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何柳媚: 作品数：75 被引量：107H指数：6; 供职机构：深圳市血液中心更多>>; 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学交通运输工程政治法律更多>>

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抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞HLA-E的表达调控及对NK细胞抗肿瘤活性的影响: 目的研究HLA-Ⅰ类基因抗原肽(B7)、巨细胞病毒(CMV)抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞系U266表面HLA-E分子表达水平的调控及其表达水平的改变对NK细胞抗肿瘤活性的影响。方法将体外合成的B7及CMV抗原肽与U26...; 徐筠娉王宋兴何柳媚高素青; 关键词：多发性骨髓瘤抗原肽

HLA测序分型中模棱两可结果的分析及其解决策略被引量：7: 2015年; 目的探讨无关供-受者器官移植人类白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）高分辨分型确认实验中，HLA测序分型模棱两可结果的种类、比例及高效解决方法。方法采用美国Atria公司的HLA测序分型试剂盒，对650人份无关供一受者样本的HLA-A、B、C基因第2、3和4外显子，HLA-DRB1第2外显子及HLA—DQB1第2、3外显子进行常规检测，统计常见模棱两可等位基因种类及比例，再应用PCR-序列特异性引物（squeneespecificprimer，PCRSSP）高分辨试剂盒或增加常规检测区外的外显子进行再测序分型（sequencing—basedtyping，SBT），以获得精确的HLA高分辨分型结果。结果650人份供-受者的HLA-A、B、C、DRB1及DQ引基因的直接测序分型出现模棱两可比例分别为76．31％（496／650），91．08％（592／650），97．69％（635／650），88．62％（576／650）和43．38％（141／650）。共发现常规检测区内模棱两可等位基因型组合36种，常规检测区外模棱两可等位基因组合22种。依据中国常见及确认的（common and well-documented，CWD）HLA等位基因表（1．01版），排除罕见等位基因后，共有9种模棱两可CWD组合，除了HLA—B、C位点包括等3种外，其余的3个位点各出现1种；检测区外模棱两可等位基因组合减少为10种，其中HLAA、B位点各1种，HLA-C、-DRB1位点各4种。所有模棱两可结果采用高分辨PCR—SSP或PCR—SBT方法进行必要的复核确认。结论分析了HLA5个位点测序分型中模棱两可结果的常见种类，采用相应的解决策略，可以达到高效、低耗、精确分型的目的。; 王大明何柳媚邹红岩高素青邓志辉; 关键词：人类白细胞抗原测序分型

2型糖尿病与HLA-E基因相关性研究: 2024年; 目的探讨人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)-E基因与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)的相关性。方法选择深圳市人民医院确诊的T2DM患者254例作为病例组,同期选取深圳市血液中心参加无偿献血的健康献血者272例作为对照组。采用聚合酶链式反应-直接测序分型法(polymerase chain reaction-sequence based typing,PCR-SBT)对两组人群进行HLA-E基因第3外显子和启动子区进行序列测定,比较分析病例组与对照组的基因频率。结果HLA-E*01:01与HLA-E*01:03的差异主要体现在第3外显子756碱基处,当756位碱基只有G峰时,为HLA-E*01:03纯合子,当756位碱基只有A峰时,为HLA-E*01:01纯合子,当756位碱基是G+A峰时,为HLA-E*01:01/E*01:03杂合子。HLA-E*01:03基因频率比较结果显示,病例组中的HLA-E*01:03阳性基因频率显著高于健康对照组,差异有统计学意义[例(%):189(87.10)比209(76.84),χ^(2)=8.39,P<0.05]。当NT-26位只有G时,为HLA-E*01:01:01:01纯合子,当NT-26位碱基只有T峰时,为HLA-E*01:01:01:06纯合子,当NT-26位碱基是G+T峰时,为HLA-E*01:01:01:01/E*01:01:01:06杂合子。NT-26T基因频率比较结果显示,病例组与对照组NT-26T基因频率的组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论HLA-E*01:03基因是T2DM的易感基因,其可能成为预测、诊断或治疗T2DM的一项指标。; 何柳媚孙丽艳贾黎静徐筠娉; 关键词：2型糖尿病人类白细胞抗原-E 基因

