高艳军
- 作品数：8 被引量：25H指数：2
- 供职机构：蚌埠医学院更多>>
- 发文基金：安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金蚌埠市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 神经生长因子受体TrkA和p75在乳腺肿瘤中的表达及意义被引量：7
- 2011年
- 目的观察神经生长因子(NGF)受体TrkA和p75在乳腺肿瘤和不同乳腺癌细胞株的表达情况,分析它们与乳腺肿瘤的相关性及TrkA/p75比值对NGF诱导增殖效应的影响。方法采用免疫组化技术检测15例正常乳腺组织、28例乳腺良性肿瘤和62例乳腺恶性肿瘤中TrkA和p75的表达及乳腺癌细胞株MCF-7和SKBR3中NGF、TrkA和p75的表达,采用实时荧光定量PCR技术检测2种细胞株中TrkA和p75的mRNA表达水平,采用MTT检测2种细胞株对NGF诱导增殖的反应。结果 TrkA在乳腺恶性肿瘤中的表达高于乳腺良性肿瘤和正常乳腺组织(χ2=39.98,P<0.01);p75仅在正常乳腺的肌上皮细胞和结缔组织中高表达,随着肿瘤的恶性程度增高,p75的表达逐渐减少最终缺失(χ2=50.96,P<0.01);SKBR3乳腺癌细胞分泌的NGF,表达的TrkA和p75 mRNA及蛋白水平均高于MCF-7细胞(均P<0.05),并且SKBR3细胞表达的TrkA/p75比值高于MCF-7细胞(P<0.05);相对于空白对照组,NGF可诱导SKBR3和MCF-7细胞的增殖(均P<0.05),并在各时点,NGF对SKBR3细胞诱导的增殖率均高于MCF-7细胞(均P<0.05)。结论 TrkA和p75的表达与乳腺肿瘤的恶性程度有关,有可能作为乳腺癌治疗的分子靶点。
- 杨清玲陈昌杰高艳军章菊
- 关键词：乳腺肿瘤神经生长因子TRKAP75细胞增殖
- CXCR4抑制性多肽对乳腺癌转移基因靶向诊断和治疗的研究
- 杨清玲陈昌杰李柏青丁勇兴章菊孙俊杰杨志峰高艳军
- 近年来，乳腺癌成为威胁女性健康的头号杀手。死亡原因往往与癌细胞侵入到其它组织和器官，造成器官功能衰竭有关。因此新的特异性阻断乳腺癌转移的治疗方法迫切需要。最新的研究报道许多肿瘤表达广泛的趋化因子和趋化因子受体网络，趋化因...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌基因诊断
- pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒的构建及其在活细胞内的作用被引量：2
- 2012年
- 目的:构建pBIFC-VN173-CXCR4和pBIFC-VC155-NT21MP真核表达质粒,利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在活细胞内直接观察趋化因子受体4(chemokine receptor 4、CXCR4和CD184)与CXCR4抑制性多肽的相互作用。方法:应用化学合成法获得巨噬细胞炎症蛋白Ⅱ(viralmacrophage inflammatory protein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)N端21肽(N-terminal 21-mer peptide,NT21MP)编码的基因序列,克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VC155中,筛选含有目标基因的正确克隆。利用RT-PCR扩增人乳腺癌细胞株SKBR3的CXCR4全长基因后,T-A亚克隆至经Kpn I和EcoRⅠ酶切的pBiFC-VN173载体中。然后,经酶切鉴定及DNA测序分析2个基因是否正确连接至真核表达载体中。应用脂质体转染的方法共转染pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VC155-CXCR4至细胞株COS-7中,在荧光显微镜下观察NT21MP与CXCR4在胞内的相互作用。结果:经DNA测序及同源性对比,证实pBiFC-VC155-NT21MP和pBiFC-VN173-CXCR4重组载体构建成功;基因片段与NCBI基因库vMIP-Ⅱ和CXCR4基因CDS序列同源性达99.9%。BiFC法观察NT21MP与CXCR4在细胞内结合出现的荧光信号,该信号分布细胞内。结论:本实验成功构建了应用BiFC技术的真核表达载体,并且在活细胞内检测到NT21MP与CXCR4的互相结合。
- 高艳军杨清玲陈昌杰丁勇兴
- 关键词：质粒
- 病毒巨噬细胞炎性蛋白Ⅱ N端肽调控SDF-1α/CXCR4诱导趋化机制被引量：2
- 2012年
