汤鑫
- 作品数：13 被引量：25H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 小鼠脾脏朊病毒复制重要相关因子的筛选与鉴定
- 朊病毒病是由朊病毒PrP~(Sc)（异常的朊蛋白）引起的一种传染性、致死性的神经退行性疾病又叫做动物传染性海绵状脑病（TSE），包括人类的克雅氏病、疯牛病、羊瘙病等。 疯牛病等TSE主要由于人类在饲养动物过程中违背伦理，...
- 汤鑫
- 关键词：朊蛋白小鼠脾脏
- 文献传递
- 鼠PrP的无细胞表达及其多克隆抗体的制备被引量：1
- 2012年
- 目的成功的表达鼠的PrP,制备特异性的兔抗PrP多克隆抗体。方法以BALB/c小鼠肝脏基因组DNA作为模板运用PCR技术成功扩增了PrP23-231,将其克隆到pRSET原核表达载体中,构建重组表达载体pRSET PrP23-231。将该重组载体进行无细胞表达,然后对成功表达的PrP进行纯化,然后用纯化的蛋白免疫新西兰大耳白兔制备其多克隆抗体,并进行Western-blot鉴定。结果通过Western-blot鉴定,有约30kD的目的条带,证明蛋白成功表达,并进行其多克隆抗体的制备并进行Western-blot鉴定,有约30kD的目的条带,证明成功制备了PrP的多克隆抗体。结论成功表达了PrP23-231,并且成功制备了其多克隆抗体,为进一步研究PrP的功能奠定了基础。
- 汤鑫鞠传静梁斌斌李忠义孟轲音刘文森郝镯栾世慧张晓晶李莎沈景林万家余
- 关键词：朊蛋白多克隆抗体
- 正交试验法优化蕨菜总黄酮的提取工艺被引量：6
- 2010年
- [目的]优化蕨菜[Pteridium aquilinum (Linn.) Kuhn var.latiusculum(Desv.)Underw.exHeller]总黄酮的提取工艺,为蕨菜黄酮类化合物的开发利用提供理论依据。[方法]在单因素试验基础上,以总黄酮得率为考察指标,采用正交试验对影响蕨菜总黄酮提取的因素,乙醇体积分数、沸腾时间、淋洗时间和料液比进行优化。[结果]蕨菜总黄酮最佳提取工艺为:乙醇体积分数60%,沸腾时间2.0 h,淋洗时间1.0 h,料液比1∶30(W/V)。在此优化工艺条件下,蕨菜总黄酮得率达8.80%。蕨菜不同器官中总黄酮含量趋势为:脱脂叶片>叶片>脱脂叶柄>叶柄。[结论]该研究建立的提取蕨菜总黄酮的方法得率高于传统方法,且节省时间、简单易行。
- 徐丽娟房恒通沈景林刘莎莎丁雪梅张梦晗唐鸿宇汤鑫
- 关键词：蕨菜黄酮
- 日粮中添加不同水平L-精氨酸对妊娠期獭兔血清白细胞介素-2、γ-干扰素、白细胞介素-4的影响被引量：1
- 2012年
- 本试验旨在研究日粮中添加不同水平L-精氨酸对妊娠期獭兔血清中1型(Th1)和2型(Th2)细胞因子的影响,为妊娠期獭兔日粮的配制提供理论依据。选取发情獭兔72只,随机分为6组,每组3个重复,每个重复4只,试验1组饲喂基础日粮,试验2～6组配种后分别在基础日粮中添加0.15%、0.30%、0.45%、0.60%、0.75%L-精氨酸。测定在妊娠第10、20、30天血清中白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)的浓度。结果表明,妊娠10 d时,试验4～6组IL-2浓度显著低于试验1～3组(P<0.05);妊娠20、30 d时,试验3～6组IL-2浓度显著低于试验1、2组(P<0.05);妊娠10、30 d时,试验3～6组IL-4浓度显著高于试验1、2组(P<0.05),妊娠20 d时,试验2～6组IL-4浓度显著高于试验1组(P<0.05);与试验1组相比,IFN-γ浓度在添加量为0.15%时显著降低,并不再随添加量的增加而有显著变化。因此,妊娠期獭兔日粮中L-精氨酸适宜添加量为0.30%。
- 彭易柱堵光莹王多伽刘畅邵大富费中平何娟张晶孟杨唐鸿宇张梦晗汤鑫沈景林
- 关键词：獭兔日粮L-精氨酸
- PrP(D178N)无细胞表达、抗原性及结构分析被引量：1
- 2011年
- 目的无细胞表达人178位点突变朊蛋白PrP(D178N),并分析其抗原性及结构。方法提取人血液基因组DNA,应用PCR法突变人PrP 178号位点。以正常的PrP为对照组,分别连接至真核表达载体pcDNA3.1上,利用无细胞真核表达系统进行表达。Western blot分析表达的重组蛋白的抗原性,电镜观察抗原结构。结果突变基因重组表达质粒构建正确;表达的PrP(D178N)蛋白相对分子质量约为28 000,对PK酶具有抗性,电镜下可见氧病相关纤维(Scrapie associated fibrils,SAF)存在。结论 已成功无细胞表达了PrP(D178N),为后续其突变后空间构象及致病机理的研究奠定了基础。
