拓云 作品数:11 被引量:52 H指数:6 供职机构: 东北农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 转基因生物新品种培育专项 哈尔滨市科技攻关计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 轻工技术与工程 生物学 医药卫生 更多>>
大豆7S球蛋白α'亚基缺失及(α'+α)亚基双缺失品系的回交转育 被引量:12 2012年 7S球蛋白α'与α亚基是大豆种子贮藏蛋白的重要组分,是影响大豆营养价值与加工品质的重要因子,同时还是主要的大豆致敏原,降低它们的含量是大豆品质改良育种的最新研究热点之一。以日本育种材料7S球蛋白(α'+α)-亚基双缺失型日B为供体亲本,黑龙江省主栽大豆品种东农47为受体亲本,采用回交转育方法,将α'与(α'+α)-亚基缺失特性导入东农47。结果表明,α'-缺失型(Cc)和(α'+α)-双缺失型(Cd)品系均能正常生长、结实,并能稳定遗传;Cc、Cd产量组分性状的平均值均远高于轮回亲本,蛋白质含量平均值均高于双亲,部分Cd株系籽粒蛋白质总量高达46.7%,脂肪含量平均值介于双亲之间,略高于日B;导入α'-缺失和(α'+α)双缺失性状后,绝大多数氨基酸组分含量和氨基酸总量提高,其中精氨酸和天门冬氨酸平均含量变幅最大。Cd株系籽粒含硫氨基酸含量(蛋氨酸与胱氨酸之和)及氨基酸总量分别比东农47高出0.11和5.56个百分点。说明通过常规育种重组α'-缺失或(α'+α)-双缺失性状即可提高大豆含硫氨基酸含量,并提高其他氨基酸组分含量及氨基酸总量,在Cc、Cd的BC2F3后代群体中有望筛选到α'-缺失或α'与α同时缺失的高产、高含硫氨基酸、优质大豆新品种。 宋波 蓝岚 田福东 拓云 白月 姜自芹 申丽威 李文滨 刘珊珊关键词:回交选育 大豆花瓣蛋白双向电泳分析技术体系的优化 被引量:8 2010年 双向电泳技术体系的优化是蛋白质组学研究的前提和基础.本文针对大豆花瓣含有大量色素和酚等干扰物质的现象,比较6种蛋白提取方法和2种蛋白裂解液配方,优化胶条范围和等电聚焦程序.结果表明:pH为4~7 IPG胶条适于大豆全花蛋白分离;TCA/丙酮+2D Clean Up试剂盒法去除杂质充分,提取的蛋白含量高、纯度好、分离效果佳、耗时短;蛋白裂解液采用5 mol/L尿素,2 M硫脲,2%CHAPS,2%SB3-10,5 mmol/L TCEP,20 mmol/L DTT,0.5%IPG Buffer为好;增加离心转速、时间和丙酮清洗次数能促进蛋白溶解,增加蛋白纯度,初步建立了一套适合大豆全花蛋白双向电泳分析的技术体系. 郑天慧 宋波 姜自芹 刁桂珠 曾蕊 吴帅 拓云 刘珊珊关键词:双向电泳 致敏蛋白α亚基缺失型大豆氨基酸组成及营养评价 被引量:6 2014年 结合模糊识别方法评价的数学模型法和联合国粮农组织/世界卫生组织(Food and Agriculture Organiz ation/World Health Organization,FAO/WHO)、鸡蛋蛋白两种模式下的化学分析法评价两个致敏蛋白α亚基缺失型大豆蛋白质氨基酸营养价值,解析α亚基缺失特性对大豆氨基酸组分及营养品质的影响。用氨基酸分析仪测定氨基酸的组分和含量,α亚基缺失特性用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)确认,蛋白和脂肪含量用Perten 8620近红外谷物分析仪测定。结果表明:1)致敏蛋白α亚基缺失型大豆的氨基酸总量、必需氨基酸总量、蛋白质、油分含量不因α亚基的缺失而降低;2)致敏蛋白α亚基缺失型大豆的11S/7S比值在4.65以上,高于目前普遍报道的2.0~3.0;3)致敏蛋白α亚基缺失型大豆必需氨基酸含量接近或高于FAO/WHO标准;两种模式下,α亚基缺失型大豆的5种化学评分及贴进度值都很高,接近标准蛋白。致敏蛋白α亚基缺失型大豆蛋白质氨基酸组分平衡,11S/7S比值更优,营养品质更高。 拓云 霍彩琴 田福东 申丽威 宋波 蓝岚 魏晓双 国博闻 李文滨 刘珊珊关键词:大豆 氨基酸 营养评价 SSR标记辅助回交转育大豆7S球蛋白α-亚基致敏蛋白缺失新品系 被引量:7 2014年 为快速培育7S球蛋白致敏蛋白α-亚基缺失的优质大豆新品系,以(α'+α)-亚基双缺失型材料日B为供体亲本,东农47为受体亲本,以杂交-回交转育方法为基础,结合SSR标记辅助遗传背景选择与主要农艺性状鉴定及品质分析,在BC2F4选育到7S球蛋白α-亚基缺失新品系Cb80。