袁广卿
- 作品数：58 被引量：259H指数：8
- 供职机构：中山大学更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- 分子医学实验室仪器设备管理的实践与探索被引量：3
- 2008年
- 仪器设备管理是实验室工作的重要内容。分子医学实验室自组建以来,建立健全了仪器设备管理制度,在开放与培训、仪器共享与信息化管理方面进行了探索与实践,提高了仪器设备的使用效益,使实验管理与实验教学工作走上了良性循环、可持续发展的道路。
- 黄小荣袁广卿骆晓枫梁昌盛谢金卫周俊宜
- 免疫学与生物化学融合性实验教学的探索被引量：2
- 2009年
- 《分子医学技能》课程涵盖了免疫学、生物化学及分子生物学多项实验技术,是一门实用性极强的基础医学实验学科。为了使免疫学与生物化学实验教学更好地融合在一起,利用学生业余科研探索出免疫学和生物化学的综合性实验项目,使学生在系统学习和掌握基本技术的同时,能够综合地分析实验结果,及时联系医学应用,既提高了学生的学习兴趣,又培养学生的动手能力、应用能力和独立工作能力的综合性创新能力。
- 袁广卿周俊宜骆晓枫黄小荣徐霖李苏华沈泳芝皮艳娜乔中原
- 关键词：免疫学生物化学实验教学
- 胸苷激酶基因系统对膀胱癌细胞及凋亡基因的影响被引量：3
- 2005年
- 目的 探讨单纯疱疹病毒胸苷激酶 /丙氧鸟苷 (HSV TK/GCV )系统对膀胱癌细胞BIU 87的杀伤作用及对凋亡基因的影响。方法 脂质体将TK基因成功转入BIU 87,噻唑蓝(MTT)法、TUNEL法、流式细胞仪 (FCM )分别检测GCV对其生长影响及凋亡率和细胞周期变化 ;逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测bcl 2、bax、bak、Caspase 3mRNA表达变化 ,比色法测定Cas pase 3活性变化。结果 作用 5d 1mg/LGCV能杀死 67%的细胞 ,10 0mg/LGCV达到最大杀伤率杀死 97%的细胞 ;GCV诱导细胞凋亡 ,细胞周期阻滞在S和G2期 ;bcl 2表达降低 ,bax表达升高 ,Caspase 3表达及活性升高。结论 HSV TK/GCV系统可有效杀伤膀胱癌细胞并引起细胞凋亡 ,细胞周期阻滞、bcl 2和bax表达变化、Caspase 3活化是引起凋亡发生的重要因素。
- 毛晓鹏丘少鹏曹开源袁广卿陈显景徐林
- 关键词：膀胱癌细胞GCV凋亡基因BAX表达胸苷激酶基因逆转录一聚合酶链反应
- 分子医学实验教学资源库的开发与应用被引量：9
- 2006年
- 分子医学实验教学资源库的建设是保证和提高实验教学质量，有效利用时间和空间，提高教学效率的重要环节，而其网络特性和多媒体性质则赋予了实验教学更多的灵活性、主动性和形象性。文章介绍了分子医学实验教学资源库的开发过程和主要内容及其在实验教学中的作用。
- 黄小荣袁广卿梁昌盛周俊宜
- 关键词：分子医学资源库实验教学
- RNAi沉默PSMA基因对前列腺癌LNCaP细胞生物学行为的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:构建LNCaP细胞PSMA基因的shRNA真核表达载体,探讨其对LNCaP细胞中PSMA基因表达的干扰作用。方法:针对PSMA mRNA序列设计合成3对编码shRNA的寡核苷酸链,退火形成双链,连接入含有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的pSilencer2.1-U6-neo真核表达载体,双酶切及测序鉴定。使用脂质体转染的方法将重组质粒导入LNCaP细胞,G418筛选后RT-PCR、Western blotting检测其对PSMA基因干扰作用,并观察对LNCaP细胞生物学行为的影响。结果:经酶切及测序鉴定,成功构建shRNA真核表达载体p-shRNA1,2,3转染LNCaP后,对细胞PSMA mRNA表达抑制率分别为33.15%、9.26%、41.97%,Western blotting结果显示对PSMA蛋白表达的抑制率分别为26.26%、6.47%、40.69%。选择抑制效率较高的p-shRNA3进行体外生长及侵袭力实验,发现干扰后对LNCaP细胞侵袭力增强,但是对细胞生长影响不大。结论:成功构建了人PSMA基因的RNAi的真核表达载体,并在LNCaP细胞中有效地发挥了对PSMA基因表达的干扰作用,初步发现PSMA在前列腺癌的侵袭中起负向调节作用,为进一步研究PSMA的生物学功能,探索前列腺癌的发病机制奠定一定的实验基础。
