李昕
- 作品数：4 被引量：9H指数：1
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- 整合型HIV DNA荧光定量检测法的临床初探
- 2017年
- 目的 建立外周血单核细胞整合型HIV DNA荧光定量ALu-PCR的检测方法.方法 收集我院就诊的病毒载量＜ 20IU/ml的艾滋病患者、耐药患者和初诊患者各10例.培养ACH2细胞系,每个细胞含有一个HIV基因组.构建pMD19T-CD3质粒,测定浓度,计算其拷贝数.选用针对HIV3＇长末端重复序列的引物ULF1,和针对人类基因高度保守的Alu1和Alu2序列的引物,对1∶5梯度稀释,共8个梯度的ACH2基因组及样本进行预扩增.将预扩增的产物用引物Lambda T、UR2及HIV Taqman探针进行整合型HIV DNA的荧光扩增;用引物CD3IN5、CD3IN3及CD3 Taqman探针对预扩增产物及1∶5梯度稀释的CD3质粒进行CD3荧光扩增.结果 以1∶5梯度稀释的CD3质粒为标准品,得到的线性回归方程y=-2.731x ＋43.01,（R2 =0.953）,根据一个人类细胞含2个CD3基因,可得到样本及ACH2的细胞数.ACH2的细胞数即HIV拷贝数为4.271×104;以1∶5梯度稀释的ACH2为标准品,回归方程为y=-3.146x ＋39.11 （R2 =0.968）计算可得样本整合型HIV DNA;用样本的整合型HIV-1 DNA/样本的CD3的拷贝数,即为单位细胞中整合型HIV拷贝数.通过对不同组间的t检验,各组间无差异（P＞0.05）.结论 该方法对于低拷贝HIV病毒量的检测有优势,提示通常的抗病毒治疗无法有效攻击潜伏库中的病毒,同时也为新的干预治疗提供了一种评价依据.
- 张敏王前英李昕胡芸文施碧胜
- 关键词：HIV荧光定量PCR
- 上海地区住院人类免疫缺陷病毒感染患者中艰难梭菌的检测及其意义被引量：1
- 2015年
- 为了解上海地区住院人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者中艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的发生率、临床特征、药敏及分型情况,收集250例住院HIV感染腹泻患者的粪便,用选择性培养基进行艰难梭菌和一般肠道致病菌分离;用E-Test法测定艰难梭菌对甲硝唑、万古霉素、克林霉素、莫西沙星的敏感度;用多位点序列分型法(MLST)和聚合酶链反应(PCR)检测菌株基因类型及细菌毒素基因tcdA和tcdB。结果共检出29株(11.6%)艰难梭菌,均对甲硝唑、万古霉素敏感,对莫西沙星和克林霉素的耐药率分别为31.0%和69.0%。MLST分型共检出12种ST型别(ST-2、-3、-7、-8、-26、-35、-37、-38、-39、-54、-81和-124),其中ST-54(6/29,20.7%)和ST-39(5/29,17.2%)是主要流行亚型;毒素基因tcdA+/tcdB+17株(17/29,58.6%),毒素基因tcdA-/tcdB-12株(12/29,41.4%),未检出毒素基因tcdA-/tcdB+菌株。结果提示,上海地区住院HIV感染腹泻患者粪便标本中艰难梭菌的分离率较高,需严密监控以防暴发流行。
- 金鑫钱雪琴胡绿荫李昕沈芳
- 关键词：人类免疫缺陷病毒艰难梭菌相关性腹泻药敏试验多位点序列分型
- 干血斑和血清样本用于检测乙型肝炎病毒DNA及耐药突变的比较被引量：1
- 2016年
- 目的：验证干血斑（DBS）样本替代静脉血血清样本用于检测乙型肝炎病毒（HBV）基因诊断的可行性。方法选择慢性乙型肝炎患者100例，血清HBV的病毒载量〉1×10^2拷贝/mL，抽取静脉血同时制备DBS样本和血清样本，进行HBV DNA定量检测，比较DBS与血清样本检测结果的相关性。选取73例基因型主要为B、C型的患者，进行DBS和血清样本基因型检测的比较。同时随机选取56例乙型肝炎患者的DBS和血清样本，采用实验室自建的套式聚合酶链反应（PCR）扩增HBV的逆转录酶（RT）区段，通过geno2pheno数据库进行结果分析，比较二者耐药性的检测结果。结果 DBS样本HBV DNA的检测范围为2-8 log10拷贝/mL，与血清样本HBV DNA的检测结果高度相关（r^2=0.82，P〈0.05），DBS样本HBV DNA定量值比血清样本低1个数量级。2种样本HBV耐药性检测结果的总符合率为95.83%；DBS和血清样本耐药状态的检出率分别为82.14%和85.71%（P〉0.05）。2种样本HBV基因分型结果的符合率为100.00%。结论 DBS样本可用于HBV DNA的定量及耐药性的检测。
- 张敏王前英李昕王刚胡芸文
- 关键词：干血斑乙型肝炎病毒DNA
- H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白的变化及其临床意义被引量：7
- 2013年
- 目的探讨H7N9禽流感患者外周血常规和C反应蛋白(CRP)的变化,为临床诊断、治疗及病情监测提供依据。方法选取18例H7N9禽流感患者(H7N9组),以2009年的20例甲型H1N1流感患者(H1N1组)及20名健康体检者(正常对照组)作为对照。根据患者康复情况将H7N9组再分为轻症组12例、重症组6例。分析各组血常规,同时测定H7N9组外周血CRP水平。结果与正常对照组比较,H7N9组患病初期白细胞(WBC)总数无明显变化,淋巴细胞(Lym)计数明显降低(P<0.05),同时伴有血小板(PLT)和嗜酸性粒细胞(Eos)下降(P<0.05);重症组中性粒细胞(Neu)计数明显增高(P<0.05),轻症组和重症组之间各项指标均无差异(P>0.05)。与H1N1组比较,H7N9组入院时的血象特点相似,但Lym计数下降更为明显(P<0.05)。与治疗前比较,轻症组治疗后PLT、Lym及Eos计数明显上升(P<0.05)。H7N9组入院时CRP明显升高,重症较轻症组升高更为明显(P<0.05)。轻症组治疗后CRP明显下降,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论外周血CRP水平对区分H7N9禽流感患者轻、重症及判断预后有一定的提示作用。H7N9禽流感患者外周血常规的变化与甲型H1N1流感存在相似之处,特点并不明显,应充分结合多方面信息以明确诊断和判断预后,以防出现严重的疫情后果。
- 李昕沈震张蓓卢美娟胡香南胡绿荫张军
- 关键词：外周血象C反应蛋白
