项军强
- 作品数:2 被引量:0H指数:0
- 供职机构:浙江理工大学生命科学学院更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 糖尿病并发症相关醛糖还原酶基因的表达与纯化
- 糖尿病及糖尿病并发症(diabetic complications,DCC)的治疗一直是医学研究的热点和难点。随着糖尿病患者病程的发展,患者易患糖尿病慢性并发症,约73.2%的糖尿病患者伴有一种或多种糖尿病并发症,而且晚...
- 项军强
- 关键词:糖尿病并发症醛糖还原酶基因基因表达
- 醛糖还原酶cDNA的克隆和表达
- 2011年
- 醛糖还原酶能促使葡萄糖转化成山梨醇,是多元醇代谢通路的限速酶,与糖尿病并发症的发生和发展有密切关系。用RT-PCR扩增醛糖还原酶基因,将扩增产物克隆到大肠杆菌表达载体pET22b(+),构建重组表达载体pET22b(+)-AR。经PCR、双酶切和序列测定鉴定后,转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blotting对重组蛋白进行分析和鉴定后,利用Ni-NTA琼脂糖亲和层析纯化获得重组蛋白AR-(His)6。紫外分光光度法对AR-(His)6进行酶活检测,其比活力为0.45 U/mg,为下一步筛选具有抑制醛糖还原酶活性的化合物及开发有临床应用价值的醛糖还原酶抑制剂提供参考。
- 项军强蒋红亮张虹丁明赵辅昆
- 关键词:糖尿病并发症醛糖还原酶表达纯化