- 汤鑫万家余鞠传静李莎郝镯刘文森李忠义孟轲音张晓晶刘林娜沈景林马永和钱军
- 关键词：朊蛋白突变
- 光滑爪蟾皮肤抗菌肽的分离纯化及活性检测被引量：8
- 2011年
- 通过高效液相色谱法,对光滑爪蟾皮肤分泌物进行分离纯化,得到具有抗菌活性的光滑爪蟾皮肤抗菌肽。通过最小抑菌浓度(MIC)试验、溶血活性试验及癌细胞抑制试验,对其体外生物活性进行研究。结果表明,经过纯化得到2个纯度高且具有活性的抗菌肽(AMP1和AMP2),质谱鉴定结果得出其相对分子质量分别为1 082.78和2237.34。MIC结果表明,AMP1对S.aureus ATCC25923、Escherichia coli ATCC25922的MIC值分别为23.63、8.71mg/L,对MRSA无抑菌作用。AMP2对S.aureus ATCC25923,Escherichia coli ATCC25922、MRSA的MIC值分别为4.94、10.7、86.6mg/L。溶血试验显示AMP1,AMP2具有极弱溶血活性,且对癌细胞SW480具有抑制作用。
- 潘朋朋冯立文李吉平侯峰汤鑫李莎王东旭徐静刘琳娜高宏伟
- 关键词：抗菌肽生物活性
- 公农2号紫花苜蓿抗寒基因CAS19在烟草中的表达被引量：2
- 2011年
- [目的]研究公农2号紫花苜蓿抗寒基因CAS19在烟草中的表达。[方法]根据苜蓿抗寒基因(CAS19)核酸序列设计1对引物,用RT-PCR扩增出分离CAS19的蛋白基因,并克隆到pMD18-TVector载体中,再亚克隆到表达载体PBI121,成功构建重组表达质粒PB-CAS。经农杆菌介导转基因入烟草,并通过Sounthern-blotting杂交分析检测转基因苗。[结果]CAS19抗寒基因可以在烟草中得以高效表达。[结论]为进一步探明CAS19抗寒基因在烟草中的表达机制提供了理论依据。
- 帅丽芳沈景林郭瑞萍唐鸿宇丁雪梅徐丽娟刘莎莎张梦晗汤鑫
- 关键词：烟草紫花苜蓿
- 公农2号紫花苜蓿抗寒基因CAS19在烟草中的表达(摘要)(英文)
- 2010年
- [目的]研究公农2号紫花苜蓿抗寒基因CAS19在烟草中的表达。[方法]根据苜蓿抗寒基因(CAS19)核酸序列设计1对引物,用RT-PCR扩增出分离CAS19的蛋白基因,并克隆到pMD18-T Vector载体中,再亚克隆到表达载体PBI121,成功构建重组表达质粒PBCAS。经农杆菌介导转基因入烟草,并通过Sounthern-blotting杂交分析检测转基因苗。[结果]CAS19抗寒基因可以在烟草中得以高效表达。[结论]该研究为进一步探明CAS19抗寒基因在烟草中的表达机制提供了理论依据。
- 帅丽芳沈景林郭瑞萍唐鸿宇丁雪梅徐丽娟刘莎莎张梦晗汤鑫
- 关键词：烟草紫花苜蓿
- CHA结合DNAzyme用于沙门氏菌核酸的可视化检测
- 2017年
- 为建立简洁、灵敏、快速的食源性沙门氏菌核酸可视化检测方法,试验采用靶标催化发夹装置(Catalyzed hairpin assembly,CHA)结合功能性核酸DNAzyme的方法,设计沙门氏菌核酸发夹型抓取探针(Capture probe,CP),CP结合靶标并启动H1、H2引发CHA反应,形成DNAzyme结构并发生显色反应。试验中对CP、H1、H2最佳浓度及缓冲液pH进行优化,对灵敏度与特异性进行分析。结果表明:该方法对沙门氏菌核酸片段的可视化检测具有高特异性,灵敏度达到3.9pM,且存在一定的线性关系。说明此方法的建立可为食源性病菌可视化检测奠定相应基础。
- 卜胜君王奎宇宋广萍英娜齐炳尧李忠义汤鑫万家余张红梅
- 关键词：沙门氏菌特异性RRNADNAZYME
- 小鼠朊蛋白相关蛋白Shadoo的表达、纯化及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2011年
- 构建SPRN重组原核表达载体,并进行目的蛋白的表达、纯化及多克隆抗体的制备。提取BALB/c小鼠全血基因组,PCR扩增SPRN基因,克隆至融合表达载体,在大肠埃希菌中表达鼠Shadoo蛋白并纯化;以纯化蛋白为抗原免疫新西兰白兔制备抗血清,并检测抗体效价,用Western blot方法分别检测与重组及内源性Shadoo蛋白的反应性。结果表明,成功制备了小鼠Shadoo蛋白兔源多克隆抗体,为研究Shadoo蛋白与PrP蛋白之间的功能调节关系、自身的生理学作用以及Shadoo蛋白在传染性海绵状脑病发病机制过程中的生物学功能奠定了良好的基础。
- 吴松波徐明万家余李莎潘朋朋王东旭汤鑫刘琳娜刘文森李吉平孙玉成高宏伟
- 关键词：朊蛋白多克隆抗体
