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男性避孕纳米粒的制备与体外实验研究被引量：3: 2015年; 目的构建聚乳酸-羟乙酸共聚物(polylactic acid-glycolic acid,PLGA)包载促卵泡生成素受体表位肽(FSHR32-44)的纳米粒,探讨PLGA材料作为避孕疫苗载体的可行性。方法使用PLGA为载体,制备出包载促卵泡生成素受体的B细胞表位(FSHR32-44)的纳米粒,透射电镜(TEM)观察表观形态,粒径仪检测粒径分布范围和Zeta电位,体外释放试验检测其理化特性。激光共聚焦显微镜观察小鼠骨髓来源树突状细胞(DCs)吞噬FSHR可溶性多肽和FSHR/PLGA NP的能力,流式细胞仪检测FSHR、PLGA NP和FSHR/PLGA NP促骨髓来源DCs成熟能力。结果单乳-溶剂挥发法制备的FSHR/PLGA NP大小粒径分布均匀、表面规整,粒径(296.3±3.5)nm,Zeta电位(-16.1±0.4)m V,FSHR包封率(62.71±2.83)%,并具有缓慢释放抗原的能力;体外细胞水平实验结果显示FSHR表位肽纳米粒易于被DCs摄取,有剂量和时间依赖性,能显著上调DCs表面CD40、CD86、CD83和MHC-Ⅱ功能分子的表达。结论 PLGA包载FSHR多肽有良好的包封率,易被DCs吞噬,并有强的促进DCs成熟作用,可以作为FSHR32-44避孕疫苗的载体。; 徐萍萍杨利华魏桂芝张建祥东亚君梁志清; 关键词：FSHR PLGA 纳米疫苗避孕

卵巢早衰患者外周血CD4^+CD25^+Treg细胞的变化及意义被引量：13: 2013年; 目的:探讨CD4+CD25+调节性T细胞(即CD4+CD25+Treg细胞)在卵巢早衰发病机制中的作用。方法:流式细胞仪定量检测卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)患者、卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve,DOR)患者及健康对照组外周血CD4+T、CD8+T细胞及CD4+CD25+Treg细胞数量,应用3H-thymidine掺入法测定POF患者及对照组外周血CD4+CD25+Treg细胞对效应性T细胞的增殖抑制功能。结果:与对照组相比,POF患者及DOR患者CD4+CD25+Treg细胞比例降低(P<0.01)、POF患者CD4+T/CD8+T细胞比值增高(P<0.05),DOR患者CD4+T/CD8+T细胞比值无明显变化(P>0.05);POF患者免疫抑制功能无明显降低(P>0.05)。结论:CD4+CD25+Treg细胞比例降低与T细胞亚群失衡可能是POF的发病机制。; 谢江燕东亚君梁志清何畏; 关键词：卵巢储备功能下降

卵巢早衰的免疫学研究进展被引量：45: 2013年; 卵巢早衰(POF)因病因复杂、机制不明,成为一个临床上难治的疾病。大部分卵巢早衰的发病机制不明,已知POF的病因包括医源性因素(如化疗、放疗及外科手术)、自身免疫性因素、遗传因素、感染因素、酶学障碍等。目前越来越多的研究表明,自身免疫是POF的一个重要致病因素,证据表明约20%的POF与自身免疫失调有关,包括HLA-DR抗原的异常表达、抗卵巢抗体等自身抗体等。认为血清抑制素水平、自身抗体可作为POF的预测指标,及时对其行糖皮质激素和雄激素、调节性T细胞的免疫治疗,可以延缓甚至逆转POF。; 谢江燕赵俪梅东亚君何畏; 关键词：卵巢早衰自身免疫自身抗体免疫抑制治疗

