性达２×１０８Ｕ／ｍｇ。
- 边疆陶好霞薛冲巩新马清钧
- 关键词：白细胞介素6生物制品
- 7TD1细胞及其克隆对IL-6的反应性和依赖性被引量：1
- 1996年
- 比较了基础所和北医大提供的两株7TD1细胞。选择北医大细胞株进行克隆,筛选出对IL-6增殖反应性和依赖性较强的3株细胞(7TD1 MC1、7TD1 MC4、7TD1MC5)。其中,7TD1 MC5细胞的反应曲线呈典型的“倒S”形,对IL-6有很好的反应性和依赖性。MTT比色法显示了与~3H-TdR掺入法一致的结果,采用7TD1 MC5细胞及MTT比色法测定IL-6生物活性,可减少仪器测试的费用和避免放射性污染。确定了培养基中IL-6的最适浓度(2ng/ml)。细胞传代培养和冻存6个月,7TD1 MC5细胞对IL-6的反应性和依赖性均无明显变化。
- 巩新边疆薛冲陶好霞孙澎
- 关键词：克隆IL-6反应性
- 重组人白细胞介素6 部分理化生物学性质的鉴定
- 1999年
- 目的：对 Ｎ 端缺失 ５ 个氨基酸的重组人白细胞介素 ６（ｒｅｃｏｍ ｂｉｎａｎｔ ｈｕｍ ａｎ ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ｒｈ Ｉ Ｌ６）纯品的理化生物学性质进行分析鉴定。方法：用蛋白序列自动分析仪、紫外及可见光扫描仪、 Ｓ Ｄ Ｓ聚丙烯酰胺凝胶电泳、溴化氰裂解、等电聚焦电泳、蛋白质印迹法和 Ｍ Ｔ Ｔ 比色法分别对ｒｈ Ｉ Ｌ６ 缺失体 Ｎ 端氨基酸序列、紫外及可见光吸收光谱、相对分子质量、肽图、等电点（ｐ Ｉ）、抗原特异性及生物学活性进行了分析鉴定。结果：与天然 Ｉ Ｌ６ 相比，ｒｈ Ｉ Ｌ６ Ｎ 端缺失了 ５ 个氨基酸；在２７６ ｎｍ 波长处有一个特异的蛋白吸收峰；相对分子质量为 ２１ ４８７ ；裂解的肽段分布在理论值的肽段分布范围之内；ｐ Ｉ为６．１；能与兔抗人 Ｉ Ｌ６ 抗体特异性结合；比活性达２．０５×１０１１ Ｉ Ｕ／ｇ。结论：缺失 ５ 个氨基酸的 ｒｈ Ｉ Ｌ６ 生物学活性与天然 Ｉ Ｌ６
- 陶好霞边疆孙澎巩新薛冲
- 关键词：白细胞介素6分子量等电点免疫印迹RHIL-6
- 7TD1细胞及其克隆对IL-6的反应性和依赖性
- 1997年
- 比较了本院基础医学研究所和北京医科大学提供的两株７ＴＤ１细胞。选择北京医科大学提供的细胞株进行克隆，筛选出对ＩＬ－６增殖反应性和依赖性较强的３株细胞（７ＴＤ１ＭＣ１、７ＴＤ１ＭＣ４、７ＴＤ１ＭＣ５）。其中７ＴＤ１ＭＣ５细胞的反应曲线呈典型的“倒Ｓ”形，对ＩＬ－６的反应性和依赖性很好。ＭＴＴ比色法显示了与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法一致的结果，采用７ＴＤ１ＭＣ５细胞及ＭＴＴ比色法测定ＩＬ－６生物活性，可减少测试的费用和避免放射性污染。确定了培养基中ＩＬ－６的最适浓度（２ｎｇ／ｍｌ）。细胞传代培养和冻存６个月。
- 巩新边疆薛冲陶好霞孙澎
- 关键词：克隆白细胞介素6反应性
- 白介素2工程菌的分批培养及高效表达被引量：2
- 1993年
- 观察了培养基成分、pH值、溶解氧以及培养时间和诱导时间对工程菌E.coli K802(pLY-4)生长和rIL-2表达的影响;确定了培养基和发酵控制参数。在此基础上进行了50L发酵罐的分批培养试验,获得了稳定的结果。其中,rIL-2的表达量占菌体总蛋白的50%～70%;每升发酵液rIL-2的产量在300mg以上,经过进一步的纯化和复性,可使rIL-2的纯度达到98%;比活性达到10~7U./mg。
- 边疆宋谦生单传伟谢妍于公义马清钧
- 关键词：大肠杆菌白细胞介素2
- HrIL-6在大肠杆菌中的高效表达及其纯化复性的研究
- 1994年
- 白细胞介素6(IL-6)具有调节免疫应答、急性期反应和造血功能的作用。研究结果表明,IL-6可能成为治疗血小板减少症最有效的药物。IL-6还具有防止恶性肿瘤转移、抑制乳腺癌细胞克隆生长和促进髓样白血病细胞分化等抗肿瘤活性。基因工程IL-6的大量生产将进一步满足基础研究和临床应用的需要。 我们采用本院基础所构建的IL-6工程菌:E.
- 边疆马清钧薛冲陶好霞王令春吴军巩新宗振欣
- 关键词：乳腺癌细胞白血病细胞克隆生长造血功能包涵体恶性肿瘤转移
- 白细胞介素6单克隆抗体的研制被引量：1
- 1999年
- 采用纯化的工程菌表达产物白细胞介素６（Ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ６，ＩＬ－６）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞（ＳＰ２／０）在ＰＥＧ作用下进行融合，通过ＥＬＩＳＡ筛选并多次亚克隆，获得了１株能分泌抗ＩＬ－６单克隆抗体的杂交瘤细胞Ｉｃ－１．３．４．５。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ显示：抗体结合抗原的分子量与ＩＬ－６相符，为特异性抗ＩＬ－６抗体。亚类鉴定表明：该细胞分泌的单克隆抗体为ＩｇＧ１亚类，ｋａｐｐａ型。染色体数目为１００条左右。腹水效价为１１０４，无血清培养液效价为１１０２。此杂交瘤细胞株体外传代培养６个月以上，ＥＬＩＳＡ检测抗体滴度无明显降低。
- 陈琳徐秀英边疆于芳黄培堂
- 关键词：单克隆抗体白细胞介素6
- E.coli HB101(pBV-IL-6)的流加分批培养及其产物纯化被引量：2
- 1996年
- E.coli HB101(pBV-IL-6)工程菌株的表达产物为N端缺失25个氨基酸残基的IL-6衍生物。通过摇瓶试验选定了培养基配方及pH值的控制范围,在5L发酵罐的半连续培养中确定了培养和诱导时间。在此基础上放大到30L发酵罐进行培养,结果表明,菌密度达到5.15g/L(干重),rIL-6衍生物占菌体总蛋白的34.8％。表达产物经过纯化和复性,纯度达95％以上(SDS-PAGE分析),采用依赖IL-6的小鼠杂交瘤细胞株7TD-1和~3H-TdR掺入法测定生物活性,rIL-6衍生物比活性为7.71×10~6U/mg。
- 薛冲边疆陶好霞巩新孙澎
- 关键词：纯化
