朱雄军
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 供职机构：暨南大学生命科学技术学院更多>>
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- 相关领域：生物学更多>>
- 葡萄糖氧化酶的有机相共价固定化被引量：6
- 2012年
- 将葡萄糖氧化酶(GOD)在最适pH条件下冻干后,以戊二醛活化的壳聚糖为载体,分别在传统水相和1,4-二氧六环、乙醚、乙醇三种不同的有机相中进行共价固定化。通过比较水相固定化酶和有机相固定化酶的酶比活力、酶学性质及酶动力学参数,考察酶在有机相中的刚性特质对酶在共价固定化过程中保持酶活力的影响。结果表明,戊二醛浓度为0.1%、加酶量为80 mg/1 g载体、含水1.6%的1,4-二氧六环有机相固定化GOD与水相共价固定化GOD相比,酶比活力提高2.9倍,有效酶活回收率提高3倍;在连续使用7次后,1,4-二氧六环有机相固定化GOD的酶活力仍为相应水相固定化酶的3倍。在酶动力学参数方面,不论是表观米氏常数,最大反应速度还是转换数,1,4-二氧六环有机相固定化的GOD(Kmapp=5.63 mmol/L,Vmax=1.70μmol/(min.mgGOD),Kcat=0.304 s-1)都优于水相共价固定化GOD(Kmapp=7.33 mmol/L,Vmax=1.02μmol/(min.mg GOD),Kcat=0.221 s-1)。因此,相比于传统水相,GOD在合适的有机相中进行共价固定化可以获得具有更高酶活力和更优催化性质的固定化酶。该发现可能为酶蛋白在共价固定化时因构象改变而丢失生物活性的问题提供解决途径。
- 周涛朱雄军苏建华姚冬生刘大岭
- 关键词：葡萄糖氧化酶有机介质
- 葡萄糖氧化酶的有机相共价固定化
- 葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD)属于氧化还原酶类(ECl.1.3.4),能专一行地将β-D-葡萄糖氧化成葡萄糖酸和过氧化氢,广泛存在于动植物和微生物体内。该酶主要应用于食品卫生、饲料工业和生物医药等...
- 周涛朱雄军苏建华谢春芳刘大岭姚冬生
- 关键词：葡萄糖氧化酶有机相酶活力
- 文献传递
- 有机相中的共价固定化方法对酶蛋白构象影响的研究
- ＜正＞酶作为一种高效的生物催化剂,在工业应用及商业生产上受到限制的最主要原因就是酶的不稳定性问题。共价固定化方法在提高酶稳定性的研究中占据着重要地位,由于该法主要利用的是酶和载体之间的共价作用,所得到的固定化酶与载体连接...
- 王旭曼朱雄军姚冬生谢春芳刘大岭
- 关键词：有机相
- 文献传递
- 用有机相提高共价固定化胰蛋白酶活力被引量：1
- 2012年
- 蛋白质共价固定时,容易发生由于共价化学反应而引起蛋白质构象的不可逆变化而造成蛋白活性丧失的现象,该问题在诸如药物修饰、蛋白质芯片、酶生物电极等制备中十分重要.本研究以壳聚糖为载体,以胰蛋白酶为研究对象,比较了水相与多种有机相条件下的共价固定化酶的动力学特性.结果发现,固定化酶特征常数Km值:所有的有机相条件下共价固定的胰蛋白酶均优于传统的水相中共价固定的该酶,且更接近于游离酶的Km值(水相中固定的胰蛋白酶其Km是1,4-二氧六环中固定的胰蛋白酶的3.69倍),提示有机相中固定的胰蛋白酶比水相中固定的该酶更接近于酶的天然构象;与水相中共价固定的胰蛋白酶相比,所有有机相中共价固定的胰蛋白酶均获得了更高的转换数Kcat(乙酸乙酯中固定的胰蛋白酶其转换数Kcat是水相中固定的该酶的58.64倍),即有机相中共价固定的胰蛋白酶均显示出比传统的水相中共价固定的该酶更高的催化效率.本研究表明,利用酶蛋白在有机相中变得刚硬的特性,在有机相中对某些酶进行共价固定化修饰有利于维持酶蛋白天然构象,一定程度上能够克服传统水相中进行共价固定化过程中造成的酶变性失活现象.
- 王旭曼苏建华朱雄军谢春芳刘大岭
- 关键词：有机相
