张农山
- 作品数：59 被引量：282H指数：12
- 供职机构：江苏省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省中医药领军人才培养项目江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学经济管理更多>>
- 桂枝调节RIPK1/RIPK3信号通路干预KOA小鼠软骨坏死性凋亡
- 2024年
- 目的 基于RIPK1/RIPK3信号通路探讨桂枝治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis, KOA)小鼠软骨细胞坏死性凋亡的作用机制。方法 选取48只雄性C57小鼠,随机分为空白组、造模组、Nec-1组[5 mg/(kg·d),腹腔注射给药]、桂枝低剂量组[0.43 g/(kg·d),灌胃给药]、桂枝中剂量组[0.65 g/(kg·d),灌胃给药]、桂枝高剂量组[2.6 g/(kg·d),灌胃给药]。除空白组外均采用内侧半月板失稳法构建KOA小鼠模型,经药物干预28 d后,取小鼠血清及软骨组织,采用HE染色及番红O-固绿染色观察小鼠膝关节组织病理形态;免疫荧光分析小鼠软骨RIPK3表现情况;使用qRT-PCR及Western Blot检测RIPK1、RIPK3、p-RIPK1、p-RIPK3等相关mRNA及蛋白表达;使用ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量。结果 与正常组相比,造模组小鼠关节软骨边缘严重破坏,RIPK1、RIPK3、p-RIPK1、p-RIPK3的mRNA及蛋白表达明显升高(P<0.05),TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显升高(P<0.05);桂枝低剂量、中剂量、高剂量组及Nec-1组软骨结构趋于正常,RIPK1、RIPK3、p-RIPK1、p-RIPK3的mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显降低(P<0.05)。结论 桂枝可以通过调节RIPK1/RIPK3信号通路,抑制膝关节软骨细胞坏死性凋亡,从而改善小鼠膝关节炎症环境,延缓KOA病理进程。
- 苏子珊陈拓廖太阳于利凯田地王培民张农山
- 关键词：桂枝软骨细胞膝骨关节炎信号通路
- 黄芪注射液对体外培养嗅鞘细胞增殖及其分泌神经营养因子的影响被引量：4
- 2010年
- 背景:单独黄芪注射或嗅鞘细胞移植均可促进多种神经元的存活及脊髓损伤后神经功能的恢复,若联合嗅鞘细胞移植和中药黄芪注射液治疗脊髓损伤,是否可达到更好临床效果?目的:观察黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖及其分泌神经营养因子的影响。方法:分离培养新生24h内SD大鼠嗅鞘细胞并纯化,采用免疫组织化学方法鉴定。取培养至第8天的嗅鞘细胞,种植于多聚赖氨酸包被的96孔板,置于37℃、体积分数5%CO2培养箱饥饿24h后,加入2mg/L,20mg/L,200mg/L,2g/L,20g/L黄芪注射液作用24h,采用MTT法和流式细胞仪检测黄芪注射液对嗅鞘细胞增殖的影响;采用ELISA法测定培养上清中胶质细胞源性神经营养因子的水平。以血清培养液组为阴性对照。结果与结论:与阴性对照组比较,2,20mg/L质量浓度黄芪注射液可明显促进嗅鞘细胞增殖(P<0.05,P<0.01);不同质量浓度黄芪注射液均增加嗅鞘细胞G1细胞比例,减少S、G2期细胞所占比例,但差异无显著性意义(P>0.05),但各质量浓度黄芪注射液均显著减少嗅鞘细胞凋亡数量(P<0.05);2mg/L质量浓度黄芪能对嗅鞘细胞分泌胶质细胞源性神经营养因子有显著的促进作用。结果说明黄芪注射液可协同嗅鞘细胞促进脊髓损伤的恢复。
- 王培民李剑锋张农山张旭
- 关键词：嗅鞘细胞神经营养因子干细胞神经干细胞
- 三色散干预滑膜巨噬细胞焦亡影响背根神经节TRPA1治疗KOA疼痛的离体研究被引量：4
- 2022年
