- 人脑神经生长因子基因的体外扩增被引量：2
- 1993年
- 作者设计并合成一对特异性DNA引物,采取聚合酶链反应技术,分别从人脑cDNA文库和人脑基因组DNA中成功地制备了神经生长因子β亚基(β-NGF)基因片段,为该基因表达载体的构建奠定了基础。
- 李昌龙陈俊杰王若菡程汉华林佳杨鲁川
- 关键词：聚合酶链反应神经生长因子基因
- hBDNF基因在成纤维细胞中的异位表达被引量：1
- 2001年
- 将 h BDNF全长编码序列插入人 I型胶原基因 (Colia1)增强子 -启动子调节序列之下 ,构建了含 Colia1-BDNF微基因的重组体 p SCEPBFCAT,并转染人胚肌腱成纤维细胞。成功地利用了 Colia1基因调控元件介导 BD-NF基因在成纤维细胞中异位表达 ,SDS- PAGE显示表达产物分子量为 2 7k Da,免疫斑点杂交、Elisa和 Western杂交证实该表达产物具有
- 刘智敏陈俊杰王若菡项涛李霞林佳游乐然东云华
- 关键词：HBDNF调控元件微基因成纤维细胞
- hBDNF基因原核表达重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2001年
- 我们按照 h BDNF基因全长编码序列设计合成引物 ,从人基因组 DNA中扩增出 76 0 bp的片段 ,反向插入到 p GEM- 3Zf(+ )载体上 ,获得 p GEMBF18克隆 ,限制性酶分析和 DNA序列测定均证实该克隆插入片段为h BDNF基因全长编码序列。从 p GEMBF18克隆中获取 h BDNF全长编码片段 ,与原核表达载体 p GEX- 5 T连接 ,构建了 p5 TBF34原核表达重组质粒。重组质粒转化大肠杆菌 JM10 9,经 IPTG诱导表达 ,SDS- PAGE特异区带分子量为 43k Da,此重组蛋白占菌体可溶性蛋白总量的 7.5 3% ,Western杂交证实该特异区带具 h
- 刘智敏陈俊杰林佳王若菡游乐然东云华
- 关键词：HBDNF基因克隆SDS-PAGE原核表达脑源性神经营养因子质粒
