王晓楠
- 作品数：15 被引量：17H指数：2
- 供职机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省教育厅高等学校科学研究项目辽宁省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 低剂量纳曲酮对小鼠巨噬细胞的免疫调节作用及机理研究被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨纳曲酮(Naltrexone,NTX)对小鼠腹膜巨噬细胞表型,分泌细胞因子及吞噬功能的影响。方法:本实验利用新型四唑化合物比色法测得NTX对RAW264.7细胞作用的最佳剂量;再将培养的腹膜巨噬细胞分为3组,RPMI1640空白对照组、脂多糖(LPS)阳性对照组和NTX处理组,采用流式细胞术检测CD206、CD64的阳性表达率及对葡聚糖的吞噬能力;ELISA法检测白介素10(IL-10)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌表达。结果:10-11mol/L剂量可显著促进RAW264.7细胞的增殖;NTX(10-11mol/L)处理可明显提高腹膜巨噬细胞表面CD64的阳性表达,减少CD206的表达;提高对葡聚糖的吞噬能力;TNF-α、IL-6、IL-1β的表达显著增加,IL-10的表达无明显差异。结论:低剂量纳曲酮可改变巨噬细胞表型及功能,起免疫调节作用。
- 郭胜男李岩王晓楠单风平
- 关键词：纳曲酮巨噬细胞表型
- 烟酰胺单核苷酸拮抗β样淀粉蛋白寡聚体神经毒性的作用与机制的研究
- 王晓楠
- Chip-based TGCE定量检测大肠癌K-ras基因点突变
- 2010年
- 目的建立一种定量检测大肠癌中K-ras基因突变比例的方法,并分析其与临床病理参数之间的关系。方法利用微流控温度梯度毛细管电泳(Chip-based temperature gradient electrophoresis,Chip-basedTGCE)对4例代表性大肠癌组织切片中的K-ras基因突变进行检测,通过AutoCAD软件计算出K-ras基因突变比例,结果经克隆测序校正后获得线性回归方程。应用该方法定量检测84例石蜡包埋大肠癌组织中的K-ras基因突变比例,并探讨其与临床病理参数的关系。结果 Chip-based TGCE检测K-ras基因突变比例与克隆测序检测K-ras突变比例的线性回归方程为y=0.993x-1.387,K-ras基因突变比例与肿瘤部位和浸润深度有显著相关性(P<0.05),检测获得的最低K-ras突变比例达到2.51%。结论该研究显示Chip-based TGCE是一种快速、灵敏、便捷、经济的基因突变比例定量分析方法。
- 张惠丹单连峰王晓楠任辉方瑾
- 关键词：微流控芯片K-RAS基因
- 蛋氨酸脑啡肽抑制人胃癌细胞BGC823增殖作用及免疫调节机制被引量：3
- 2017年
- 采用不同浓度梯度的蛋氨酸脑啡肽(methionine enkephalin,MENK)体外作用于人胃癌细胞BGC823后,探讨对其增殖影响及其作用机制,为胃癌的免疫治疗提供理论依据。体外培养人胃癌细胞株BGC823,PCR检测阿片受体OGFr的表达;用不同浓度(0、1、2、3、4 mg/mL)的MENK体外作用于BGC823细胞24、48、72、96 h后,MTS检测MENK对其增殖影响;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双染法检测4 mg/mL MENK体外处理48、72 h后BGC823细胞凋亡变化。结果显示,人胃癌BGC823细胞有阿片受体OGFr的表达;MENK可抑制BGC823细胞增殖,且随着剂量的增加和时间的延长,其抑制作用逐渐增强(P<0.05);4 mg/mL MENK48 h处理组与空白组相比细胞凋亡率增加,72 h处理组与48 h处理组结果一致(P<0.05)。结果表明,MENK可抑制BGC823细胞增殖,具有显著的剂量依赖性和时间依赖性,且可通过诱导细胞凋亡抑制BGC823细胞的增殖。
- 唐佳运王晓楠李岩单风平
- 关键词：蛋氨酸脑啡肽阿片受体BGC823细胞肿瘤免疫
- 限制性片段长度多态性结合微流控芯片电泳检测大肠癌K-ras基因点突变
- 目的 K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因.微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点.本研究以K-ras基因点突变作为检测...
