胡文波
- 作品数:5 被引量:29H指数:3
- 供职机构:河南师范大学水产学院更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学更多>>
- 产β-甘露聚糖酶内生菌最适发酵条件的优化被引量:9
- 2012年
- 植物内生菌是一类种类丰富、生物学功能多样的微生物。试验研究将黄豆中筛选出的1株酶活力较高的枯草芽孢杆菌内生菌HD-1,在摇瓶发酵培养水平,对发酵pH值、温度、转速、接种量、发酵时间及培养基成分进行优化。结果表明,发酵最适培养条件为:温度35℃、pH值7.0、转速200 r/min、发酵72 h、接种量5%;发酵最适产酶培养基组成:魔芋粉3%、(NH4)2SO40.375%;最优的离子浓度分别为FeSO40.001%、NaCl 0.5%、MgSO40.01%,此时HD-1的产酶水平达到98.3 U/ml,约是初始酶活力的1.8倍,发酵罐验证试验得到酶活高达193.12 U/ml。
- 张建新韩科芳刘起丽胡文波赵丹丹赵杰
- 关键词:酶活力碳源氮源
- 内生枯草芽孢杆菌HD-1β-甘露聚糖酶基因的克隆及结构生物学分析被引量:3
- 2013年
- 采用PCR技术从一株内生枯草芽孢杆菌HD-1基因组DNA中扩增出β-甘露聚糖酶基因核苷酸编码序列.序列分析表明,该基因全长1 089bp,编码362个氨基酸和一个终止密码子,N端前27个氨基酸为其信号肽.该酶氨基酸序列与相同来源的β-甘露糖苷酶同源性最高达98.34%,具有ManB保守结构域,属于糖苷水解酶家族26的一员.通过对该酶分子三维结构的预测分析,该酶的催化域形成TIM桶状结构,Cys92和Cys112形成二硫键,它们之间的部分构成该酶的氧化还原反应的活性中心,Glu100和Glu292分别为该酶的酸碱催化位点和亲核催化位点.三维结构的分析为提高酶的催化活性的和功能方面的定向改造提供了依据.
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- 关键词:内生枯草芽孢杆菌Β-甘露聚糖酶
- 重组大肠杆菌高细胞密度发酵研究进展被引量:6
- 2011年
- 重组大肠杆菌高细胞密度发酵(high cell-density fermentation,HCDF)是获得高外源蛋白产率的一种重要策略,文中就影响重组大肠杆菌高细胞密度发酵主要因素的研究进展进行了综述,包括宿主菌、接种量、培养条件、代谢副产物、培养方式等。
- 张建新张吨胡文波赵丹丹刘起丽
- 关键词:重组大肠杆菌
- 产β-甘露聚糖酶内生菌的筛选及酶学特性分析被引量:14
- 2011年
- 采用富集培养的方法从黄豆种子中分离出17株内生菌菌株,利用刚果红染色法筛选出3株产β-甘露聚糖酶的内生菌。摇瓶培养并分别测定其酶活力,其中一株酶活力较高,达54.59 U/mL。经生理生化性质测定及16S rDNA序列分析,鉴定为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。酶学性质分析发现,该酶最适作用温度和pH分别为30°C?50°C和7.0,在50°C保温2 h酶活仍保留68%,pH 5.0?9.0条件下保温1 h酶活仍保留64%以上;Zn2+、Ca2+、Co2+、Ba2+、K+对该酶有激活作用,其中以Ca2+的激活作用最为明显,使酶活提高了31%,Mn2+和EDTA对该酶有抑制作用。
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- 关键词:Β-甘露聚糖酶黄豆枯草芽孢杆菌酶学性质
- 产β-mannanase内生菌的诱变育种和酶学特性研究被引量:3
- 2012年
- 以实验室筛选的产伊甘露聚糖酶的黄豆内生菌Bacillussubtilis HD-1(54.6U/mL)为出发菌株,分别采用紫外线,硫酸二乙酯,紫外线-光复活和紫外线.硫酸二乙酯对其进行诱变,结果表明,以紫外线-硫酸二乙酯复合诱变效果最好,获得-株高产伊甘露聚糖酶的突变菌株BacillussubtilisLID.20,酶活达89.5u/mL,比出发菌株提高了63.9D/01遗传性能稳定。该伊甘露聚糖酶的最适反应温度和pH分别为50℃和7.0,该酶在50℃以下,pH5.0-8.0之间稳定性较好,属于中性酶。亚铁离子和钴离子对酶有较强的激活作用,相对酶活分别提高了13.2%和31.7%,但锰离子对酶有强烈的抑制作用,相对酶活仅有对照组的55.6%;金属离子钾、钙、钴和钡都能增强酶热稳定性,其中钴离子的增强效果最为明显,残余酶活约是对照组的1.5倍。
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- 关键词:内生菌Β-甘露聚糖酶诱变