HLA全长序列测定及测序分型试剂的研制和应用: 邓志辉徐筠娉杨宝成喻琼王大明邹红岩高素青曾健强何柳媚金士正程良红李桢魏天莉; 人类白细胞抗原（HLA）为人类主要组织相容性系统，具有高度的分子遗传多态性、种族特性、单倍体连锁遗传和连锁不平衡等特点。PCR-SBT技术为全球公认的HLA基因分型“金标准”，然而，国内使用的HLA测序分型试剂尚依赖于国...; 关键词：; 关键词：试剂盒人类白细胞抗原测序分型

深圳地区汉族献血人群MICA等位基因多态性及其与HLA-B基因的连锁不平衡分析: 目的研究主要组织相容性复合体Ⅰ类链相关基因A位点(Major Histocompatibility Complex ClassⅠChain-related Gene A,MICA)在深圳地区汉族献血人群中的分布特点及其与...; 王宋兴徐筠娉何柳媚洪文旭高素青; 文献传递

运用全长序列鉴定HLA-C罕见基因的实验研究: 2013年; 目的检测与分析2例骨髓志愿捐献者携带的罕见等位基因。方法用快速DNA提取试剂盒从全血样本中提取基因组DNA,经HLA-C基因商品化测序分型试剂盒扩增,纯化后的扩增产物作为模板用试剂盒配套的第2、3、4外显子正反向测序引物及自行研制的第5外显子正反向、第6外显子正向和第7外显子反向测序引物进行测序,结果导入Assign-SBT3.5.1.45软件分析,并用PCR序列特异性引物技术(SSP)对标本进行确认。结果分型结果显示其中一例为HLA-C*07:63,另一例为HLA-C*01:24。结论临床移植配型遇罕见基因时应测定全长序列以提高分型结果的准确性,此两例罕见等位基因为中华骨髓库建立HLA高分辨数据库提供了有效依据。; 杨小柯何柳媚张倩杨冬燕王大明; 关键词：等位基因聚合酶链反应

第2代测序技术鉴定人类白细胞抗原等位基因A^*24:353及基因频率分析被引量：1: 2021年; 背景:人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)高分辨确认工作是造血干细胞移植前必不可少的步骤之一,随着工作的不断深入开展及被检测人群的持续增加,人类白细胞抗原新等位基因不断涌现。有些新基因由于发现较晚,相关报道较少,导致基因频率不能准确计算,在缺乏相应数据的情况下,容易造成分型结果的误判,导致配型不相合结果,影响移植配型成功率。目的:对HLA一个等位基因HLA-A*24:353进行检测确认,并对其出现频率进行分析。方法:应用聚合酶链反应-直接测序分型方法对2019年9月至2020年5月间543例临床移植配型供受者进行HLA-A、-B、-C、-DRB1、-DQB1五个位点检测,再用第2代测序技术对HLA-A*24:02/24:353模棱两可结果进行全长序列测定,得到HLA高分辨分型结果,并计算HLA-A*24:353基因出现频率。结果与结论:检出HLA-A*24:02/24:353模棱两可结果146例,采用第2代测序技术进一步鉴定后,检出HLA-A*24:353基因5例,占A*24组的比例为3.42%,在543例检测人群中出现比例为0.92%。结果提示HLA-A*24:353在中国可能并不罕见,进行临床移植配型供受者高分辨分型时,当出现HLA-A*24:02/24:353模棱两可结果时,需做进一步确认,以增加分型结果的准确性,提高移植配型的成功率。; 何柳媚陈浩钟艳平全湛柔邹红岩; 关键词：造血干细胞人类白细胞抗原等位基因移植配型血液

