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吉鹏飞
作品数:
1
被引量:1
H指数:1
供职机构:
浙江大学生命科学学院生物化学研究所
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相关领域:
生物学
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合作作者
周亮
浙江大学生命科学学院生物化学研...
龚兴国
浙江大学生命科学学院生物化学研...
鲍文娜
浙江大学生命科学学院生物化学研...
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浙江大学生命科学学院生物化学研...
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2012
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人乙醇脱氢酶ADH1B2在毕赤酵母中的表达及活性分析
被引量:1
2012年
根据GeneBank中人乙醇脱氢酶ADH1B2基因序列设计引物,以人肝脏总RNA为模板,反转录获得人乙醇脱氢酶基因.将克隆基因与表达载体pPICZB连接,测序正确的pPICZB-ADH1B2电转化毕赤酵母GS115;重组毕赤酵母工程菌经0.5%(v/v)甲醇诱导72h后目的蛋白以可溶形式表达,经DEAE-Sepharose FF纯化后蛋白酶活性可达8 000U.mg-1.同时构建重组质粒pCDNA3.1-ADH1B2转染HepG2人肝癌细胞,发现细胞内ROS/GSH水平降低,Akt磷酸化水平降低,细胞活性下降.为临床酒精中毒预防和治疗药物的研发以及ADH在肝脏肿瘤方面的研究提供了理论基础.
汤甜甜
周亮
吉鹏飞
鲍文娜
龚兴国
关键词:
乙醇脱氢酶
毕赤酵母
AKT
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