马玉香
- 作品数：6 被引量：20H指数：3
- 供职机构：北京大学首钢医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- p19ARF对白血病细胞增殖与凋亡的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 :克隆正常人p19ARF基因 ,探讨其对肿瘤细胞增殖、细胞周期与凋亡的影响。方法 :用流式细胞术、MTT测定及末端标记观察p19ARF基因对白血病细胞HEL和K5 62的作用。结果 :将p19ARF导入HEL细胞后可明显抑制细胞繁殖 ,细胞周期被阻滞在G1期并可导致部分细胞凋亡。但是p19ARF对于p5 3基因突变的K5 62细胞的增殖和细胞周期没有明显的影响 ,也不能诱导其凋亡。结论 :p19ARF可显著抑制人白血病细胞的增殖 ,其抑制作用依赖于p5
- 白雪源车凤翔马玉香李劲松翟俊辉
- 关键词：细胞周期细胞凋亡白血病
- NaDC3过表达对人肾小管细胞能量代谢和活性氧产生的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:研究三羧酸循环中间代谢产物转运蛋白-高亲和力钠依赖性二羧酸转运蛋白(NaDC3)基因过表达对人肾小管细胞能量代谢与活性氧(ROS)产生的影响。方法:用重组NaDC3逆转录病毒载体感染人肾小管上皮细胞HKC。用Western blotting检测细胞中外源性NaDC3蛋白的表达水平。通过液体闪烁法测定细胞内同位素[3H]标记琥珀酸(NaDC3的转运底物)的浓度。分别用Clark电极法和反相高压液相法测定细胞内氧耗量和ATP含量。分别用荧光探针JC-1和CM-H2DCFDA处理细胞后通过激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位和细胞内ROS含量。结果:Western blotting结果显示导入外源NaDC3基因后可使细胞内NaDC3蛋白的表达水平明显增加。转运实验显示NaDC3病毒感染细胞内的[3H]-琥珀酸水平明显高于未感染和对照载体感染细胞。NaDC3病毒感染细胞中的氧耗量和ATP含量明显高于未感染和对照载体感染细胞。激光共聚焦检测显示,与未感染和对照载体感染细胞相比,NaDC3感染细胞的线粒体膜电位和ROS水平明显增加。结论:NaDC3过表达可通过转运过多的三羧酸循环中间代谢产物进入细胞内而加快肾小管上皮细胞能量代谢的速率、增加细胞内ROS的产生水平。
- 马玉香白雪源汪扬冯哲傅博陈香美
- 关键词：三羧酸循环肾小管转运蛋白能量代谢
- 人胆酸转运蛋白基因的克隆、亚细胞定位及其在肾组织中的表达
- 2008年
- 目的:克隆人肾与小肠ASBT(顶端Na+/胆汁酸协同转运蛋白)基因并比较2者的序列差别,明确ASBT蛋白在肾小管上皮的亚细胞定位及在人肾组织中的表达情况。方法:从人肾和小肠组织中提取总RNA,然后用带有8肽FLAG标签的PCR引物通过RT-PCR技术扩增ASBT全长cDNA基因并测序,并将其插入真核表达载体中构建ASBT蛋白真核表达载体,然后将其转染到肾小管上皮细胞LLC-PK1中表达并用免疫荧光-激光共聚焦显微镜观察该蛋白的亚细胞定位情况。用免疫组化技术观察ASBT在人肾组织中的表达分布。结果:序列分析结果表明肾小管ASBT基因的序列与小肠ASBT序列完全一致。Western blotting表明ASBT基因在LLC-PK1细胞中得到了正确的表达。共聚焦显微镜分析显示正常ASBT蛋白主要定位于肾小管上皮细胞膜上,与生物信息学的预测结果一致。免疫组化染色表明ASBT蛋白主要表达于人近端肾小管上皮的刷状缘侧,在间质及远端小管没有表达。结论:人肾小管ASBT基因序列与小肠ASBT相同,ASBT蛋白主要表达于近端肾小管上皮细胞管腔侧细胞膜。
- 白雪源马玉香罗成华师锁柱侯剀冯哲傅博陈香美
- 关键词：胆汁酸类肾小管亚细胞定位载体蛋白质类
- 重组腺病毒介导的p16与p53基因联合转移对人肺癌细胞系H358生物学行为的影响被引量：11
