您的位置: 专家智库 > >

韩海勃

作品数:21 被引量:65H指数:5
供职机构:北京大学肿瘤医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 16篇期刊文章
  • 3篇会议论文
  • 2篇专利

领域

  • 16篇医药卫生
  • 3篇生物学

主题

  • 7篇血吸虫
  • 7篇日本血吸虫
  • 7篇吸虫
  • 7篇细胞
  • 7篇硫氧还蛋白
  • 7篇克隆
  • 5篇疫苗
  • 5篇癌细胞
  • 4篇小鼠
  • 4篇免疫
  • 4篇抗体
  • 4篇基因
  • 4篇肝癌
  • 3篇蛋白
  • 3篇多克隆
  • 3篇多克隆抗体
  • 3篇迁移
  • 3篇人肝
  • 3篇人肝癌
  • 3篇人肝癌细胞

机构

  • 12篇北京大学肿瘤...
  • 8篇中国疾病预防...
  • 1篇约翰·霍普金...
  • 1篇中华医学会
  • 1篇中国民主同盟
  • 1篇中国医师协会
  • 1篇北京大学临床...

作者

  • 21篇韩海勃
  • 9篇赵威
  • 8篇张志谦
  • 8篇曹建平
  • 6篇刘述先
  • 4篇沈玉娟
  • 4篇卢潍媛
  • 4篇李小红
  • 3篇汤林华
  • 3篇徐馀信
  • 2篇王力民
  • 1篇王晓红
  • 1篇胡颖
  • 1篇丁慧荣
  • 1篇刘锡娟
  • 1篇刘海鹏
  • 1篇张连海
  • 1篇吴晓江
  • 1篇季科
  • 1篇张宏

传媒

  • 3篇细胞与分子免...
  • 2篇基础医学与临...
  • 2篇中国血吸虫病...
  • 1篇解剖学报
  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇安徽医科大学...
  • 1篇中国人兽共患...
  • 1篇国外医学(寄...
  • 1篇中国寄生虫学...
  • 1篇中国肿瘤临床
  • 1篇中国生物工程...
  • 1篇国际医学寄生...
  • 1篇中华医学会医...

