贺敏
- 作品数：11 被引量：37H指数：4
- 供职机构：中国海洋大学食品科学与工程学院更多>>
- 发文基金：长江学者和创新团队发展计划海洋公益性行业科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生轻工技术与工程生物学更多>>
- 鲫鱼卵唾液酸糖蛋白化学结构分析及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响被引量：10
- 2014年
- 目的:成熟的鲫鱼卵经提取、分离纯化得到唾液酸糖蛋白(sialyglycoproteins of Carassius auratus eggs,CA-SGP),分析其化学结构,及对前成骨细胞MC3T3-E1增殖分化的影响。方法:采用水提法从成熟鲫鱼卵中提取水溶性蛋白,经阴离子交换色谱、凝胶过滤色谱分离纯化鲫鱼卵水溶性蛋白得到CA-SGP,测定其基本组成,采用高效凝胶液相色谱和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其分子质量和纯度,PMP柱前衍生高效液相色谱法测定其单糖组成;采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞的增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)的分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的活性,茜素红染色法测定矿化结节的数量。结果:得到单一的组分CA-SGP,在高效凝胶过滤色谱色谱图上呈现单一的糖和蛋白的检测重叠峰,在凝胶电泳图上呈现单一弥散性条带,其蛋白质含量为14.33%,己糖含量为62.81%,N-乙酰神经氨酸(N-acetylneurainic acid,Neu5Ac)含量为19.72%。单糖组成测定结果显示:CA-SGP主要由甘露糖、葡萄糖胺、半乳糖胺组成,其物质的量比为7.61∶6.70∶1.00;MC3T3-E1细胞与CA-SGP共同孵育后,其增殖率显著增加,COLⅠ和OCN的分泌量分别增加了39.28%和83.06%,ALP活性提高了285.08%,矿化结节的数量增加了96.41%,说明CA-SGP显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化。结论:CA-SGP为富含Neu5Ac的糖蛋白,具有显著促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的作用,对开发抗骨质疏松功能性食品具有重要意义。
- 夏光华贺敏詹麒平薛长湖王静凤
- 关键词：MC3T3-E1细胞增殖分化
- 海地瓜硫酸软骨素通过Wnt信号通路抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的研究被引量：1
- 2013年
- 目的探究海地瓜硫酸软骨素(Acaudina Molpadioides chondroitin sulfate,AM-CHS)抑制3T3-L1前脂肪细胞分化的分子机制。方法采用传统的鸡尾酒诱导剂诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,分别采用油红O染色和甘油三酯(Triglycerides,TG)含量测定法评价AM-CHS对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。采用RT-PCR法检测脂肪细胞中Wnt信号通路关键基因和脂肪合成关键基因mRNA的表达水平。结果AMCHS能够显著抑制3T3-L1细胞脂滴的形成,拮抗罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)的促分化作用,并上调Wnt信号通路中的关键受体Frz和LRP5的mRNA表达,下调分化转录因子PPARγ、C/EBPα和SREBP-1cmRNA的表达,抑制脂质合成基因FAS和GPAT mRNA的表达,不影响脂质分解基因HSL和ATGL mRNA的表达。结论AM-CHS能够显著抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,抑制成熟脂肪细胞的脂质合成,并拮抗罗格列酮(Rosiglitazone,RSG)的促脂质合成作用,其作用机制与激活Wnt信号通路有关。
- 龙腾腾王静凤贺敏徐慧胡世伟薛长湖
- 关键词：3T3-L1前脂肪细胞分化WNT信号通路
- 革皮氏海参总皂苷对小鼠骨髓细胞周期和细胞凋亡的影响被引量：2
- 2012年
- 目的研究革皮氏海参总皂苷对环磷酰胺(cyclophos-phamide,Cy)诱导的骨髓抑制模型小鼠骨髓细胞细胞周期和细胞凋亡的影响。方法通过腹腔注射Cy建立小鼠骨髓抑制模型,灌胃不同剂量的革皮氏海参总皂苷(10和30 mg(kg·d)-1),1次/d,连续16 d。采用流式细胞术检测革皮氏海参总皂苷对小鼠骨髓细胞周期分布和凋亡的影响,逆转录聚合酶链式反应(reverse ranscription polymerase chain reaction,RT-PCR)技术检测小鼠骨髓细胞cyclinB1、bcl-2和bcl-xl基因mRNA表达水平。结果革皮氏海参总皂苷能明显增加骨髓有核细胞数;促进骨髓细胞周期由S期进入G2/M期,提高G2/M期关键因子cyclinB1 mRNA的表达水平;明显降低细胞凋亡率,提高抑制凋亡基因bcl-2和bcl-xl mRNA表达量。结论革皮氏海参总皂苷明显促进骨髓细胞增殖。其作用机制可能通过促进细胞进入增殖活跃期,抑制细胞凋亡,达到促进小鼠骨髓造血的作用。
- 贺敏王静凤柳东李冰王玉明薛长湖
- 关键词：骨髓抑制CYCLINB1BCL-XL
- 一种具有抗骨质疏松症作用的鱼卵糖蛋白的制备方法
- 一种具有抗骨质疏松症作用的鱼卵糖蛋白肽的制备方法，首先将鱼卵冷冻干燥后，用乙醇进行脱脂处理；然后将脱脂处理过的鱼卵冷冻干燥，再加入蛋白酶进行水解，水解结束后，将水解液的pH值调为中性，将水解液离心后的上清液超滤、脱盐后，...
