孔庆暖
- 作品数：33 被引量：68H指数：5
- 供职机构：青岛市市立医院更多>>
- 发文基金：青岛市公共领域科技支撑计划项目青岛市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用荧光定量RT-PCR法检测mdr-1基因的表达
- [目的]建立用实时荧光定量RT—PCR法在mRNA水平上检测肿瘤细胞中多药耐药基因(mdr-1基因)表达的方法，实现对肿瘤细胞中mdr-1mRNA快速，准确的检测，对临床治疗和肿瘤预后判断提供辅助手段。
[材料...
- 孔庆暖
- 关键词：多药耐药基因荧光定量PCR重组质粒
- 文献传递
- 4-AP对小鼠恐惧记忆形成的影响
- 2014年
- 目的了解4-氨基吡啶(4-AP)对成年及老年C57Bl6J野生型小黑鼠条件性恐惧记忆形成的影响及其可能机制。方法采用场景前置性条件恐惧记忆测试、条件性场景恐惧记忆测试及条件性声音恐惧记忆测试3种行为学模型,检测老年及成年C57Bl6J野生型小鼠急性腹腔注射4-AP(1mg/kg)后对各场景恐惧反应,以生理盐水腹腔注射作为对照组,用僵直时间占总测试时间的百分比(僵直时间%)来表示小鼠的恐惧程度。结果在场景前置性条件恐惧记忆测试中,足底电击24h后,老年小鼠和成年小鼠的僵直时间%差异有显著性(t=3.32,P<0.01);4-AP急性腹腔注射后,对照组和实验组老年小鼠的僵直时间%差异有显著性(t=2.94,P<0.05),对照组和实验组成年小鼠僵直时间%差异无显著性(P>0.05)。在条件性场景恐惧记忆测试及条件性声音恐惧记忆测试中,4-AP急性腹腔注射后,在短期恐惧记忆(30min)及长期恐惧记忆(24h)测试中,对照组和实验组老年小鼠的僵直时间%差异无显著性(P>0.05)。结论老年小鼠不能形成对场景前置的恐惧记忆,应用4-AP可在一定程度上改善衰老引起的认知障碍。
- 于明姜艳山邱轩孔庆暖周宇
- 关键词：4-氨基吡啶衰老记忆
- HCN2基因和ANK2基因在心源性猝死病人窦房结细胞的表达变化被引量：4
- 2017年
- 目的探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道2蛋白(HCN2)和细胞膜锚蛋白(ANK2)在心源性猝死(SCD)病人窦房结的表达水平。方法收集因心源性疾病猝死的个体心脏14例作为SCD组;选择无心脏疾病的死亡个体心脏标本13例作为非SCD组。准确切取心脏窦房结组织,石蜡包埋,部分HE染色,采用免疫组织化学的方法分别测定两组HCN2和ANK2蛋白表达水平。结果 SCD组HCN2在窦房结组织中呈棕黄色颗粒,非均质分布在核旁;SCD组ANK2稀疏分布于窦房结细胞浆内。同非SCD组相比,SCD组HCN2蛋白表达水平上调和ANK2蛋白表达水平下调(0.29±0.03vs 0.16±0.07;0.09±0.06vs 0.23±0.06,P均<0.05)。结论 SCD患者窦房结HCN2基因表达水平上调,ANK2基因表达水平下调。
- 王菲菲王学淳孔庆暖张七一张海涛黄维清
- 关键词：心脏猝死窦房结
- 液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片方法学的建立及免疫组化染色应用被引量：3
- 2015年
- 目的应用液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片,以期建立更加简单直观且能够与分子生物学相结合的外周血淋巴细胞形态学检查方法。方法利用Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离外周血淋巴细胞,液基细胞保存液中过夜保存,液基薄层涂片技术制作细胞涂片,并通过SP免疫组化染色观察T淋巴细胞及B淋巴细胞表面抗原CD3和CD20在涂片淋巴细胞中的表达,并通过表达部位获取两种抗原的免疫表型保存情况。结果对5名健康者外周静脉血制作淋巴细胞涂片,淋巴细胞获得率达95%以上,形态保存完好,SP免疫组化法显示,CD3和CD20抗原均清晰表达在相应淋巴细胞亚群的细胞膜上,通过免疫组化法计数的淋巴细胞亚群比例和文献结果相一致。结论与传统外周血手工涂片相比,液基薄层制片技术制作外周血淋巴细胞涂片可快速有效地应用于外周血淋巴细胞形态学观察和免疫组化染色,对临床淋巴细胞亚群分类、淋巴瘤分型及预后判断有重要的应用价值。
- 孔庆暖王丽娜韩增磊黄维清
- 关键词：外周血淋巴细胞免疫组化
- 肺癌患者外周血中 MDR －1及 MRP 基因在化疗前后的表达及意义被引量：6
- 2015年
- 目的：探讨肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞中多药耐药基因（ MDR－1）和多药耐药相关蛋白（ MRP）的表达及意义。方法分别于化疗开始前及化疗周期结束后第3周收集肺癌患者外周血标本。采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测39例肺癌患者外周血中MDR－1mRNA和MRP mR-NA的表达情况，并与20例健康体检者进行对比。结果病例组化疗前MDR－1 mRNA和MRP mRNA的阳性表达率与健康对照组相比差异没有统计学意义（P＞0．05）；各种病理类型的肺癌患者外周血MDR－1mRNA和MRP mRNA的阳性表达水平随着化疗次数的增多而增强，其中小细胞肺癌患者化疗后MDR－1 mRNA和MRP mRNA的表达水平均高于化疗前，差异具有统计学意义。结论化疗可诱导肺癌患者外周血淋巴细胞MDR－1mRNA和MRP mRNA的表达水平增强；应用外周血评估MDR－1mRNA和MRP mRNA的方法简单可靠，创伤性小，可能成为预估肺癌患者化疗疗效的有效指标。