人Eppin蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达被引量：2: 2014年; 目的构建人类附睾蛋白酶抑制剂Eppin蛋白原核表达质粒,诱导、表达与纯化后获得到可溶重组蛋白,并检测其免疫学活性。方法将目的基因克隆到表达载体pMALc,转化大肠杆菌表达菌株Rossetta2-OrigamiB(DE3),用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。通过Ni-NTA亲和层析柱及Superdex 200分子筛层析进行纯化后,使用Thrombin酶切,并对目标蛋白进行质谱及Western印迹鉴定。结果成功构建pMALc-Eppin重组质粒,诱导后在上清中检测到Mr57 000大小的可溶MBP-Eppin融合蛋白。目标蛋白纯化与酶切后仍可溶,SDS-PAGE分析显示重组Eppin蛋白相对分子质量约15 000。肽指纹图谱分析证实目标蛋白的序列与人Eppin蛋白吻合,Western印迹显示其具有抗原性。结论经过优化,Eppin蛋白可在原核系统中以可溶形式表达,为以后研究该蛋白的生物活性、避孕免疫机制及制备避孕疫苗奠定坚实的基础。; 陈惠玲刘东马博东亚君何畏刘威; 关键词：原核表达纯化

新生期去胸腺小鼠自身免疫性卵巢疾病外周血中Treg细胞的变化及意义被引量：3: 2013年; 目的探讨CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)在小鼠自身免疫性卵巢疾病(autoimmune ovarian disease,AOD)发生与发展过程中的变化及意义。方法出生第3天乳鼠摘除胸腺(thymectomized on day 3,D3tx)建立D3tx组和假手术组,免疫组织化学观察小鼠卵巢改变,ELISA检测性激素变化,流式细胞学检测术后小鼠外周血中Treg及T细胞亚群比例的变化。结果胸腺切除后5周卵巢出现炎细胞浸润及卵泡闭锁,血清FSH升高,E2下降。小鼠外周Treg在术后1～3周达到高峰后快速下降,缓慢下降直至术后9周仍高于对照组(P<0.05);AOD发生后,CD3+T细胞明显减低(P<0.001),CD4+T减低(P<0.05),CD8+T无明显统计学差异(P>0.05),CD4+/CD8+T细胞比例有下降趋势(P>0.05),但无统计学意义。结论 Treg参与AOD的发病过程,推测可能在AOD发病初期具有潜在保护作用。; 东亚君谢江燕赵婷婷陈慧玲徐萍萍何畏; 关键词：胸腺切除调节性T细胞

GnRH-a预处理在冻融胚胎移植中的价值被引量：9: 2014年; 目的探讨促性腺激素释放激素激动剂(gonadotrophin releasing hormone agonist,GnRH-a)预处理在冻融胚胎移植(frozen-thawed embryo transfer,FET)中的价值。方法回顾分析我科2012年6月至2013年10月因不孕接受FET治疗的507个冻融胚胎移植周期,根据是否接受GnRH-a预处理分为:GnRH-a组(A组)与非GnRH-a组(B组)。分析比较两组患者平均年龄、女性不孕病因、孕激素启动日子宫内膜厚度、移植胚胎数、临床妊娠率及多胎率等之间的差异。结果 A组(60个冻融胚胎移植周期)的临床妊娠率明显高于B组(447个冻融胚胎移植周期),分别为58.34%和43.40%,差异有统计学意义(P<0.05);继续妊娠的观察中,A组胚胎停育及异位妊娠发生率明显低于B组;两组患者平均年龄、移植日子宫内膜厚度、冷冻胚胎复苏率、移植胚胎数目以及优质胚胎率差异均无统计学意义。在盆腔输卵管性不孕人群中,GnRH-a预处理组的临床妊娠率明显高于常规人工周期组(P<0.05)。结论 GnRH-a预处理的方法可以改善子宫内膜容受性,有利于胚胎早期种植,尤其对于盆腔输卵管性不孕患者。; 东亚君李玉艳李敏刘永刚李明舵朱向飞邓丽何畏; 关键词：GNRH-A 冻融胚胎子宫内膜容受性

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东亚君