周亚锋
- 作品数：5 被引量：2H指数：1
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 血管内皮祖细胞用于构建血管新生的体外三维模型被引量：2
- 2009年
- 目的采用血管内皮祖细胞(EPCs)体外构建血管新生的三维模型,证实体外获得的EPCs参与血管新生。方法(1)密度梯度离心法获取兔外周静脉血的单个核细胞,贴壁筛选法分离EPCs,于添加了Singlequotes的EBM-2培养液中扩增,对培养14 d的细胞进行免疫荧光及免疫组织化学鉴定;(2)用上述同样的方法获取EPCs,并接种于Matrigel三维基底膜胶,Singlequotes诱导,倒置相差显微镜观察血管形成。结果(1)培养7～9 d,光电显微镜可见细胞集落形成,呈现干细胞特性;贴壁细胞表达血管性假血友病因子(v WF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2)和血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin),呈现内皮细胞系特征;贴壁细胞用碳化青染料(DIL)标记的乙酰化低密度脂蛋白(DIL-ac-LDL)及FITC标记的I型荆豆凝集素(FITC-UEA-1)双荧光阳性,显现EPCs的生物学特性;(2)动态观察:培养2周左右,在三维胶体中形成血管结构。结论外周血来源的EPCs,经过体外诱导后,具有成血管能力,可应用于制备体外血管新生的三维模型。
- 吕海涛韩莲花程铖李红霞周亚锋杨向军
- 关键词：内皮祖细胞血管新生三维模型
- 5-氮胞苷体外诱导猪骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞
- 目的建立猪骨髓间充质干细胞(MSC)体外转化为心肌样细胞的方法,为构建生物起搏细胞提供新材料。方法传2代的猪骨髓间充质干细胞培养第3天,加入5-氮胞苷(5-aza)至终浓度为10μmol/L。2～3周后,Giemsa染色...
- 周亚锋杨向军李红霞蒋文平
- 文献传递
- HCN4慢病毒转染基质干细胞构建起搏样细胞的体外研究
- 目的使用hHCN4重组慢病毒载体转染心肌样骨髓基质干细胞获得稳定过表达HCN4基因的起搏样干细胞。方法慢病毒转染心肌样骨髓基质干细胞实验过程参照SBI的Lentivector Expression System的操作手册...
- 周亚锋杨向军李红霞蒋文平
- 文献传递
- 稳定转染hHCN4起搏通道亚型的电生理特点
- 目的全细胞膜片钳技术记录稳定转染pCDH1-GFP-HCN4的心肌样骨髓基质干细胞,了解hHCN4起搏通道亚型的电生理特点。方法全细胞膜片钳技术记录稳定转染pCDH1-GFP-HCN4的心肌样骨髓基质干细胞,观察hHCN...
- 周亚锋杨向军李红霞蒋文平
- 文献传递
- 起搏基因HCN4慢病毒载体的构建
- 目的将全长约3.6 kb的hHCN4目的基因片段从pCDNA3-hHCN4质粒卸载下来,最终装载到带有GFP荧光标记的去内毒素穿梭质粒pCDH1-MCS1-EF1-copGFP上。使用慢病毒包装系统(pPACKH1-Le...
- 周亚锋杨向军李红霞蒋文平
- 文献传递
