孟露露 作品数:6 被引量:9 H指数:2 供职机构: 军事医学科学院 更多>> 发文基金: 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
不同靶标的噬菌体展示肽库筛选的研究新进展 被引量:2 2002年 噬菌体展示技术自建立以来 ,经过十几年的发展 ,逐渐成为一个强有力的筛选工具。用于筛选的靶标也越来越具有多样性 ,不仅是分子 ,新鲜分离或培养的细胞 ,甚至活体器官都可作为筛选的对象 。 孟露露 柳川关键词:噬菌体 随机肽库 靶标 抗A型肉毒毒素人源三结构域抗体的重组设计与表达 被引量:1 2005年 以获得的抗A型肉毒毒素人源单链抗体ScFvB17为模板 ,PCR扩增抗体ScFv基因的重链可变区 (VH)和轻链可变区 (Vκ) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,构建成三结构域抗体分子 :VH_连接肽_Vκ(VH Vκ)。重组VH Vκ抗体分子在大肠杆菌中得到高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 34%以上。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,采用镍柱金属鏊合层析法对该包含体进行纯化 ,得到了纯度高达 95 %的VH Vκ。ELISA等实验结果显示 ,重组设计并制备的三结构域抗体蛋白VH Vκ不但可以特异识别毒素抗原 ,具有与原母本单链抗体ScFv相同的抗原特异性 ,而且具有了更高的相对亲和力和稳定性。 王慧 荫俊 史晶 孟露露 李佩真关键词:A型肉毒毒素 中和活性 基于表位预测的抗B型肉毒毒素基因工程抗体的研究 肉毒神经毒素/(Clostridium botulinum neurotoxins BoNT/)是由肉毒梭菌产生的目前已知毒力最强的毒素蛋白。成熟的毒素分子是由二硫键连接的重链与轻链组成。现有的研究证明BoNT的重链可诱... 孟露露关键词:肉毒毒素 表位 噬菌体展示 中和抗体 文献传递 抗A型肉毒毒素人源单链抗体融合蛋白的重组设计 被引量:3 2005年 以获得的抗A型肉毒毒素单链抗体为模板,进行融合改构,将人IgG1的Fc片段连接到ScFv的C端,在大肠杆菌中实现抗体融合蛋白ScFv-Fc的表达,表达量30%以上,蛋白以包含体形式存在,经过体外变复性的抗体融合蛋白ScFv-Fc,进行Protein G Sepharose柱亲和层析纯化,纯度达90%~95%.体外活性检测结果表明,重组抗体融合蛋白ScFv-Fc可以特异结合A型肉毒类毒素抗原,其相对亲和力近似于母本单链抗体,其稳定性高于母本单链抗体. 王慧 史晶 孟露露 李佩真 白瑜 荫俊关键词:A型肉毒毒素 稳定性 肉毒神经毒素的作用机制及研究进展 被引量:1 2005年 肉毒神经毒素(botu linum neurotoxins,BoNTs)是目前已知的毒力最强的毒素蛋白,它通过与神经肌肉接头处的神经元上的受体结合,抑制神经递质释放而引起松弛性麻痹,进而导致生物体死亡,是重要的生物恐怖剂之一。研究BoNT的作用机制,获得具有中和活性的保护性抗体,对肉毒毒素中毒的防治具有重要意义。本文就BoNT的作用机制及近年来的研究进展作一综述。 孟露露 荫俊关键词:肉毒神经毒素 神经递质 突触小泡 B型肉毒毒素重链抗原表位的预测及表位合成肽抗原性的检测 被引量:1 2006年 目的:预测B型肉毒毒素蛋白抗原表位,研究表位合成肽的生物学活性。方法:利用生物信息学,结合Anthwine分析软件及网络平台,预测B型肉毒毒素蛋白重链的B细胞抗原表位。人工合成4条(P1,P2,P3,P4)表位多肽,与抗B型肉毒毒素类毒素的马血清反应;采用腹腔注射的方式用合成肽免疫BALB/c小鼠,检测免疫血清与合成肽的结合;对免疫小鼠腹腔注射B型肉毒毒素。结果:合成的多肽能与抗B型肉毒毒素的类毒素的马血清结合;多肽免疫小鼠后能产生针对多肽的抗体,其中P1、P3、P4产生的抗体对受毒素攻击的小鼠具有保护作用。结论:成功预测了抗原表位,合成的表位多肽具有较好的抗原性。 孟露露 荫俊 王慧 史晶 侯晓军关键词:肉毒毒素 表位 合成肽