组织配型中HLA单核苷酸多态性及关键质控点: 目的研究中国人群HLA-A、B、C、DRB1和DQB1等位基因分型关键质控点,探讨组织配型实验过程中关键质控点软件、硬件设施方案,以期提高组织配型的精度。方法应用聚合酶链反应-直接测序分型(polymerase chai...; 高素青徐筠娉何柳媚杨宝成朱为刚卢亮; 文献传递

抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞HLA-E的表达调控及对NK细胞抗肿瘤活性的影响被引量：1: 2016年; 目的研究HLA-I类基因抗原肽(B7)、巨细胞病毒(CMV)抗原肽对人多发性骨髓瘤细胞系U266表面HLA-E分子表达水平的调控及其表达水平的改变对NK细胞抗肿瘤活性的影响。方法将体外合成的B7及CMV抗原肽与U266共同孵育,流式细胞术检测这些抗原肽孵育前后U266细胞表面的HLA-E分子表达水平。分离健康人NK细胞,利用CD107a表达检测法研究U266细胞表面HLA-E表达水平改变后,NK细胞对其杀伤活性的变化。结果 HLA-B7抗原肽,CMV抗原肽,均可显著上调人多发性骨髓瘤细胞U266表面的HLA-E分子表达水平,且HLA-E表达上调后,可明显特异性抑制NK细胞杀伤肿瘤细胞活性。结论在肿瘤微环境中,细胞表面HLA-E表达上调可能是肿瘤细胞逃逸NK细胞免疫杀伤的一个重要手段之一。; 徐筠娉王宋兴何柳媚高素青; 关键词：多发性骨髓瘤抗原肽

中华骨髓库造血干细胞捐献志愿者HLA基因分型中模棱两可结果解决方案的探讨: 2011年; 目的探讨中华骨髓库造血干细胞捐献志愿者HLA基因分型中模棱两可结果的解决方案。方法采用聚合酶链式反应（PCR）-测序分型技术（SBT）对20621名中华骨髓库供者的HLA—A、B、DRBl基因进行高分辨分型，并对其中的模棱两可分型结果进行精确分型。根据精确分型后的HLA等位基因频率计算模棱两可结果中真基因型的相对概率，进而对应用基因型相对概率直接鉴别模棱两可分型结果的方法进行评价。结果20621名骨髓库供者HLA-A、B、DRB1基因PCR-SBT分型中模棱两可结果的样本比例分别为53．88％（11110／20621）、66．43％（13697／20621）和70．95％（14630／20621），其中模棱两可等位基因对的比例分别为1．34％（277／20621）、23．30oA（4804／20621）和58．76％（12116／20621），模棱两可基因型的比例分别为52．54％（10834／20621）、56．13％（11574／20621）和59．76％（12323／20621）。15种模棱两可等位基因对的确认结果中，仅B＊07：05／07：06和DRB1＊08：03／08：14检出两种等位基因，其他13种均只检出1种等位基因。11110个HLA—A、13697个HLA-B和14630个HLA—DRB1基因的模棱两可标本中，真基因型相对概率高于95％的样本比例分别为98．27％（10918／11110）、98．46％（13486／13697）和99．47％（14553／14630）。其中真基因型相对概率低于50％的基因型可见于A＊01：01／11：04、A＊24：03／33：10、A＊33：01／66：01、B＊35：27／55：02、B＊38：01／78：02、B＊44：02／55：16、B＊53：01／55：01、DRB1＊03：02／13：01、DRB1＊04：10／13：03、DRB1＊11：06／13：03和DRB1＊12：01／15：04等。从整体看，20621份HLA—A、B、DRB1基因的PCR—sBT分型数据中，在不进行任何附加实验的情况下，仅根据基因型相对概率直接确定模棱两可标本基因分型结果的准确性均超过了98％，分别为99．07％（20429／20621）、98．98％（2041; 程良红邹红岩金士正李桢高素青王大明何柳媚朱为刚; 关键词：人类白细胞抗原

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