孙东波
- 作品数：194 被引量：515H指数：11
- 供职机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：黑龙江省高等教育教学改革工程项目国家自然科学基金黑龙江省博士后科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学文化科学生物学医药卫生更多>>
- 猪整合素β3多克隆抗体制备与鉴定
- 2016年
- 为了制备猪整合素β3多克隆抗体,试验利用大肠杆菌原核表达系统,对密码子优化的猪整合素β3基因主要抗原区进行原核表达,表达的重组蛋白纯化后,免疫Balb/c雌性小鼠,采血后分离血清,进一步通过ELISA和Western-blot对制备的猪整合素β3多克隆抗体进行鉴定。结果表明:猪整合素β3基因主要抗原区获得了成功表达,表达蛋白分子质量为102 ku左右,以纯化重组蛋白作为免疫原制备的多克隆抗体效价为1∶12 800,且能识别天然猪整合素β3。
- 高晶王志慧郭东华李春秋苏明俊王欣宇赵喜文王恩雨魏姗刘秋瑾孙东波
- 关键词：整合素Β3原核表达重组蛋白多克隆抗体病毒受体病毒感染
- 动物医学专业实验教学体系改革被引量：5
- 2018年
- 实验教学对提高学生实践动手能力具有重要作用,目前我国大多数农业院校存在实践教学资源紧张,实验教学不足以满足学生需求的问题。文章针对黑龙江八一农垦大学动物医学专业开展的实验教学改革进行了综合阐述,重点介绍了实验课程设置、课程内容调整、实验类型设计和考核方式改革等方面的一些经验与做法,同时指出了一些尚待解决的问题。在总结经验的基础上,有针对性地分析并提出了一些改革设想。
- 张旭韦春波郭景茹王建发郭东华孙东波
- 关键词：动物医学实验教学
- 奶牛腐蹄病坏死杆菌分离鉴定及白细胞毒素基因lktA1序列分析被引量：2
- 2015年
- 为分离纯化奶牛腐蹄病坏死杆菌,分析其与其他菌株的亲缘关系,本研究利用坏死杆菌白细胞毒素特异性引物,对奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品进行了PCR检测,利用厌氧培养基对PCR检测阳性样品进行了坏死杆菌的分离培养,以分离的坏死杆菌基因组DNA为模板,对白细胞毒素基因进行了克隆和序列分析。结果显示,9份奶牛腐蹄病病牛蹄部拭子样品PCR检测结果均为阳性,对其中一份样品中的坏死杆菌进行分离培养,获得了纯培养物,命名为bFR13-1。坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素基因测序结果显示,与GenBank已发表的H05、A25和B35菌株的白细胞毒素基因在核苷酸水平的同源性分别为98.40%、98.35%和90.79%,推导氨基酸的同源性分别为97.7%、97.6%和89.0%。进化树分析结果显示,坏死杆菌bFR13-1菌株白细胞毒素与H05菌株的同源性最高,bFR13-1菌株与H05菌株和A25菌株呈较近亲缘关系。结果表明,不同坏死杆菌分离株的白细胞毒素呈现一定的变异性,这种变化是否与坏死杆菌致病性相关,值得深入研究。
- 高晶李春秋姚爽张立春王欣宇王志慧赵喜文魏姗王恩雨孙东波武瑞郭东华
- 关键词：奶牛腐蹄病坏死杆菌
- A群猪轮状病毒JS株vp7基因序列分析被引量：4
- 2007年
- 根据已发表的猪轮状病毒OSU毒株vp7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计一对特异引物,以猪轮状病毒JS毒株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1000 bp目的片段。将其进行T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,vp7基因全长1062 bp,含有一个981 bp的开放阅读框,编码326个氨基酸。与已知的15个毒株vp7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,同源性分别为74.5%～78.5%和75.2%～83.1%,核苷酸系统发育进化树结果表明,JS毒株与轮状病毒G9型参考毒株ICB2185、O-1亲缘关系较近,分为一个群,表明JS毒株血清型为G9型。目前,我国尚未见猪及其它动物轮状病毒G9型流行株的报道。
- 高秀春时洪艳佟有恩吴波平孙东波白兴华陈建飞冯力
- 关键词：猪轮状病毒VP7基因
- PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定
- 以猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)S基因的免疫优势区S1(1bp～2367 bp)为靶基因，利用基于gIII表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统，构建S1基因噬...