年份

  • 1篇2019
  • 2篇2014
  • 4篇2011
  • 1篇2010
  • 3篇2009
  • 3篇2007
  • 3篇2006
  • 4篇2005
21 条 记 录,以下是 1-10
排序方式:
离子通道蛋白X是肝癌肿瘤起始细胞的标志物和治疗分子靶点
目的 肿瘤起始细胞(或称为肿瘤干细胞)的存在被认为是肿瘤复发转移、耐受常规治疗的根本原因.对于这类细胞的分离鉴定和研发针对性的治疗用生物技术类药物是肿瘤学研究领域亟待解决的关键科学问题.本研究对离子通道蛋白X是肝癌肿瘤起...
张志谦赵威王力民韩海勃
关键词:肝癌标志物分子靶标
RKIP蛋白在多个人肺癌细胞系中的表达下调被引量:19
2007年
目的检测肺癌细胞系中RKIP的表达情况,探讨其与肺癌细胞侵袭、转移的关系。方法RT-PCR法检测多个人肺癌细胞系中RKIP的表达情况,构建表达人RKIP的融合蛋白,纯化后免疫新西兰白兔制备多克隆抗体。ELISA鉴定血清特异抗体效价,Western blot鉴定血清特异抗体并检测肺癌细胞系中RKIP表达。结果成功构建表达人RKIP的融合蛋白,制备的多抗效价达到106,可特异检测细胞内RKIP表达;有转移性的3个肺癌细胞系中RKIP表达明显下调,且在转移性较高的A549细胞中下调更明显。结论获得了效价和特异性都良好的RKIP多抗,适合应用于RKIP的检测。RKIP表达下调与肺癌细胞侵袭、转移有关,有可能成为肺癌治疗的靶点。
韩海勃张志谦赵威
关键词:RKIP多克隆抗体肺癌
小鼠抗人前B细胞白血病同源盒基因3多克隆抗体的制备与鉴定被引量:1
2014年
目的制备前B细胞白血病同源盒基因3(PBX3)多克隆抗体。方法采用反转录PCR扩增PBX3基因区序列,并重组入原核表达载体pGEX-4T-1,重组载体转化BL21大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导GST-PBX3融合蛋白的表达。SDS-PAGE纯化融合蛋白,并用GST-PBX3融合蛋白免疫BALB/c小鼠,收集经过免疫的小鼠血清即抗PBX3的多克隆抗血清,采用间接ELISA检测其效价,通过免疫细胞化学技术及Western blot法鉴定其特异性。结果成功构建pGEX-4T-1/PBX3原核表达载体,转化BL21菌株后可高效表达GST-PBX3融合蛋白,且以不可溶包涵体形式存在。SDS-PAGE纯化蛋白并免疫小鼠产生的抗PBX3血清可特异识别细胞外源过表达的PBX3蛋白,同时可检测到细胞外源性PBX3蛋白的细胞内定位情况。结论获得效价和特异性良好的PBX3多克隆抗体。
张媛王力民赵威韩海勃
关键词:融合蛋白表达多克隆抗体
日本血吸虫硫氧还蛋白编码基因的克隆表达及其免疫原性研究被引量:5
2006年
Schistosomiasis japonica remains a major public health problem in China despite the remarkable successes in schistosomiasis control achieved over the past four decades. The present strategy to control schistosomiasis relies primarily on diagnosis and targeted chemotherapy supplemented with Oncomelania control through mollusciciding and environmental modification. Praziquantel is an effective drug currently available for human treatment, but it cannot prevent re-infection, and the development of drug resistance by schistosomes and existence of numerous livestock for continued transmission of this parasitic disease to human being have mainly been in concerns. It seems that the most feasible long-term solution to the problem of schistosomiasis at present is a protective vaccine. Considerable efforts have been aimed at the identification of relevant schistosome antigens that may induce protective immune response. Many putative vaccine antigens for schistosome have been identified during the past decades, such as GST, TPI, paramyosin, myosin, membrane-associated antigen (23 kDa) FABP and so on. Unfortunately, only partial protection was reached with any of these candidate antigen formulations. Actually it is very common that the vaccines currently being tested in many laboratories have only shown limited efficacy in animal trials. There remains a urgent need for continuous search for new vaccine candidates. Thioredoxins (Trx) are a class of small 12 kDa redox proteins known to be present in all eukaryotic and prokaryotic organisms. It acts as electron carriers necessary for the catalytic cycles of biosynthetic enzymes, such as ribonucleotide reductases, methionine sulfoxide reductases and sulfate reductases. It generally protects cytosolic proteins from aggregation or inactivation via oxidative formation of intra- or inter-molecular disulfides and is able to reduce H2O2 and scavenge free radicals. It is associated with regulation of apoptosis, immunomodulation, etc. According to the results from our proteomics
