张桂荣
- 作品数:8 被引量:37H指数:4
- 供职机构:华中农业大学更多>>
- 发文基金:武汉市科技攻关计划项目国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 牛结核病特异抗体间接ELISA检测方法的建立及初步应用
- 牛结核病主要是由牛分枝杆菌/(Mycobacterium bovis/)引起的一种人兽共患传染病。该病呈慢性经过,主要经呼吸道和经口感染。排菌的重症病牛是本病的主要传染源。该病在世界各国都有发生,尤其是近年来,随着结核菌...
- 张桂荣
- 关键词:牛结核特异抗原TST
- 文献传递
- 白菜和甘蓝型油菜与菘蓝体细胞杂种后代的遗传分析
- 异附加系是研究物种进化、基因互作及基因表达、染色体组间亲缘关系的重要遗传材料。十字花科菘蓝族的菘蓝(Isatis indigotica Fort.,2n=14,Ⅱ)为二年生植物,是我国广泛栽培的药用植物及染料植物,为油菜...
- 张桂荣
- 关键词:甘蓝型油菜菘蓝异附加系减数分裂原位杂交花粉育性
- 文献传递
- 牛结核菌素酶联免疫吸附反应方法用于诊断奶牛结核病的研究
- 牛结核病是由牛分枝杆菌和结核分枝杆菌所引起的一种人畜共患、慢性、消耗性传染病,该病被国际兽疫局(OIE)列为B类动物疫病。牛结核病的存在不仅严重影响牛奶业的经济发展,而且由于人类可通过与病牛的接触或饮用污染的牛奶而被感染...
- 张桂荣陈颖钰钦博万学济陈焕春谭亚娣
- 间接ELISA检测牛分支杆菌抗体方法的建立及初步应用
- 针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,用基因工程方法表达的牛分支杆菌特异性抗原MPB83,MPB70和CFP1O与ESAT-6的融合蛋白(CFP10-ESAT-6)建立了检测牛分支杆菌特异抗体的间...
- 张桂荣谭亚娣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春
- 关键词:牛结核病结核分支杆菌特异性抗原间接ELISA检测
- 文献传递
- 间接ELISA检测牛分枝杆菌抗体方法的建立及初步应用被引量:9
- 2007年
- 针对现行牛结核病检疫方法结核菌素皮内变态反应(TST)的不足,本研究选用牛分枝杆菌特异性抗原MPB83、MPB70及CFP10与ESAT-6融合蛋白(CFP10-ESAT-6)分别建立了检测牛分枝杆菌特异抗体的间接酶联免疫吸附方法(ELISA)。上述3种抗原中一种以上抗原的特异性抗体为阳性时,即可判断为结核检测阳性。以TST为标准,判断ELISA方法的敏感性与特异性。结果证明,ELISA方法具有较好的敏感性(71.4%)。对ELISA检测为强阳性的奶牛进行细菌分离,并对5头结核菌分离阳性奶牛进行TST检测,结果有3头为TST阳性,2头可疑,显示出ELISA方法对严重感染牛的检测较TST具有更高的敏感性。由于TST与ELISA分别以细胞免疫与体液免疫为基础,两种检测方法结合应用可进一步提高牛结核病的检出率。
- 张桂荣万学济陈颖钰吴波晁彦杰吕文钦博郭爱珍陈焕春谭亚娣
- 关键词:牛分枝杆菌ELISAMPB70检疫
- BSA对牛结核抗体ELISA检测的影响被引量:4
- 2007年
- 分别研究了封闭液、血清稀释液及酶标二抗稀释液中BSA成分对牛结核抗体ELISA检测的影响。结果显示,酶标二抗稀释液中BSA的存在使ELISA检测值普遍偏低,且BSA的含量越高,检测值越低;为了提高ELISA检测值,使其达到理想检测效果,必须提高酶标二抗的使用浓度。BSA中可能存在的牛血清抗体杂质对酶标二抗起到了“中和”作用,降低了酶标二抗与目标抗体结合的实际浓度,使检测结果普遍偏低。
- 吴庆儒郭定宗张桂荣李文波
- 关键词:牛血清白蛋白酶联免疫吸附试验
- 牛IFN-γ原核表达、单克隆抗体制备及其ELISA检测方法的建立被引量:22
- 2007年
- 实验旨在建立牛重组IFN-γ(BovIFN-γ)的ELISA检测技术,为牛传染病的免疫学诊断提供新方法。PHA刺激体外培养的奶牛外周血白细胞,从培养细胞中提取总RNA,经过RT-PCR扩增出BovIFN-γ基因cDNA,进一步克隆至pET28a,转化大肠杆菌,经IPTG诱导,表达出预期大小(18kD左右)组氨酸标记蛋白,经鉴定为BovIFN-γ;以纯化的重组BovIFN-γ为免疫原,应用淋巴细胞杂交瘤技术,获得4株能稳定分泌抗BovIFN-γ单克隆抗体的细胞株,分别命名为A7、A10、G6与G10。免疫球蛋白亚类鉴定证明杂交瘤细胞所分泌的抗体均为IgG1,腹水效价在1:2^10×100~1:2^11×100之间。Western-blot分析显示,4株单抗均能特异性结合重组BovIFN-γ。ELISA试验表明,4株单抗只与融合蛋白BovIFN-γ反应,而不与非相关性蛋白Ag85B、ESAT-6-CFP-10、GM-CSF等发生反应。选取A10细胞株分泌的单克隆抗体、纯化的多克隆抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗免IgG,建立了检测BovIFN-γ的双抗体夹心ELISA方法。实验结果表明,此方法检测敏感性达到2ng/mL,特异性良好,为进一步建立灵敏、特异的病原感染诊断方法奠定了基础。
- 李川谭亚娣陈颖钰胡巧云马艳张桂荣钦博晁彦杰陈焕春郭爱珍
- 关键词:单克隆抗体ELISA克隆
- BSA对牛结核抗体ELISA检测的影响被引量:1
- 2007年
- 分别研究了封闭液、血清稀释液及酶标二抗稀释液中BSA成分对牛结核抗体ELISA检测的影响。结果显示酶标二抗稀释液中BSA的存在使ELISA检测值普遍偏低,且BSA的含量越高,检测值越低;结果提示,为了提高ELISA检测值,使其达到理想检测效果,必须提高酶标二抗的使用浓度。结论:BSA中可能存在的牛血清抗体杂质对酶标二抗起到了"中和"作用,降低了酶标二抗与目标抗体结合的实际浓度,使检测结果普遍偏低。
- 吴庆儒郭定宗张桂荣李文波
- 关键词:BSAELISA