肖军
- 作品数：5 被引量：19H指数：3
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金武汉市卫生局临床医学科研项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 生长分化因子5促进软骨细胞肥大成熟的实验研究被引量：3
- 2012年
- [目的]探讨生长分化因子5(GDF-5)在诱导成人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)成软骨分化的同时,促进其肥大成熟的作用。[方法]体外分离培养hBMSCs,取第四代细胞实验。将细胞消化、悬浮,以5×106/ml的细胞密度进行高密度培养,分别用含0、500 ng/ml GDF-5的软骨诱导液(CM)诱导培养3、4周。免疫组化、甲苯胺蓝染色检测II型胶原、X型胶原和蛋白多糖的表达情况。荧光实时定量RT-PCR检测两组微团II型胶原、X型胶原和蛋白多糖mRNA的表达情况。[结果]实验组微团中的细胞体积较对照组稍大,细胞密度稍低。甲苯胺蓝和免疫组化染色结果显示各组微团均有Ⅱ型胶原、X型胶原和蛋白多糖的表达和分泌,且4周实验组的表达最为强烈。荧光实时定量RT-PCR检测示,干预后3周实验组II型胶原、蛋白多糖基因表达量明显高于3周对照组(P<0.05),但X型胶原基因表达与对照组相比无显著性差异(P>0.05);干预后4周实验组X型胶原基因表达高于其余各组(P<0.05),Ⅱ型胶原、蛋白多糖基因表达明显高于两对照组(P<0.05),但与3周实验组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]GDF-5在诱导细胞成软骨分化的同时,还可促进其成熟肥大。
- 张山锋勘武生刘军肖军杨钟华
- 关键词：成人骨髓间充质干细胞生长分化因子5软骨分化
- 骨科患者感染鲍曼不动杆菌16S rRNA基因分布检测及耐药性分析被引量：6
- 2017年
- 目的检测骨科患者感染鲍曼不动杆菌16S rRNA基因分布情况,分析菌株耐药性,为有效的临床治疗提供指导。方法收集骨科患者临床送检标本,分离并鉴定鲍曼不动杆菌,PCR法进行菌株16S rRNA基因的检测,K-B法分析菌株耐药性。结果 48株鲍曼不动杆菌临床分离株对氨基糖苷类抗菌药物阿米卡星、链霉素、庆大霉素、妥布霉素、卡那霉素的耐药率分别为12.50%、56.25%、43.75%、47.92%和27.08%,对链霉素的耐药率最高。对鲍曼不动杆菌的armA基因、rmtA基因、rmtB基因、rmtC基因、rmtD基因以及nmpA基因均进行了检测,仅检出armA基因。armA基因片段大小为590bp,且该基因阳性率为100.00%。结论骨科患者感染鲍曼不动杆菌对常用氨基糖苷类药物产生了一定程度的耐药性,armA的存在可能与菌株耐药性产生存在关系。
- 赵胜豪李鲲张坤黄振峰肖军马中希
- 关键词：骨科患者鲍曼不动杆菌RRNA基因耐药性
- 靶向Survivin的小分子干扰RNA对骨肉瘤细胞的体内外抑制作用被引量：2
- 2010年
- 目的 观察靶向Survivin基因的小分子干扰RNA（siRNA）表达载体对人骨肉瘤细胞MG-63的体内外抑制作用.方法 体外构建Survivin siRNA表达载体pSilence2.1-neo-Survivin,转染骨肉瘤细胞株MG-63、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、免疫组织化学（SP）法检测转染前后Survivin mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞周期分布,吖啶橙荧光染色法观察细胞凋亡,建立裸鼠移植瘤模型,记录瘤体形成时间及肿瘤生长.结果 转染后MG-63细胞Survivin基因mRNA水平和蛋白表达显著下降,转染后mRAN表达抑制率为85.08%,增殖指数为空白组的28.20% 细胞周期分析显示：shRNA组G0/G1期细胞明显增多,而G2/M期、S期细胞数目减少 吖啶橙染色显示转染组细胞出现明显核碎裂等凋亡改变,转染组凋亡率为24.54% 稳定转染组细胞裸鼠体内致瘤能力降低,转染组成瘤时间为（13.2±2.0）d,空白组为（6.5±1.6）d,两者比较差异有统计学意义（P＜0.01）.4周时同空白组相比转染组瘤体体积小62.89%（P＜0.01）,重量轻59.07%（P＜0.01）.结论 靶向Survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制骨肉瘤细胞MG-63增殖,促进细胞凋亡 明显抑制人骨肉瘤细胞的致瘤活性及裸鼠移植瘤的生长.
- 李鲲马德彰勘武生李鹏肖军王威
- 关键词：骨肉瘤裸鼠移植瘤
- “自组装”工程化软骨修复体外关节软骨缺损的实验研究
- 2016年
- [目的]探讨应用＂自组装＂工程化软骨修复体外关节软骨缺损的可行性及其转归。[方法]密度梯度离心法分离培养成人骨髓间充质干细胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,h MSCs）。将第3代h MSCs用含100 ng/ml GDF-5的软骨诱导液定向诱导,2周后重悬细胞,以5×10^6/ml的细胞密度接种于2%琼脂糖包被的24孔板,行自组装培养,2周后对标本行大体和组织学观察并采用生物化学法检测软骨相关的生物学特性。然后将部分标本植入到体外全层软骨缺损模型内,培养4周观察软骨缺损的修复效果,并比较修复前与修复后标本的软骨相关生物学特性变化情况。[结果]体外培养2周时预分化的h MSCs＂自组装＂形成一软骨样组织,组织学检测到软骨特异性成分阳性表达。全层软骨缺损修复模型体外培养4周后,大体和组织学可见缺损由工程化软骨所修复,交界面呈紧密黏附状,Ⅱ型胶原和蛋白多糖呈阳性表达,但弱于未移植组。生化结果显示移植组标本的细胞数、GAG和总胶原含量均低于未移植组（P〈0.05）。RT-PCR结果也反映出这一变化。[结论]＂自组装＂工程化软骨能有效地修复体外关节软骨缺损,并且能较稳定地维持软骨表型。
- 张山锋杨钟华勘武生肖军刘军孙志博
- 淫羊藿苷促进入骨髓间充质干细胞成软骨分化的研究被引量：8
- 2013年
- 目的探讨应用淫羊藿苷促进人骨髓间充质干细胞（hMSCs）成软骨分化的可行性及效果。方法体外分离培养hMSCs，取第3代细胞实验。将hMSCs分别用无血清高糖培养基（H．DMEM）和含1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol／L淫羊藿苷的软骨诱导液（CM）诱导，显微镜下观察细胞形态变化，噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞的增殖。以5×10 9/L的细胞密度离心构建微团，诱导培养3周。逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）检测各组蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达。免疫组织化学、甲苯胺蓝染色检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达。结果5组微团分别由无血清H．DMEM、含1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol／L淫羊藿苷的CM诱导3周后，除H—DMEM组无Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达外，其他各组Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖的表达呈浓度依赖性增加，ImageProPlus6．0软件测得各组Ⅱ型胶原平均吸光度（A）值分别为0．0214±0．0035、0．1182±0．0105、0．1886±0．0184、0．2903±0．0261、0．3476±0．0287，各组差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论淫羊藿苷能促进hMSCs成软骨分化，软骨分化程度呈浓度依赖性增加。
- 肖军马德彰杨钟华张山锋刘军
- 关键词：成人骨髓间充质干细胞淫羊藿苷微团培养软骨分化