- 目的:评价病毒巨噬细胞炎性蛋白ⅡN端肽(NT21MP)是否通过干扰SDF-1α/CXCR4信号抑制人乳腺癌细胞株SKBR3细胞的趋化作用。方法:以RT-PCR和免疫组化检测SKBR3和MCF-7两种人乳腺癌细胞中CXCR4的表达;用细胞转移实验检测在NT21MP存在或缺乏的情况下SDF-1α诱导SKBR3细胞的趋化作用;以Fluo3/AM为细胞内游离钙离子的荧光指示剂,用激光扫描共聚焦显微镜测定NT21MP对SDF-1α诱导SKBR3细胞内游离钙浓度的影响;Western blot分析ERK1/2和FAK蛋白的磷酸化水平变化。结果:相对于MCF-7细胞,SKBR3细胞中CXCR4蛋白表达水平较高;经SDF-1α处理后,SKBR3的迁移能力提高,CXCR4抑制剂AMD3100可有效抑制SKBR3细胞的迁移,细胞经NT21MP预处理后,可剂量依赖性地抑制SKBR3细胞的迁移(P<0.05);NT21MP也可抑制由SDF-1α诱导的细胞内Ca2+峰值(P<0.05),而钙离子浓度升高是SKBR3细胞迁移的重要信号之一;另外,相对于阴性对照组,NT21MP也可下调SDF-1α诱导的SKBR3中信号蛋白ERK1/2和FAK的磷酸化水平(P<0.05)。结论:NT21MP可抑制SDF-1α诱导的SK-BR3细胞的迁移,可能与其上游钙离子释放和ERK1/2及FAK磷酸化阻断信号有关。
- 杨清玲丁勇兴陈昌杰杨志峰高艳军
- 关键词：CXCR4胞外信号调节激酶
- vMIP-ⅡN端重组肽的表达纯化及活性鉴定被引量：2
- 2010年
- 病毒巨噬细胞炎症蛋白-Ⅱ(viralmacrophageinflammatoryprotein-Ⅱ,vMIP-Ⅱ)由卡波西肉瘤疱疹病毒编码,前期研究证明了vMIP-IIN端21肽(NT21MP)选择性的阻断趋化因子CXCR4,从而抑制乳腺癌细胞趋化的活性。通过化学合成法获得编码vMIP-ⅡN末端的基因序列,与pGEX-KG(克隆位点的N-端有谷胱甘肽转移酶GST标签序列)连接构建原核表达载体,重组质粒在大肠杆菌E.coliBL21(DE3)中获得表达,免疫印迹显示重组蛋白GST-NT21MP主要在细菌裂解液上清中表达,可溶性部分经亲和层析、超滤、快速蛋白液相色谱(fastproteinliquidchromatography,FPLC)纯化获得高纯度的GST-NT21MP蛋白。利用Transwell趋化试验测定GST-NT21MP的活性。结果显示,重组蛋白GST-NT21MP能够抑制乳腺癌细胞SK-BR-3的趋化活性,可作为治疗乳腺癌转移的潜在性靶向药物。
- 杨清玲杨志峰高艳军陈昌杰
- 关键词：CXCR4SDF-1
- 病毒趋化因子ｖMIP-II N端重组肽的制备及其抗乳腺癌活性和靶向诊断的作用
- 杨清玲陈昌杰丁勇兴唐杰张枫杨志峰高艳军陈素莲张俊杰黄静蔡颖朱丽华卢晓辉
- 该项目通过以临床乳腺癌石蜡切片病理检测及荷乳腺癌小鼠模型的建立等技术手段，研究自主设计并制备的来源于天然病毒的小分子多肽对转移性乳腺癌基因治疗和靶向诊断的作用。1、通过CXCR4表达与乳腺癌临床分期和转移潜能的相关性分析...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌基因治疗
- 奥沙利铂对肝癌细胞HuH-7细胞周期的影响被引量：11
- 2012年
- 目的探讨奥沙利铂(Oxaliplatin,L-OHP)对人肝癌细胞株HuH-7细胞周期的影响及其相关机制,为其应用于原发性肝细胞癌临床治疗提供理论依据。方法 MTT方法检测L-OHP对肝癌细胞HuH-7生长的抑制作用;流式细胞术(FCM)检测L-OHP诱导HuH-7细胞周期阻滞的作用;RT-PCR和Western blot方法观察L-OHP对细胞周期调节因子Cyclin D1、CDK2、CDK4及p16、p21、p53表达的影响。结果 MTT结果显示L-OHP对HuH-7细胞增殖抑制率随药物浓度增加及作用时间延长有升高趋势,呈时间剂量依赖性。L-OHP能够诱导HuH-7细胞周期阻滞于S期,并可下调CDK4和Cyclin D1蛋白的表达,上调p21蛋白的表达,低浓度上调p53表达而高浓度下调p53表达,CDK2和p16表达无明显变化。结论 L-OHP可能通过影响CDK4、Cyclin D1及p21的活性使HuH-7细胞阻滞在S期,从而抑制肝癌细胞HuH-7的增殖。
- 高洁吴穷杨清玲高艳军陈昌杰
- 关键词：奥沙利铂细胞周期肝癌
- CXCL12/CXCR4信号通路及其与肿瘤关系的研究进展被引量：1
- 2014年
- 趋化因子是一类结构相似，对某些细胞具有趋化作用的小分子蛋白质。趋化因子12（CXCL12）及其受体（CXCR4）在许多生理和病理过程中发挥重要作用，在肿瘤中通过几个不同途径使细胞内信号发生改变，能够促进肿瘤细胞增殖、运动、黏附、侵袭、转移和分泌等，影响着肿瘤的发生、发展和预后。本文就近年来CXCL12／CXCR4研究进展作一综述。
- 高艳军杨清玲陈昌杰
- 关键词：趋化因子肿瘤信号通路