- 张惠丹宋瑾任辉徐章润王晓楠方瑾
- 关键词：微流控芯片限制性片段长度多态性大肠癌K-RAS基因点突变
- 一种从石蜡包埋组织中快速提取DNA的方法被引量：8
- 2010年
- 目的建立从甲醛固定石蜡包埋组织中高效、快速提取基因组DNA的方法。方法将一片10μm厚石蜡包埋大肠癌组织切片直接浸入150μl消化液中,56℃孵育0.5h、1h和2h,灭活蛋白酶K后离心取上清即为DNA提取物。琼脂糖凝胶电泳检测所提取DNA的片段分布,紫外分光光度法测定DNA的产量及纯度。以提取的DNA为模板,PCR扩增不同长度产物片段并进行产物的直接测序以评价提取方法。结果该提取方法能够获得较长片段的基因组DNA,从一片10μm厚石蜡切片中即可获得大约60μg的DNA,在0.5h消化条件下获取的模板DNA,即可实现对152bp、293bp、392bp和541bp等4种不同片段的100%扩增,1h消化组的PCR产物可直接用于DNA测序。结论建立了一种简单、快速地从甲醛固定石蜡包埋组织中提取DNA的方法,只需一步消化即可获得满足普通PCR及测序需要的基因组DNA。
- 张惠丹任辉王晓楠方瑾
- 关键词：甲醛固定石蜡包埋组织DNA提取
- 基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳检测大肠癌石蜡标本中K-ras基因突变被引量：2
- 2010年
- K-ras基因突变检测可用于大肠癌的早期筛查与诊断,并有利于筛选出抗表皮生长因子受体靶向药物治疗有效的大肠癌患者,以实现肿瘤的个体化治疗.采用以倾斜式热辐射原理建立的微流控温度梯度毛细管电泳(temperature gradient capillary electrophoresis,TGCE)基因突变检测系统,实现了对98例石蜡包埋大肠癌组织中K-ras基因突变的高灵敏度筛查,突变阳性检出率为47.96%,显著高于PCR产物直接测序的23.47%.克隆测序显示该方法至少能检测到2.08%的K-ras基因突变体.K-ras基因突变与临床病理学参数的关系分析显示,直肠癌中K-ras基因突变率明显高于结肠癌(P<0.05),而与年龄、性别、组织学类型和肿瘤分期等无显著相关性.该检测方法为肿瘤早期诊断和指导临床用药提供了一种灵敏度高、检测速度快、便于大规模筛查的有效手段.
- 张惠丹王晓楠周喆马倩方瑾
- 关键词：微流控芯片K-RAS基因突变大肠癌石蜡包埋组织
- CD30L基因表达对脂多糖刺激后小鼠腹腔CD11b^(+)细胞表型变化影响的研究被引量：1
- 2021年
- 目的:建立小鼠无菌炎症模型,研究CD30L分子对脂多糖刺激CD11b^(+)细胞表型变化的影响。方法:①通过流式细胞术比较和分析注射巯基乙酸培养基(TGM)前后,小鼠腹腔CD11b^(+)细胞数量及比例变化;②使用流式细胞术检测在不同时间与浓度的脂多糖(LPS)刺激下,小鼠腹腔CD11b^(+)细胞表型变化的情况与CD30L分子表达的情况;③在LPS刺激CD11b^(+)细胞的小鼠无菌炎症模型中,分析和比较C57BL/6(WT)和Cd30l基因敲除小鼠(CD30LKO)腹腔CD11b^(+)细胞表型变化的差异。结果:小鼠腹腔注射TGM可募集大量CD11b^(+)细胞,注射TGM后WT小鼠腹腔CD11b^(+)细胞表面CD86、F4/80无明显变化,I-A/E、CD30L表达下降;随着LPS刺激时间和浓度的增加,经TGM注射后的WT小鼠腹腔CD11b^(+)细胞数量逐渐增加,CD11b^(+)细胞表面CD30L分子的表达逐渐增加,并且,CD86、F4/80、I-A/E的表达同样增加,同时,与WT小鼠相比,CD30LKO小鼠腹腔CD11b^(+)细胞表面CD86、I-A/E表达降低,CD206表达升高。结论:CD30L分子调控LPS刺激后的小鼠腹腔CD11b^(+)细胞表型的变化。
- 张芷宁王笑王晓楠张晓清孙逊
- 关键词：CD11BLPS
- 蛋氨酸脑啡肽（MENK）通过阿片受体（OGFr）抑制胃癌恶性生物学行为的作用及机制研究
- 目的:胃癌是起源于胃黏膜上皮的恶性消化道肿瘤,是世界上最常见的恶性肿瘤之一,在我国各种恶性肿瘤中发病率居首位,在全球癌症患者死亡率中高居第三位。现今,外科手术仍然是胃癌的主要治疗手段,但胃癌的总体治疗模式已经发生了显著的...
- 王晓楠
- 关键词：GC增殖凋亡
- 文献传递
- 基于连续进样的微流控毛细管电泳系统在DNA分析中的应用
- DNA是遗传信息的载体，基因序列的改变与肿瘤发生发展有着密切的关系，对于突变基因的检测是肿瘤研究的重要课题。快速、高效的DNA分析技术是对肿瘤进行早期诊断和治疗的重要手段。
毛细管电泳（Capillary Elec...
- 王晓楠
- 关键词：微流控芯片毛细管电泳DNA分析
- 文献传递
