刘科
- 作品数：4 被引量：9H指数：2
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- PCR-RFLP技术在狂犬病诊断中的应用
- 2005年
- 从病犬脑组织中抽提出RNA,利用引物N 1/N 2,扩增出1513 bp的目的片段,通过SphⅠ和Sa lⅠ两种酶对扩增产物酶切,得到3个预期片段,经PCR-RFLP方法确诊病犬患有狂犬病。
- 熊毅朱伟刘科刘棋李华明温丽霞甘海霞
- 关键词：PCR狂犬病
- 狂犬病PCR-RFLP快速诊断方法的研究被引量：1
- 2006年
- 从犬脑组织中提取总RNA,利用设计的一对引物N1/N2,扩增出1513bp的目的片段,通过SphI和SalI两个酶对扩增产物进行酶切,得到了457bp、833bp、233bp大小的3个预期片段,从而能在8 h内快速做出正确的诊断。试验表明,用该技术检测狂犬病病毒灵敏度高、特异性强,适合于实验室应用。
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- 关键词：狂犬病PCRRFLP
- 狂犬病套式PCR检测技术的研究被引量：3
- 2006年
- 设计两对引物M1/M2、N1/N2建立起套式PCR,该方法能检测出含0.3LD50狂犬病病毒,比普通PCR的敏感性提高了10000倍,通过27份阳性病料的序列分析,所检测出的病毒全部是狂犬病病毒,具有很强的特异性。表明套式PCR技术具有快速、敏感、特异的特点,可广泛应用于实验室狂犬病的诊断及流行病学调查。
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- 关键词：狂犬病套式PCR
- 样品中RNA酶去除试验研究被引量：5
- 2006年
- RNA酶存在于各种环境中,人和动物的唾液、汗液和血液中含有大量的RNA酶,RNA酶很容易使RNA分解,导致在RNA病毒检测中出现假阴性的结果。利用复合核苷氧钒复合物(RVC)去除样品中的RNA酶,结果表明样品中含有超过0.04 ng量的RNA酶,就会影响其检测结果;在RNA纯化时中和多余的RVC后,不影响RNA的体外转录;终浓度为10 mmol/L的RVC可以抑制40μg RNA酶的作用。该方法操作简便,需时较短,成功解决了RNA抽提中RNA酶的干扰,非常适合于实验室使用。
- 熊毅朱伟刘棋郭建刚李华明刘科
- 关键词：RNA酶
