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张景
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1
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供职机构:
第四军医大学西京医院
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发文基金:
国家自然科学基金
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相关领域:
医药卫生
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合作作者
袁建林
第四军医大学西京医院
武国军
第四军医大学西京医院
张瑞
第四军医大学西京医院
高磊
第四军医大学西京医院
王禾
第四军医大学西京医院
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2013
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慢病毒介导的N-myc下游调节基因-2对肾癌细胞株786-0增殖及细胞周期素D1、p21表达的影响
2013年
目的观察N—myc下游调节基因-2(NDRG2)对肾癌细胞株786—0增殖及细胞周期素(Cyclin)D1、p21表达的影响。方法以携带人NDRG2基因的慢病毒载体感染体外培养的肾癌细胞株786-O。采用间接免疫荧光实验检测慢病毒感染后细胞中NDRG2的过表达。Westernblot检测CyclinD1、p21的表达变化,通过细胞生长实验、平板克隆实验检测NDRG2对786一O细胞增殖能力的影响。流式细胞仪检测感染前后细胞的凋亡。结果786一O细胞经慢病毒感染后NDRG2蛋白表达水平明显增加。Westernblot实验显示慢病毒感染后细胞中CyclinD1表达明显降低;而p21表达明显增加。噻唑蓝(MTT)比色(抑制率12h为3.96%,24h为4.78%,36h为9.32%,48h为20.27%,60h为22.85%,72h为30.86%)显示NDRG2对786—0细胞的生长有明显抑制作用。平板克隆实验(3组分别为67.1%、65.5%和41.7%)显示lenti—NDRG2组786—0细胞的克隆形成能力明显降低。流式细胞术显示lenti-NDRG2组细胞凋亡率为(17.20±1.44)%,明显高于对照组[(6.30±0.46)%,t=12.49,P〈0.01]和lenti—mCherry组[(6.00±0.31)%,t=13.17,P〈0.01]。结论通过慢病毒载体使786-O细胞表达NDRG2基因,可以明显抑制细胞的增殖,并可降低CyelinD1表达,同时增加p2l的表达。
高磊
张景
张瑞
袁建林
武国军
王禾
关键词:
肾癌
细胞周期
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