韩海勃曹建平
关键词:日本血吸虫硫氧还蛋白克隆重组抗原核酸疫苗免疫
血吸虫硫氧还蛋白免疫原性研究 Ⅰ日本血吸虫硫氧还蛋白DNA疫苗的构建和鉴定被引量:3
2005年
目的构建日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白(Trx)DNA疫苗(pcDNA3-SjcTrx),并进行分子生物学鉴定。方法根据日本血吸虫菲律宾株Trx基因序列设计一对引物,上游引物引入BamHI酶切位点和起始密码子ATG,下游引物引入EcoRI酶切位点和终止密码子TCA。以日本血吸虫大陆株成虫总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增日本血吸虫大陆株Trx(SjcTrx)编码基因。经双酶切并纯化的PCR产物与经双酶切纯化的pcDNA3质粒DNA片段用T4DNA连接酶连接,克隆入真核表达载体pcDNA3,构建重组质粒pcDNA3-SjcTrx,并经限制性内切酶双酶切、琼脂糖凝胶电泳、PCR检测和核苷酸序列测定进行鉴定。结果SjcTrx编码基因RT-PCR产物约334bp,构建的pcDNA3-SjcTrx重组质粒DNA经限制性内切酶双酶切和PCR扩增产物于琼脂糖凝胶电泳均观察到相同大小基因片段,根据核苷酸序列测定结果推导的氨基酸序列与日本血吸虫菲律宾株和曼氏血吸虫Trx分别有97%和43%的同源性。结论日本血吸虫(大陆株)硫氧还蛋白DNA疫苗构建成功,为开展动物保护性免疫试验创造了条件。
曹建平韩海勃刘述先
关键词:日本血吸虫硫氧还蛋白真核表达载体核酸疫苗免疫
小鼠抗人Myosin Va多克隆抗体的制备和鉴定被引量:3
2009年
目的:制备Myosin Va多克隆抗体,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法:PCR扩增编码人Myosin Va C末端(MyoVaCT)278个氨基酸的cD-NA片段,DNA重组入原核表达质粒pET28a,转化大肠杆菌BL21菌株,异丙基β-D硫代半糖苷(IPTG)诱导表达His-MyoVaCT融合蛋白。经电泳纯化的融合蛋白免疫BALB/c小鼠,制备抗血清。通过ELISA和免疫荧光法鉴定血清特异抗体效价和特异性。结果:成功构建了pET28a/MyoVaCT原核表达载体,转化BL21后可高效表达融合蛋白His-MyoVaCT,纯化蛋白免疫小鼠后产生的Myosin Va多抗可特异检测细胞内源性Myosin Va的表达及定位情况,同时能特异识别细胞内外源表达的Myosin Va分子。结论:获得了效价和特异性都良好的Myosin Va抗体,适合应用于Myosin Va的检测。
韩海勃蓝林祥张志谦赵威
关键词:MYOSINVA融合蛋白多克隆抗体
日本血吸虫中国大陆株硫氧还蛋白基因及其克隆表达方法和应用
本发明涉及日本血吸虫(中国大陆株)硫氧还蛋白(SjcTrx)基因的序列及其克隆表达方法和应用。本发明公开的SjcTrx基因具有序列1所示的核苷酸序列及编码相应的氨基酸序列。本发明还公开了SjcTrx基因在大肠杆菌中的表达...
曹建平韩海勃刘述先徐馀信汤林华沈玉娟李小红卢潍媛
文献传递
转移相关分子链Actin-CD44-MMP-2在乳腺癌转移实验中的改变被引量:1
2011年
目的研究乳腺癌转移相关的分子机制及抑制体内外转移的作用和机制。方法选择高、低转移性乳腺癌细胞系BICR-H1和MCF-7,用明胶底物非变性电泳分析法、Western blot和免疫荧光染色等方法,观察肌动蛋白、CD44和基质金属蛋白酶2分子链(ACM)成员分子的定性与定位关系。利用荧光标记肿瘤鸡胚尿囊膜(CAM)模型,血管内注射顺铂或MMP-2 C末端PEX融合蛋白,利用荧光显微镜直接观察鸡胚肺转移抑制情况与癌细胞的ACM水平。结果高转移的BICR-H1细胞ACM分子链呈高表达,分子定位相互关联。低转移性的MCF-7细胞呈低表达或无表达。体外实验中,顺铂和PEX分别抑制了CD44和MMP-2的表达。体内实验中,5~30μg顺铂能够抑制BICR-H1和MCF-7肿瘤的体内生长,呈剂量依赖性。30μg顺铂使乳腺癌BICR-H1细胞体内转移克隆数下降到(8±6)个[对照组为(30±15)个],而同剂量PEX可以完全抑制其体内转移。结论 ACM分子链表达与乳腺癌的转移性密切相关。顺铂和PEX分别通过封闭ACM分子链的环节,使CD44或MMP-2表达抑制,从而抑制乳腺癌细胞的体内外生长和转移。
赵威韩海勃林仲翔张志谦
关键词:乳腺癌肌动蛋白CD44MMP-2
日本血吸虫硫氧还蛋白编码基因的克隆和表达被引量:2
2005年
目的克隆和表达日本血吸虫大陆株硫氧还蛋白(SjcTrx)的编码基因。方法根据日本血吸虫菲律宾株硫氧还蛋白基因序列设计一对引物,上游引物引入BamHI酶切位点和起始密码子ATG,下游引物引入SalI酶切位点和终止密码子TAA。以日本血吸虫大陆株成虫总RNA为模板,经反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增SjcTrx基因。经双酶切并纯化的PCR产物与同样双酶切并纯化的pET28a质粒DNA片段用T4 DNA连接酶连接,构建重组质粒pET28a-SjcTrx,转化BL21感受态菌并大量扩增。重组质粒DNA经限制性内切酶双酶切、PCR、琼脂糖凝胶电泳和核苷酸序列测定进行鉴定。pET28a-SjcTrx/BL21用IPTG诱导表达。结果SjcTrx编码基因RT-PCR产物约334 bp,构建的重组pET28a-SjcTrx表达质粒DNA经限制性内切酶双酶切和PCR扩增产物于琼脂糖凝胶电泳均观察到相同大小基因片段。根据核苷酸序列测序结果推导的氨基酸序列与日本血吸虫菲律宾株和曼氏血吸虫Trx分别有97%和43%的同源性。表达的重组蛋白经SDS-PAGE分析,约14kDa。Western blotting显示该重组蛋白可被日本血吸虫感染兔血清和重组抗原免疫小鼠血清所识别。结论SjcTrx基因的表达获得成功,并获得纯化蛋白,为开展动物保护性免疫试验创造了条件。
韩海勃曹建平刘述先
关键词:日本血吸虫硫氧还蛋白克隆重组抗原
抗人RKIP单克隆抗体的制备及鉴定被引量:3
2007年
目的:制备抗人RKIP(hRKIP)的单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定。方法:自行构建表达人RKIP重组蛋白(reRKIP),纯化的reRKIP免疫BALB/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用有限稀释法和间接ELISA法克隆和筛选阳性杂交瘤细胞株,用免疫荧光和Western blot鉴定mAb的特异性。结果:成功构建RKIP原核表达载体,转化BL21后可高效表达reRKIP,成功地获得4株(EC1,ED2,ED5和8B3)分泌抗人reRKIP mAb的杂交瘤细胞株,杂交瘤细胞培养上清分泌的mAb在免疫荧光和Westernblot试验中均可与细胞中RKIP蛋白反应。结论:成功地制备了4株抗hRKIP mAb,为进一步研究RKIP生物学功能奠定了基础。
韩海勃张志谦赵威
关键词:RKIP单克隆抗体
共3页<123>
聚类工具0