- 目的探讨滑膜巨噬细胞焦亡对背根神经节神经元细胞(DRG)膜上瞬时受体电位TRPA1的影响及三色散的干预作用。方法提取ICR小鼠滑膜巨噬细胞,用1μg/mL的脂多糖(LPS)以模拟KOA的炎症微环境;采用CCK-8法检测三色散水提物冻干粉对滑膜巨噬细胞的增殖活性,确定对细胞无毒性的干预浓度;滑膜巨噬细胞分组为正常组、LPS组、三色散组,Western blot法检测滑膜巨噬细胞焦亡相关NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达;qRT-PCR检测滑膜巨噬细胞NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达;ELISA检测炎症细胞因子(IL-1β和IL-18)水平;提取ICR小鼠DRG细胞,将上述三组细胞上清加入DRG细胞中,另增设一组加入LPS及TRPA1抑制剂,DRG分组为正常上清干预组(A组)、LPS上清干预组(B组)、三色散上清干预组(C组),LPS+TRPA1抑制剂组(D组);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光鉴定提取的DRG神经元细胞;Western blot法及qRT-PCR检测TRPA1蛋白及基因表达;ELISA检测疼痛因子(CGRP和SP)水平;实时荧光钙成像观察各组DRG神经元细胞钙离子内流情况。结果确定100μg/mL三色散水提冻干粉对滑膜巨噬细胞无明显细胞毒性;LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β、IL-18基因表达显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);LPS组细胞上清中IL-1β和IL-18表达量显著高于正常组,低于三色散组(P<0.05);βⅢ-tubulin及GFAP免疫荧光显示提取的DRG神经元细胞胞体呈圆形或椭圆形,可见神经元之间的轴突呈大量增加,形成稀疏网络状结构;三色散水提冻干粉干预后可抑制B组瞬时受体电位TRPA1蛋白及基因表达水平的上升(P<0.05),降低B组细胞上清中CGRP和SP表达量;实时荧光钙成像分别观察20、40和60 s的荧光强度发现:B组荧光强度较A组增加(P<0.05),C组及D组荧光强度较B组降低(P<0.05)。结论滑膜巨噬细胞焦亡激活DRG膜上TRPA1离子通道
- 杨楠廖太阳张力张皞晟李晓辰王培民张农山
- 关键词：背根神经节疼痛
- 一种治顽固性痹痛的沐足洗剂及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种治顽固性痹痛的沐足洗剂及其制备方法和应用，该沐足洗剂包括以下重量份比例的原料：海桐皮3‑7份，伸筋草3‑7份，透骨草3‑7份，威灵仙2‑5份，桂枝2‑5份，桑枝3‑9份，艾叶3‑9份，防风2‑5份，红花4...
- 王培民茆军张农山刘志辉黄正泉张立
- 文献传递
- 补肾通络方对骨质疏松斑马鱼效应评价及破骨细胞自噬机制被引量：18
- 2020年
- 目的:评价补肾通络方对斑马鱼骨质疏松模型的干预效应,并明确其对破骨细胞分化的自噬调控机制。方法:选取新生3 d健康斑马鱼幼鱼260尾,25 mmol·L-1泼尼松龙(Pred)干预3 d,通过钙黄绿素染色确认建模成功,分为空白组,Pred组(25 mmol·L-1),依替磷酸二钠组(300 mg·L-1),补肾组(180 mg·L-1),通络组(30 mg·L-1)和补肾通络组(210 mg·L-1)各40尾。药物干预4 d后采用钙黄绿素染色后拍照,统计斑马鱼脊椎骨荧光面积;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测斑马鱼碱性磷酸酶(ALP),骨形态发生蛋白-2b(BMP-2b),Runt相关转录因子2(Runx2),组织蛋白酶K(CTSK),抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)及活化T细胞核因子(NFATC-1)mRNA表达。培养RAW264.7细胞至80%~90%密度后分为空白组,Rankl诱导组(10μg·L-1),补肾组(180 mg·L-1),通络组(30 mg·L-1)和补肾通络组(210 mg·L-1)。