郝耀山
- 作品数：6 被引量：54H指数：3
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- 导入APX基因提高了普那菊苣植株的抗逆性被引量：11
- 2012年
- 采用农杆菌介导的方法,把CaMV35S启动子驱动的来自棉花(Gossypiumspp.)的抗坏血酸过氧化物酶(ascorbate peroxidase,APX)基因导入普那菊苣(Cichorium intybus L.cv.Puna)。结果表明:经过卡那霉素(Km)筛选和对抗性植株的PCR和Southern杂交分析,证明APX基因成功地整合到普那菊苣基因组中。转APX基因普那菊苣植株对NaCl和甘露醇胁迫表现出一定的抗性,在NaCl浓度为500mmol.L-1、甘露醇浓度为30g.L-1的条件下,转APX基因不定芽能够正常生根和生长,转基因植物叶片外植体能够形成愈伤组织和再生植株,而野生型植株不定芽不能正常生根、已生根幼苗不能正常成长,野生型植株叶片不能形成愈伤组织。
- 张丽君程林梅杜建中王亦学郝耀山李贵全孙毅
- 关键词：普那菊苣农杆菌介导抗逆性
- 高温胁迫下不同玉米花粉组蛋白Zm-H3基因的克隆及表达分析被引量：2
- 2021年
- 为了解组蛋白H 3基因(Zm-H3)在不同耐高温玉米(Zea mays L.)材料中的差异表达情况,以中地88(耐高温)和先玉335(不耐高温)2个玉米品种为材料,在高温条件下取其花粉提取总RNA,再通过mRNA纯化、反转录、文库构建及高通量测序等步骤,克隆了一个玉米组蛋白Zm-H3。生物信息学分析表明,该基因位于玉米第6染色体上,全长cDNA为904 bp,编码长度为136个氨基酸的蛋白质,进一步对该蛋白的理化性质、功能位点及结构作了分析。转录组高通量测序结果显示,Zm-H3基因在这2个玉米材料中的表达呈现显著差异,在中地88材料中出现了高表达,为先玉335材料的2.08倍。该实验结果可以为玉米组蛋白H 3基因的应用研究奠定分子基础,也可为其它基因的克隆及表达分析提供参考。
- 徐劲松杨海鹏张红梅刘小红刘小红郝耀山
- 关键词：玉米组蛋白转录组生物信息学
- 东亚飞蝗几丁质酶家族基因的表达特性与功能研究被引量：23
- 2011年
- 【目的】研究东亚飞蝗几丁质酶家族基因的时空表达特性及其在蜕皮发育中的生物学功能,筛选在飞蝗发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的飞蝗有效控制提供重要的基础数据。【方法】在东亚飞蝗EST数据库搜索几丁质酶基因片段,用生物信息学方法分析所获得的基因片段序列;以飞蝗不同龄期第4天若虫和5龄东亚飞蝗不同组织部位为材料提取RNA并反转录为cDNA,应用RT-PCR方法研究时空表达特性;选取在表皮高表达的几丁质酶基因LmCht6,采用RNA干扰方法研究其生物学功能。【结果】基于东亚飞蝗EST库搜索和进一步的序列分析,共获得7条几丁质酶基因片段;不同组织部位与不同龄期RT-PCR结果表明这7条几丁质酶基因的时空表达特性存在明显差异,其中LmCht6主要在表皮表达;LmCht6的RNA干扰试验表明:2龄飞蝗注射dsLmCht6后,其几丁质酶基因LmCht6表达量明显降低;飞蝗从2龄到3龄的龄期转化过程中,表现为发育延迟,新表皮与旧表皮无法完全分离,导致死亡率达到72.2%。【结论】东亚飞蝗拥有多个几丁质酶基因,它们的时空表达特性存在差异;LmCht6在飞蝗蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能,该基因被沉默后飞蝗无法完成蜕皮而导致死亡。
- 李大琪杜建中张建琴郝耀山刘晓健王亦学马恩波张建珍孙毅
- 关键词：东亚飞蝗几丁质酶基因RT-PCRRNA干扰
- 农杆菌介导萌动种胚转化法将抗草甘膦基因导入蓖麻被引量：3
- 2016年
- 为简化和提高转化效率,以蓖麻品种汾蓖10号为材料,采用非组培的农杆菌介导萌动种胚转化法,获得抗草甘膦植株T0。方法是在生长点附近针刺3针,超声波(强度800W)处理后,与农杆菌共培养16h。在随机选取的800株转化处理植株中,检测到5株PCR阳性植株,平均转化率为6.3‰;在喷施除草剂后存活的26株转化处理植株中,经PCR和Southern blot检测,获得了3株阳性抗草甘膦T0植株。本方法操作简单,成本低,避免了冗长繁琐的组织培养过程,为蓖麻遗传转化研究提供了新的思路和方法。
- 杨俊芳王亚张欢欢王亦学郝耀山郭志强王宏伟
- 关键词：蓖麻
- 草莓根腐病的病原菌分离鉴定及拮抗菌CM3的抑制作用研究被引量：15
- 2018年
- 从草莓根腐病病株根部成功分离了2株真菌FC2016-3和FC2016-7,经过鉴定确定其为根腐病的病原菌——尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefacien)CM3对菌株FC2016-3和FC2016-7有明显的抑制作用,也对其他土传病害病原菌有较好的抑制效果。盆栽实验结果显示,菌株CM3对尖孢镰刀菌FC2016-7引起的草莓根腐病的防治效果达到了64.86%,而且还具有促进草莓根部生长的能力。研究表明菌株CM3是一株既能防病也能促生的菌株,适合开发成微生物制剂。
- 陈哲黄静赵佳郝耀山梁宏
- 关键词：尖孢镰刀菌解淀粉芽孢杆菌生物防治
- 一种养猪饲料混合装置
- 本实用新型公开了一种养猪饲料混合装置，包括外箱和混合箱，所述外箱顶部的中端固定安装有电机，所述电机的输出轴固定连接有搅拌杆，所述搅拌杆的左右两端均固定连接有搅拌叶，所述外箱内腔的底部固定安装有吸料机，所述吸料机的出料端通...
- 刘泽民王红宝任永康赵佳田沃李彦明郭雪丽刘一飞郝耀山温永亮
- 文献传递
