王中伟
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
- 供职机构：吉林大学畜牧兽医学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
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- 猪精子二层percoll密度梯度离心分离法
- 本发明提供的猪精液二层percoll密度梯度离心法，适用于正常的精液标本及精子密度低或精子活力低的精液标本，是一种简单、便捷的精子处理方法。该方法能除去精液中的白细胞、细菌、碎片及抗精子抗体；改善精液液化不良和精子体外获...
- 李子义唐博高飞刘丽梅花明殷玉鹏马馨关继羽宋光启王中伟张鹏孔德龙
- 文献传递
- 牛孤雌激活囊胚冷冻复苏后胚胎存活率和胚胎质量
- 2010年
- 使用2种不同的冷冻载体冷冻保存牛孤雌囊胚,并且使用差异染色的方法计数囊胚细胞数。结果显示,开放式毛细玻璃管(GMP)和冻精管(Straws)冷冻牛孤雌囊胚复苏后囊胚孵出率存在显著性差异(GMP法为70.29%,冻精管法为27.31%,P<0.05)。差异染色结果显示,牛囊胚冷冻复苏后囊胚细胞数目为91.37,而对照组(正常孤雌囊胚)囊胚细胞数目为93.70,两者差异不显著(P>0.05),并且前者内细胞团数(ICM)与滋养层细胞数(TE)比例为0.23,而后者为0.24,差异不显著(P>0.05)。结果表明,GMP法更适合冷冻保存牛孤雌囊胚,并且其冷冻复苏后囊胚的孵出率达到70.29%。同时使用GMP冷冻囊胚对囊胚细胞的损伤较小。
- 张鹏王中伟马馨高飞唐博张嘉保李子义
- 关键词：孤雌激活囊胚玻璃化冷冻
- 5-甲基胞嘧啶到5-羟甲基胞嘧啶的转变过程参与小鼠雄原核的DNA主动去甲基化被引量：2
- 2012年
- 利用5-甲基胞嘧啶(5-methylcytosine,5mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hydroxymethylcytosine,5-hmC)特异性抗体对小鼠原核时期胚胎进行免疫荧光染色。同时使用荧光定量PCR方法检测Tet(Ten eleven translocation)基因在小鼠早期胚胎中的表达。免疫荧光染色结果显示早期原核阶段(PN1到PN3),雄原核中5mC的含量逐渐减少,而5hmC的含量逐渐增加。但是雌原核中5mC和5hmC的含量基本不变。在原核后期阶段(PN4到PN5)5hmC主要存在于雄原核中。荧光定量结果显示在小鼠MⅡ卵母细胞和植入前胚胎中Tet1和Tet2基因表达量较低,但是Tet3在卵母细胞和原核时期表达量较高,随着胚胎的发育其表达量逐渐降低。结果表明,在小鼠原核时期阶段5mC到5hmC的转变过程主要是由TET3蛋白催化的,并且此过程参与小鼠雄原核的DNA主动去甲基化。
- 张鹏王中伟张胜唐博周好乐李子义
- 关键词：TET小鼠
- 牛卵母细胞胞质注射条件的研究
- 卵母细胞胞质注射是研究卵母细胞基因功能(通过注射双链RNA干扰特定基因)、单精子注射(ICSI)和体细胞核移植等实验的重要工具。实验采用piezo法注射GV期及MⅡ期牛卵母细胞,比较了不同处理方法对卵母细胞胞质注射成活率...
- 王中伟张鹏张胜唐博李子义
- 关键词：卵母细胞
- 文献传递
- 非亚硫酸氢盐处理的基因组甲基化分析方法
- 基因启动子区域CpG岛甲基化往往会引起细胞内基因表达的沉默,而CpG岛的去甲基化与基因表达的激活有关。目前检测基因启动区域甲基化和度主要使用亚硫酸氢盐处理的方法,但是亚硫酸氢盐处理往往会造成基因组的大量降解。LINE元件...
- 张鹏王中伟张胜马馨关继羽唐博李子义
- 关键词：甲基化BSP表观遗传
- 文献传递
- HDAC1基因在牛卵母细胞和早期克隆胚胎发育中的作用
- 通过与转基因技术相结合,体细胞核移植技术已经被广泛的应用于抗病育种以及人类医学动物模型的建立。由于生产克隆动物的效率还很低,限制了这一技术在应用领域的发展。提高核移植效率需要从两个方面入手,一是优化体细胞核移植操作方法；...
- 王中伟
- 关键词：HDAC1体细胞核移植RNA干扰
- 文献传递
- 非亚硫酸氢盐处理的基因组甲基化分析方法
- 张鹏王中伟张胜马馨关继羽唐博李子义
- 关键词：甲基化BSP表观遗传
- 真核表达载体pIRES2-EGFP-V13KL的构建及在COS-7细胞和小鼠胚胎中的表达
- 2011年
- 构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-V13KL,瞬时转染COS-7细胞及对小鼠受精卵进行原核注射,旨在通过抗菌肽V13KL在COS-7细胞、小鼠胚胎中的表达情况评价其对细胞生理状态、胚胎发育方面可能产生的影响。结果显示,V13KL可以与EGFP在COS-7细胞中高效共表达,转染效率为75.8%,且原核注射后约10%的胚胎发育成带有绿色荧光的囊胚。
- 关继羽李松励张鹏宋光启刘丽梅刘颖王中伟高飞唐博陈育新岳占碰李子义
- 关键词：COS-7流式细胞术