- 曹开源张甜徐霖袁广卿田小东黄小荣丘少鹏
- 关键词：前列腺肿瘤RNA干扰
- 前列腺特异膜抗原剪接变异体的基因结构和多态性分析被引量：2
- 2006年
- 目的:了解PSMA剪接变异体的结构及其多样性,探讨前列腺癌的发生机制。方法:应用cDNA末端快速扩增(RACE)的方法扩增剪接变异体5和3末端,并进行序列测定,分析前列腺癌组织PSMA剪接变异体的结构及其多样性。结果:从前列腺癌组织中发现4种新的PSMA剪接变异体,与已往报道的PSMA剪接变异体相比,新发现的变异体在不同位点存在不同程度的插入及缺失。结论:本研究所发现的新PSMA剪接变异体证实和丰富了PSMA剪接变异体的多样性,为寻求前列腺癌特异性的诊断标志物和治疗靶点提供了新的线索和思路。
- 曹开源肖娜徐霖袁广卿戴淑琴黄小荣田小东丘少鹏
- 关键词：前列腺特异抗原剪接
- 带有引导序列的抗-D抗体可变区基因的扩增和序列分析被引量：1
- 2003年
- 目的 :从引导区扩增获得高度特异性和亲和力的抗 -D抗体的可变区基因 ,并进行序列分析。方法 :提取 1株分泌抗 -D抗体的人B淋巴细胞株的总RNA ,从引导区设计引物 ,RT -PCR扩增抗 -D抗体的可变区基因 ,分别对扩增产物进行分子克隆和测序。结果 :用重链引物和轻链引物分别扩增出 4 4 0bp和 4 10bp的特异带。序列分析表明 ,其核苷酸及其所推导的氨基酸 (AA)序列符合人Ig可变区基因的序列特征。结论 :获得了抗 -D抗体可变区基因 ,为基因工程抗 -D的研制及Rh新生儿溶血病的预防提供物质基础。
- 曹开源付涌水徐霖袁广卿黄小荣戴淑琴汤永平
- 关键词：抗体单克隆聚合酶链反应可变区基因基因扩增RH新生儿溶血病
- 分子医学实验室质量管理体系的构建与实践
- 2010年
- 根据分子医学实验室近年来承担实验教学课程的管理与实践，构建了教学实验室的全面质量管理体系，该体系是通过运行组织和管理、文件控制、效果评价、供应质量、开放服务、投诉处理、纠正措施、持续改进、记录管理、内部考核等模式进行管理的，为提高实验教学质量及优秀学生的培养提供了基础和保障。
- 袁广卿周俊宜黄小荣骆晓枫谢金卫粱昌盛
- 关键词：实验室分子医学实验教学
- 以研究性实验为中心的开放性实验教学模式和学生科研创新能力的培养
- '以实验为中心安排教学'是近年来美国高校正在开展的一项极有影响力的实验教学改革计划(简称EBE计划),其教学重点不在知识的掌握而在能力的培养.为了更好地强化学生的实验操作和科研创新能力,作者在全面查阅EBE计划相关文献的...
- 周俊宜高国全骆晓枫颜少平谢金卫梁昌盛黄小荣袁广卿蔡卫斌杨霞
- 关键词：分子医学实验教学研究性实验高等医学教育科研创新能力
- 文献传递
- 抗-D抗体Fab段基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因,为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础。方法:将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体,用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达,表达产物用SDS-PAGE和ELISA等方法分析。结果:SDS-PAGE电泳表明重组克隆表达了1条约48kD的蛋白条带,ELISA结果显示,所表达的抗体和Rh+的人红细胞呈阳性反应,和Rh-红细胞反应为阴性,阴性对照和Rh+及Rh-红细胞反应均为阴性。结论:于大肠杆菌表达了具有抗原结合特性的人抗-D抗体Fab段抗体分子。
- 付涌水江朝富李树浓徐霖袁广卿曹开源
- 关键词：抗体抗-D基因克隆基因表达大肠杆菌