经Rankl诱导细胞破骨分化及药物干预4 d后,采用FITC标记鬼笔环肽染色检测肌动蛋白环表达,Real-time PCR检测RAW264.7细胞TRAP,CTSK和自噬相关基因5(ATG5),自噬相关基因7(ATG7),泛素结合蛋白62(p62)mRNA表达。结果:在体内研究中,与空白组比较,Pred组斑马鱼椎骨面积及ALP,BMP-2b,Runx2表达显著下降(P<0.01),CTSK,TRAP,NFATC-1表达显著升高(P<0.01)。与Pred组比较,通络组椎骨面积明显增加(P<0.05),而补肾通络组椎骨面积显著增加(P<0.01),补肾组,通络组及补肾通络组ALP,BMP-2b,Runx2表达均显著升高(P<0.01),补肾通络组CTSK,TRAP,NFATC-1表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。体外研究显示,与空白组比较,Rankl诱导组肌动蛋白环数目显著增多(P<0.01),CTSK,TRAP和ATG5表达显著升高(P<0.01),ATG7,p62表达明显升高(P<0.05)。与Rankl诱导组比较,补肾组、通络组及补肾通络组均明显减少了肌动蛋白环数目及CTSK,TRAP表达(P<0.05,P<0.01),而补肾通络组同时降低了ATG5,ATG7,p62表达(P<0.05,P<0.01)。结论:补肾通络方能够显著改善泼尼松龙诱导的斑马鱼骨质疏�
- 谭登张玉张农山刘军万仕炜韩龙方彭华闵文
- 关键词：斑马鱼骨质疏松补肾通络方破骨细胞自噬
- NLRP3炎症小体在KOA发病机制中的作用研究被引量：9
- 2021年
- NLRP3炎症小体参与多种关节炎发病机制,而膝骨关节炎被认为是一种炎症性疾病,二者的相关性得到越来越多的关注。NLRP3炎症小体的装配及激活产生大量促炎因子及降解酶,导致软骨破坏、滑膜炎症及疼痛发生。本综述将汇总NLRP3炎症小体通路参与膝骨关节炎的相关证据及在骨关节炎病理中的作用,旨在加强对KOA疾病的管理,为KOA的诊断、防治和管理提供新的方向。
- 廖太阳王培民张农山吴鹏丁亮
- 关键词：膝骨关节炎软骨破坏滑膜炎症疼痛
- 一种具有抗高血压作用的组合物及其应用
- 本发明公开了一种具有抗高血压作用的组合物及其应用，它由Tabernemontanine和Helenalin组成。本发明根据高血压的发病机制，在中医药理论的指导下，辨证论治通过大量实验筛选中药单体组方及其用量配比，实验结果...
- 方祝元蒋卫民吴磊王琼张思奇张农山
- 文献传递
- 一种用于骨关节炎抗炎镇痛的中药组合物及其凝胶贴膏剂
- 本发明公开了一种用于骨关节炎抗炎镇痛的中药组合物及其凝胶贴膏剂，包括蔓荆子15～18份、紫荆皮15～18份、当归3～5份、木瓜3～5份、丹参3～5份、赤芍3～5份、白芷3～5份、片姜黄3～5份、独活3～5份、羌活3～5份...
- 王培民茆军刘子修张农山张立邢润麟黄正泉刘史佳
- 文献传递
- 基于thermoTRP离子通道所介导冷刺激痛敏对膝骨关节炎寒性痹痛机制的研究
- 目的：基于膝骨关节炎大鼠冷缩足潜伏期和冷刺激敏感通道蛋白TRPA1和TRPM8在患膝滑膜组织的表达变化,阐述膝骨关节炎虚寒冷痛的形成原理.
方法：健康4月龄SD雄性大鼠45只,体重440-470g,随机分成模型...
- 邢润麟王培民茆军张农山赵凌睿李晓辰
- 关键词：膝骨关节炎
- 水杨酸在不同血浆中的蛋白结合率测定被引量：1
- 2014年
- 目的研究水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。方法采用平衡透析法,以高效液相色谱法对透析内液与外液中水杨酸的含量进行测定,计算水杨酸与大鼠、比格犬和人的血浆蛋白结合率。结果水杨酸低、中、高(0.6,1,3μg/ml)3个浓度的大鼠血浆蛋白结合率分别为(91.1±1.4)%,(90.2±2.5)%,(90.7±3.1)%;比格犬血浆蛋白结合率分别为(82.5±2.1)%,(81.3±1.8)%,(83.1±2.3)%;人血浆蛋白结合率分别为(96.5±2.7)%,(97.2±3.0)%,(96.4±1.6)%。结论水杨酸与血浆蛋白具有高强度的结合,其中与人血浆中的蛋白结合较强,且人>大鼠>比格犬。
- 张农山张立王培民
- 关键词：水杨酸血浆蛋白结合率平衡透析法