- 孔庆暖傅兴宁丁晓燕纪霞黄维清
- 关键词：外周血多药耐药基因多药耐药相关蛋白
- DNA甲基转移酶在胚胎停育绒毛组织中的表达差异及临床意义
- 2016年
- 目的:探讨胚胎停育绒毛组织中DNA甲基转移酶(DNMTs)4种亚型DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3L的mRNA及蛋白表达差异,并探讨其临床意义。方法:随机选取2013年1月-2014年6月在青岛市立医院妇产科门诊就诊的经B型超声(B超)证实为胚胎停育而行清宫术的40例患者为观察组,并选取同期正常早孕要求人工流产的40例患者为对照组。1采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)方法检测2组患者绒毛组织中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3L mRNA的表达量;2用免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法(SP法)及蛋白质印迹法(Western blot)检测DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3L蛋白在观察组和对照组患者绒毛组织中的表达部位及定量差异。结果:1qRT-PCR结果显示,2组患者绒毛中DNMT1、DNMT3A、DNMT3B和DNMT3L mRNA的表达量比较差异无统计学意义(P>0.05);2免疫组化结果显示,DNMT1、DNMT3A、DNMT3B与DNMT3L在2组绒毛滋养细胞的细胞核或细胞质呈不同程度的阳性染色,同时,半定量分析结果显示观察组的DNMT3A蛋白表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3Western blot分析结果显示,观察组患者绒毛中DNMT3A蛋白的相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);4胚胎停育绒毛组织中DNMT3A蛋白的表达量与DNMT1、DNMT3B和DNMT3L蛋白表达量之间无明显关联(均P>0.05)。结论:胚胎停育绒毛组织中,DNMT3A蛋白水平的低表达可能参与了胚胎停育的发病机制。
- 郭为伟高静周磊黄维清孔庆暖
- 关键词：妊娠初期胎儿疾病绒毛膜绒毛
- 条件性敲除成熟海马神经元内的Dnmt3b基因对学习记忆的影响及机制研究
- 近年来大量研究表明，表观遗传修饰异常不但影响神经元的发育及突触可塑性，而且和多种认知障碍性神经精神疾病密切相关。表观遗传修饰包括DNA甲基化及去甲基化、组蛋白乙酰化、非编码microRNA干扰等多种不涉及DNA序列改变而...
- 孔庆暖
- 关键词：DNA甲基化学习记忆海马神经元动物模型
- 小细胞肺癌组织CD56、CgA、Syn及TTF-1表达及联合诊断意义被引量：6
- 2013年
- 目的研究神经细胞黏附分子(CD56)、嗜铬蛋白A(CgA)、突触素(Syn)与甲状腺转录因子-1蛋白(TTF-1)在小细胞肺癌(SCLC)中的表达,探讨其表达在SCLC中的意义及联合诊断价值。方法应用免疫组化SP法,检测CD56、CgA、Syn及TTF-1在62例SCLC及40例非小细胞肺癌(NSCLC)(包括腺癌22例,鳞癌12例,大细胞癌6例)组织中的表达,并对表达结果进行分析。结果 SCLC组织中CD56、CgA、Syn及TTF-1的阳性表达率分别为93.5%、9.7%、87.1%、80.6%;NSCLC组织中CD56、CgA、Syn及TTF-1的阳性表达率分别为7.5%、0、15.0%、47.5%。CD56、Syn及TTF-1在SCLC与NSCLC组织中的阳性表达率比较差异均有显著性(χ2=12.21～74.89,P<0.01);CgA在两者中的阳性表达率比较差异无显著性(P>0.05)。SCLC中4项指标的表达在不同病理学参数间差异均无显著性(P>0.05)。结论 CD56、CgA、Syn及TTF-1在SCLC与NSCLC组织中的表达存在差异,其联合检测对SCLC的诊断有重要价值。
- 张雯雯孔庆暖韩增磊卫红军陈桦黄维清
- 关键词：嗜铬蛋白A
- 一种用于胃癌治疗的含有卡培他滨的复方制剂
- 本发明涉及一种用于治疗胃癌的抗肿瘤药物制剂，其由药物组合物及药学上可接受的辅料组成，所述药物组合物由卡培他滨、橄榄苦苷和甘草素组成。所述辅料优选乳糖、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠和硬脂酸镁等。进一步地，所述药物制剂由以...
- 孔庆暖韩增磊卫红军黄维清
- 文献传递
- 人心脏传导系统离子通道分子生物学特性及相关技术的应用
- 张七一黄维清丁华民于建宪孔庆暖韩增磊刘格纪莉莎孙坤伟陈桦
- 猝死是由于潜在的疾病或功能障碍所引起的突然的意外死亡。在成人猝死的各种原因中，心血管系统疾病占首位。近年来，因传导系统异常引起的心源性猝死已经日异受到人们的关注。超极化激活阳离子电流(If)是心脏的起搏电流，是维持心脏起...
- 关键词：
- 关键词：猝死心血管系统疾病