- 2000年
- 目的 探讨p16与p5 3基因对肺癌细胞的协同抑制效应及凋亡诱导作用。方法 首先用同源重组技术构建重组p16和p5 3腺病毒载体 ,然后单独或联合感染人肺癌细胞系H35 8,用免疫组织化学法及Westernblot检测腺病毒介导的基因转移效率与表达水平 ,用克隆形成实验、原位末端标记及流式细胞术观察它们对H35 8生长特性及凋亡的影响。结果 免疫组织化学染色结果表明重组腺病毒载体可高效地将外源基因p5 3转移到肺癌细胞中表达 ,转移效率可达 98%以上。单独导入p16或p5 3基因均可抑制H35 8细胞生长 ,但p16的抑制作用强于p5 3;两者联合使用可完全抑制H35 8细胞增殖。原位末端标记及流式细胞术分析显示单独导入p16基因只引起细胞周期阻滞 ,不能诱导细胞凋亡 ;导入p5 3基因除导致G1期阻滞外 ,也诱导少数细胞凋亡 ;同时导入 2种基因则可明显的诱导凋亡。结论 p16与p5 3基因对肺癌细胞增殖具有协同抑制作用 ,p16基因可以促进p5
- 白雪源车凤翔李劲松马玉香周煜翟俊辉孟令英
- 关键词：腺病毒抑癌基因
- 高糖诱导人肾小管上皮细胞凋亡的机制研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨高血糖对人肾小管上皮细胞活性氧(ROS)产生及凋亡的影响。方法将人近端肾小管上皮细胞(HKC)分别以不同时间在含有5.5 mM D(右旋)-葡萄糖(正常糖对照组)、25 mMD-葡萄糖(高糖组)和20 mML(左旋)-葡萄糖+5.5 mMD-葡萄糖(渗透压对照组)的DMEM培养基中培养。用化学发光法特异性检测细胞内H2O2水平。将细胞用荧光染料CM-H2DCFDA标记后用激光共聚焦显微镜检测活细胞中总ROS水平。用荧光染料Hoechst33258对细胞染色后在荧光显微镜下计数细胞凋亡率。用AnnexinV-FITC/碘化丙锭双染后用流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率。在高糖组中同时加入30 mM的抗氧化剂牛磺酸,观察其对细胞凋亡的影响。结果化学发光法检测和共聚焦显微镜检测显示高糖可明显促进肾小管上皮细胞内活性氧的产生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);Hoechst33258染色法检测和流式细胞仪检测分析显示高糖可明显诱导肾小管上皮细胞的凋亡发生,与其他两对照组比较有显著差异(P<0.01);流式细胞仪检测分析显示抗氧化剂牛磺酸可明显抑制高糖诱导的肾小管细胞凋亡,与高糖组比较有显著差异(P<0.01)。结论高糖可通过促进细胞内生成过量ROS而诱导肾小管细胞凋亡发生,抗氧化剂可阻断高糖诱导的肾小管细胞凋亡。
- 马玉香白光辉白雪源李作祥冯哲傅博
- 关键词：高糖肾小管凋亡牛磺酸
- 腺病毒介导的p53转移对顺铂诱导KB细胞凋亡的影响被引量：4
- 2001年
- 目的 探讨野生型 p5 3基因对顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的影响。方法 用重组p5 3腺病毒 (Ad p5 3)和重组luc腺病毒 (Ad luc)分别感染 p5 3缺失的口腔癌细胞KB ,观察外源p5 3基因对顺铂诱导肿瘤细胞凋亡的影响。 结果 流式细胞术和原位末端标记显示用Ad luc与顺铂联合处理KB细胞不能诱导凋亡发生 ,用Ad p5 3与顺铂联合处理则诱导出较明显的细胞凋亡 ,表明p5 3可增强KB细胞对顺铂的敏感性 ;Northernblot显示 p5 3可下调bcl 2基因表达及上调bax基因的表达。结论 p5 3可能通过调节凋亡相关基因的表达水平而在顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡中发挥重要作用 ,重组p5 3腺病毒与顺铂联合应用有助于克服 p5 3失活肿瘤细胞的耐药性。
- 白雪源马玉香周煜崔红李劲松车凤翔
- 关键词：腺病毒P53顺铂细胞凋亡