- 孙东波朗洪武时洪艳陈建飞崔晓辰王承宝佟有恩冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白抗原表位噬菌体展示
- 猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原间接ELISA抗体检测方法的建立
- 本研究以纯化的原核表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白为诊断抗原，建立了猪传染性胃肠炎病毒抗体检测的间接ELISA诊断方法，将其命名为rnTGE-ELISA。该抗原不与其他常见10种猪病的阳性血清发生交叉反应，批内和批间重复性试...
- 孙东波陈建飞冯力时洪艳刘胜旺陈洪岩佟有恩李伟杰王明马思奇
- 关键词：重组N蛋白原核表达抗体检测ELISA诊断
- 分泌生长激素和催乳素的奶牛腺垂体细胞的分离鉴定及特征分析被引量：1
- 2016年
- 目的获得具有生长激素(growth hormone,GH)和催乳素(prolactin,PRL)分泌功能的奶牛腺垂体细胞(dairy cow anterior pituitary cells,DCAPCs),并对其进行鉴定和特征分析。方法采用免疫组织化学方法对奶牛腺垂体中GH和PRL分泌细胞进行定位,利用酶消化法对其所在部位进行消化,获得的细胞经分离培养后,用形态学方法和免疫组织化学方法进行鉴定,并分析其传代性能;采用实时荧光定量PCR及ELISA方法对其GH和PRL合成和分泌特征进行分析。结果 GH分泌细胞主要位于腺垂体侧翼区下缘,而PRL分泌细胞主要位于腺垂体侧翼区上缘。获得的DCAPCs接种培养2 d后,可见形状规则的铺路石样上皮细胞,经免疫组织化学法鉴定,可分泌GH和PRL,经多次传代后仍可表达GH和PRL,但表达水平随代次增加而降低。结论成功建立了DCAPCs分离培养方法,可用于体外研究奶牛GH和PRL合成及分泌的调控机制。
- 王建发薛琳琳吴建民吴殿君翁春玲孙东波张旭武瑞
- 关键词：奶牛生长激素催乳素
- 一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗及其制备方法
- 本发明涉及一种牛坏死杆菌的亚单位疫苗，包含牛坏死杆菌一种外膜蛋白43kDa OMP、坏死杆菌白细胞毒素截短蛋白PL‑4及坏死杆菌溶血素截短蛋白H2三种蛋白，三种蛋白的用量比为1：1：1。本发明还涉及上述牛坏死杆菌的亚单位...
- 郭东华孙东波李春秋原东伟蒋剑成贺显晶张思瑶王志慧吕思文高晶姚爽肖佳薇汪锋锋王丽娜
- PEDV S蛋白B细胞抗原表位的筛选和鉴定被引量：18
- 2007年
- 以猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)S基因的免疫优势区S1(1～2367bp)为靶基因,利用基于gⅢ表达外源多肽的fd丝状噬菌体展示系统,构建S1基因噬菌体展示肽库,以纯化病毒制备的兔抗PEDV多克隆血清为靶蛋白,对S1基因噬菌体展示肽库进行3轮生物淘选,结果获得3个高亲和力的序列,分别命名为S1P1(248～280位氨基酸)、S1P2(442～499位氨基酸)和S1P3(697～742位氨基酸).ELISA和蛋白质印迹结果显示,S1P1、S1P2和S1P3短肽都能被兔抗PEDV多克隆血清识别,其中S1P3反应性最强.为了进一步揭示S1P1、S1P2和S1P3短肽的抗原性,制备了3个短肽GST融合蛋白和它们串连后GST融合蛋白的单因子血清,间接免疫荧光试验(IFA)结果证实,抗S1P2-GST、S1P3-GST和S1P123-GST融合蛋白的单因子血清能够识别Vero细胞培养物中天然的PEDV.
- 孙东波朗洪武时洪艳陈建飞崔晓辰王承宝佟有恩冯力
- 关键词：猪流行性腹泻病毒S蛋白抗原表位噬菌体展示
- 卓越兽医人才培养改革路径思考被引量：3
- 2021年
- 为提高农业院校动物医学专业人才培养质量,笔者分析了影响卓越兽医师培养质量的因素与环节,认为专业学制、课程体系、"双师型"教学团队建设、共享实践平台和协同育人机制为影响卓越兽医人才培养的重要因素,并结合动物医学专业教学质量国家标准提出了动物医学专业的改革设想和发展思路,以期构建与新时代社会发展、区域发展相适应的卓越兽医师培养体系,促进动物医学专业教育高质量发展。
- 孙东波高利王建发张旭王春仁武瑞
- 关键词：动物医学专业教学质量标准