- 王静凤徐雷雷贺敏薛长湖王玉明李兆杰周晓春
- 文献传递
- 鲫鱼卵唾液酸糖蛋白对小鼠破骨细胞活性的影响被引量：2
- 2015年
- 目的研究鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Carassius auratus sialyglycoproteins,CA-SGP)对破骨细胞活性的影响。方法通过M-CSF和RANKL体外诱导小鼠骨髓造血细胞分化,建立破骨细胞模型,以MTT法检测CA-SGP对破骨细胞前体细胞及破骨细胞增殖活性的影响;采用TRAP染色和TRAP含量测定法评价其对小鼠骨髓细胞向破骨细胞分化的影响;利用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测CA-SGP对小鼠破骨细胞促炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α分泌的影响。结果 CA-SGP对破骨细胞前体细胞和破骨细胞的增殖活性无影响,可明显抑制小鼠骨髓造血细胞向破骨细胞的分化,且在早期抑制作用最强。ELISA试剂盒检测结果表明,CA-SGP能明显降低小鼠破骨细胞IL-6、IL-1β和TNF-α的含量。结论鲫鱼卵唾液酸糖蛋白可明显抑制小鼠骨髓造血细胞向破骨细胞的分化以及破骨细胞炎症因子的分泌。
- 贺敏王静凤王倩睿徐慧王玉明薛长湖
- 关键词：破骨细胞TRAPIL-6IL-1Β
- 鲫鱼卵唾液酸糖肽对成骨细胞MC3T3-E1增殖、分化、矿化及OPG/RANKL基因表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:研究鲫鱼卵唾液酸糖肽(Ca-SGPP)对成骨细胞MC3T3-E1骨形成活性及OPG/RANKL基因表达水平的影响。方法:在MC3T3-E1细胞中加入不同浓度的Ca-SGPP,采用MTT法、试剂盒和茜素红染色法检测Ca-SGPP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响;利用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术检测MC3T3-E1细胞骨形态发生蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPG)及核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因m RNA表达水平。结果:Ca-SGPP可显著促进MC3T3-E1细胞增殖及ALP、OCN和COL I的分泌,提高MC3T3-E1细胞矿化能力,上调其BMP-2表达水平及OPG/RANKL的比值,且分子质量大的糖肽效果更佳。结论 :CaSGPP具有促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的能力,其机制可能与OPG/RANKL比值上调有关。
- 贺敏周晓春陈鹏张昕王玉明薛长湖王静凤
- 关键词：MC3T3-E1骨形成OPG/RANKL
- 鲫鱼卵唾液酸糖蛋白制备工艺优化及其促骨形成作用研究被引量：3
- 2020年
- 以14种水产动物卵为原料,筛选出具有较高促前成骨MC3T3-E1细胞增殖活性的鲫鱼卵水溶性糖蛋白,采用响应面法优化了鲫鱼卵唾液酸糖蛋白(Sialoglycoprotein of Carassius auratus eggs,Ca-SGP)的提取工艺,并评价Ca-SGP对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响。结果表明,14种水产动物卵中,鲫鱼卵糖蛋白唾液酸含量最高,且对MC3T3-E1细胞增殖率最高,分别为5.76%和145.71%;采用单因素和响应面试验优化得到制备Ca-SGP的最优提取工艺为:NaCl浓度为0.38 mol/L、提取时间为4.2 h、液料比为1∶3.88 w/v,在此条件下,Neu5Ac得率的预测值为592 mg/100 g,验证值为588.47 mg/100 g。Ca-SGP对骨形成作用的研究结果表明,Ca-SGP显著提高MC3T3-E1细胞增殖至135.56%,显著提高COL I、OCN和OPN的分泌量,分别提高到32.23、261.46和85.89 ng/mL,显著提高成骨细胞矿化能力至241.67%,说明Ca-SGP具有显著促骨形成作用(P<0.05)。以上研究为寻找安全、有效抗骨质疏松功能因子提供新途径。
- 黑智亮常虹赵美惠卿雨蝶王佳媚贺敏王静凤夏光华
