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郭小英
作品数:
1
被引量:6
H指数:1
供职机构:
哈尔滨医科大学附属第二医院
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
李颖
哈尔滨医科大学附属第二医院
郝立君
哈尔滨医科大学附属第二医院
于冬梅
哈尔滨医科大学附属第二医院
罗赛
哈尔滨医科大学附属第二医院
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罗赛
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李颖
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中国肿瘤
年份
1篇
2007
共
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人细胞周期蛋白cyclin D_1基因RNAi表达载体的构建与鉴定
被引量:6
2007年
[目的]构建针对人细胞周期蛋白cyclinD1基因的RNAi真核表达载体,检测其对人卵巢癌HO-8910细胞cyclinD1基因表达的干扰效率。[方法]以cyclinD1为靶向设计,合成的4条互补寡核苷酸链克隆至pSUPER载体中,得到重组质粒pSUPER-C1 ̄4,行双酶切分析后测序鉴定;运用脂质体介导转染HO-8910细胞,G418筛选;采用RT-PCR检测对cyclinD1基因mRNA表达的干扰,并筛选有效的siRNA干扰序列。[结果]经酶切测序鉴定证实,重组质粒中已插入目的序列;RT-PCR表明有4个重组载体均不同程度抑制目的基因的转录,但以pSUPER-C2的干扰效率最强。[结论]在卵巢癌细胞系筛选出有效干扰cyclinD1基因表达siRNA序列,成功构建针对cyclinD1基因的RNAi真核表达载体有效抑制目的基因的表达。
于冬梅
郝立君
郭小英
李颖
罗赛
关键词:
RNAI
CYCLIN
D1
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