Cb80综合农艺性状优良,遗传背景回复率大于90%,其蛋白质及氨基酸总量为44.1%、41.95%,分别比轮回亲本东农47提高3.5和3.76个百分点。 拓云 霍彩琴 田福东 宋波 申丽威 魏晓双 国博闻 李文滨 刘珊珊关键词:回交育种 大豆引进种质资源异黄酮含量的鉴定 2010年 以7S球蛋白亚基组成各异的6份国外引进大豆种质为试材,对其异黄酮含量进行鉴定,结果表明:供试材料间的异黄酮含量及大豆黄素、黄豆黄素、染料木黄素含量都存在差异. 姜自芹 吴帅 张大勇 刁桂珠 郑天慧 曾蕊 宋波 拓云 刘珊珊关键词:大豆 异黄酮含量 大豆致敏蛋白及其清除方法的研究进展 被引量:6 2011年 大豆含有丰富的蛋白质和平衡的氨基酸组分,是人和畜禽优质的植物蛋白源。然而,近年来,大豆中含有的抗原蛋白导致人和动物过敏反应的问题越来越受到关注,大豆致敏蛋白的相关研究成为大豆蛋白研究与应用的新热点。该文综述了大豆致敏蛋白的种类、特征,对有效加工、灭活大豆致敏蛋白的方法进行了归纳,着重介绍了传统育种方法结合基因工程手段在创制低致敏原大豆新种质方面的应用及研究进展,为进一步提高大豆及其制品的品质质量、保证其在人类食品和畜禽饲料中的安全与高效利用提供科学参考。 曾蕊 宋波 拓云 吴帅 蓝岚 姜自芹 刘珊珊关键词:大豆 致敏蛋白 蛋白质组学在大豆中的研究进展 被引量:2 2010年 蛋白质组学分析是目前分离、鉴定蛋白差异表达最为有效的研究手段之一,其核心技术包括以双向电泳为主的蛋白质分离技术、以质谱分析为核心的蛋白质鉴定技术以及计算机图像数据处理和数据库的构建。蛋白质组学分析方法是功能基因组研究的重要支柱。文章总结了蛋白质组学分析用大豆蛋白提取方法的改进,综述了蛋白质组学技术在大豆与根瘤菌相互作用、大豆组织器官蛋白、生长发育相关蛋白研究上的应用以及在生物及非生物胁迫、细胞器水平、大豆遗传多样性及转基因鉴定领域的研究进展,同时对大豆蛋白质组学的发展前景进行了展望。 刘珊珊 姜自芹 刁桂珠 郑天慧 曾蕊 吴帅 宋波 拓云 李文滨关键词:大豆 蛋白质组学 大豆7S球蛋白致敏蛋白亚基缺失基因(cgy-1/cgy-2)相关SSR标记的鉴定与染色体定位 本研究以大豆7S球蛋白β-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)致敏蛋白α′-亚基缺失型品系CC;α-亚基缺失型品系CB分别为供体亲本与黑龙江省王栽大豆品种东农47构建F2作图群体,利用集团分离法(Bulked se... 刘珊珊 宋波 申丽威 拓云 李文滨根癌农杆菌介导大豆转Bt-cryIA抗虫基因 被引量:10 2013年 通过根癌农杆菌介导法,以子叶节为外植体将抗虫基因cryIA转入东农50大豆品种中,对获得的T0、T1和T2植株采用PCR、RT-PCR及Southern杂交法进行分子检测,并对转基因大豆进行食心虫室内抗性鉴定。经PCR鉴定,T0植株有4株为阳性植株,T1有3株为阳性植株,T2有9株为阳性植株。对3株T1阳性植株进行RT-PCR检测,均扩增得到1 800bp目标片段,Southern杂交分析显示,有2株出现杂交信号,分别为单拷贝和双拷贝。室内抗虫鉴定表明转基因植株食心虫抗性明显优于对照品种,在蛋白质及脂肪酸含量等品质性状上,与对照没有显著差异。证明cryIA基因已整合到受体大豆基因组中,该基因在大豆T1转基因植株中能够正常转录,抗虫基因cryIA的导入可以提高东农50对大豆食心虫的抗性,其后代的遗传稳定性还有待于进一步的研究。 蓝岚 吴帅 申丽威 王志坤 孟凡立 宋波 拓云 刘珊珊关键词:大豆 根癌农杆菌 子叶节 CRYIA 大豆7S、11S球蛋白亚基缺失突变体豆腐加工特性的鉴定 被引量:6 2011年 以4份7S、11S球蛋白不同亚基组成大豆种质为试材,采用小样本大豆加工方法制作豆腐,测定其豆腐产量、豆腐干重(DTW)、豆腐蛋白含量(PC)、豆腐硬度和豆浆蛋白率(RPA)等豆腐品质指标,并分析和鉴定其豆腐加工特性来明晰以上四种大豆种质在豆腐品质加工上的利用潜力。结果表明,大豆7S球蛋白亚基表现分别为:α'-亚基缺失,[(α'+α)+11S(Ⅱb+Ⅱa)]-亚基缺失和β-亚基极少型变异种质日A-5、日B-1和越南褐脐做成的豆腐在豆腐产量、豆腐干重、豆腐蛋白质含量、豆腐硬度和豆浆蛋白率等品质性状上存在显著的差异,四个大豆材料间的湿、干豆腐产量的遗传变异系数较大。α'-亚基缺失型日A-5是适用于以硫酸钙作为凝固剂加工豆腐的大豆种质资源。低大豆7S球蛋白品系日B-1因同时伴随有11S酸性亚基缺失,所制豆腐硬度低、成型差。越南引进的越南褐脐(β-少型)可在优质豆腐用品种亲本选配中加以利用。 刁桂珠 潘俊波 姜自芹 葛玉君 郑天慧 曾蕊 吴帅 宋波 拓云 刘珊珊关键词:大豆 球蛋白