- 关键词：响应面骨形成
- 海地瓜硫酸软骨素对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响被引量：5
- 2013年
- 目的研究海地瓜硫酸软骨素(Acaudina Molpadioideschondroitin sulfate,AM-CHS)对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响,并探讨其作用机制。方法采用传统的鸡尾酒诱导剂诱导分化3T3-L1前脂肪细胞,以MTT法检测AM-CHS对3T3-L1前脂肪细胞及不同分化阶段3T3-L1细胞增殖活性的影响;分别采用油红O染色和甘油三酯(triglycerides,TG)含量测定法评价其对3T3-L1前脂肪细胞分化的影响。采用RT-PCR法检测脂肪细胞中过氧化物酶体增殖体激活受体γ(peroxisome proliferators-activated receptors gamma,PPARγ)、CCAAT增强子结合蛋白α(CCAAT/enhancer bind-ing protein alpha,C/EBPα)、固醇调节元件结合蛋白-1c(ste-rol regulatory element binding protein-1c,SREBP-1c)等分化相关基因的mRNA表达水平。结果 AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞和成熟脂肪细胞的增殖,抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化过程,以对分化早期的抑制作用最强。RT-PCR结果表明,AM-CHS能明显降低脂肪细胞PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c mRNA的表达。结论海地瓜AM-CHS能明显抑制3T3-L1前脂肪细胞的增殖和分化,其作用机制与下调分化相关基因PPARγ、C/EBPα和SREBP-1c的表达有关。
- 龙腾腾王静凤常耀光贺敏武凤娟王玉明薛长湖
- 关键词：SREBP-1C
- 高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油对小鼠的免疫调节作用被引量：12
- 2013年
- 目的采用免疫功能低下小鼠模型研究高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油的免疫调节作用。方法Balb/c小鼠,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组、乙酯型鱼油组、低含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油组和高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油低、高剂量组,每组10只。剂量组小鼠分别灌胃不同种类的鱼油,阳性对照组灌胃左旋咪唑(20mg·kg-1),正常和模型对照组灌胃生理盐水,连续28d。除正常对照组外,其余各组小鼠均于首次给药第21d,连续7d皮下注射氢化可的松(19mg·kg-1),建立免疫功能低下小鼠模型。于末次给药后,分别测定小鼠的各免疫指标。结果高含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油可显著改善模型小鼠的血清溶血素水平及抗体生成细胞数,提高迟发性变态反应水平和脾淋巴细胞转化能力,促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力和碳廓清能力,提高IFN-γ/IL-4比值,且效果优于低含量EPA/DHA甘油三酯型鱼油和乙酯型鱼油。结论高含量EPA/DHA甘油三酯型可显著改善免疫低下模型小鼠的免疫调节功能,其免疫调节作用可能与其甘油三酯含量及EPA/DHA含量相关。
- 贺敏胡世伟吴胜强柳东朱昱哲王玉明王静凤
- 关键词：血清溶血素脾淋巴细胞转化迟发性变态反应IL-4
- 一种具有抗骨质疏松症作用的鱼卵糖蛋白的制备方法
- 一种具有抗骨质疏松症作用的鱼卵糖蛋白肽的制备方法，首先将鱼卵冷冻干燥后，用乙醇进行脱脂处理；然后将脱脂处理过的鱼卵冷冻干燥，再加入蛋白酶进行水解，水解结束后，将水解液的pH值调为中性，将水解液离心后的上清液超滤、脱盐后，...
- 王静凤徐雷雷贺敏薛长湖王玉明李兆杰周晓春
- 文献传递
