邓晶
- 作品数：5 被引量：16H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学生物科学技术学院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 苎麻CCoAOMT基因干扰表达载体构建及其遗传转化
- 咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCoAOMT)是植物木质素合成过程的一种关键酶。运用已克隆的苎麻CCoAOMT基因cDNA,构建成该基因干扰表达载体,分别开展了模式烟草、亚麻和苎麻的遗传转化。以期通过基因表达的干扰作用,降低...
- 邓晶
- 文献传递
- 苎麻UDPGDH基因的cDNA克隆及表达分析被引量：7
- 2008年
- 【目的】分离苎麻尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDPGDH)基因。【方法】通过简并引物RT-PCR结合RACE技术和半定量RT-PCR。【结果】成功克隆苎麻Boehmeria nivea(Linn.)Gaud.尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶(UDPGDH)基因cDNA序列,序列长1837bp,编码一480个氨基酸的蛋白质(GenBank No.EF178294)。半定量RT-PCR分析显示,UDPGDH在苎麻根、皮、茎和叶组织中均有表达,其表达量为茎>皮>叶>根,相对表达量依次为0.7075,0.3051,0.2651,0.1490。【结论】苎麻UDPGDH与其它植物相应序列具有较高同源性,在苎麻茎中有较高的表达。
- 刘峰黄妤郭清泉张学文李良勇邓晶谢玲玲
- 关键词：苎麻CDNA克隆
- 苎麻UDPGDH原核表达载体的构建与表达
- 2008年
- 通过RT-PCR获得UDPGDH cDNA序列,经酶切、连接,以pET-32a为原核表达载体,构建成pET-32a-UDPGDH重组表达载体.经酶切、PCR及DNA测序鉴定后,将阳性质粒转化表达受体菌E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导后表达出1个约53 000的蛋白,与推测的UDPGDH编码产物的大小一致.凝胶成像分析表明,最高表达量可占菌体总蛋白的47.1%,表明UDPGDH重组载体在大肠杆菌中获得了稳定的表达.
- 刘峰曹雅琴张学文李良勇邓晶郭清泉
- 关键词：苎麻
- 苎麻CCoAOMT基因cDNA反义转化模式烟草‘WS38’被引量：1
- 2007年
- 苎麻咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCoAOMT)是其木质素合成过程的一种关键酶,运用克隆的该酶基因cDNA及植物表达载体pBI121、pWM101,分别构建了35S启动子控制的苎麻CCoAOMT基因反义cDNA基因质粒(pBI121-antiBnCCoAOMT)和cDNA全长表达质粒(pWM101-BnCCoAOMT),并通过根癌农杆菌介导法将其转化至模式烟草WS38,获得了转基因烟草.对转基因植株进行分子分析和组织学初步研究表明,转反义RNA基因植株叶柄木质素含量较野生烟草或转正义基因烟草叶柄木质素含量降低.说明运用反义RNA技术对CCoAOMT基因的表达进行基因工程调控,一定程度上可以对木质素的合成产生干扰,为获得低木质素或木质素组分改良的苎麻基因工程奠定基础.
- 陈婕邓晶陈建荣徐磊张学文
- 关键词：CCOAOMTCDNA
- 苎麻CCoAOMT基因干扰表达载体构建及对烟草的转化被引量：6
- 2008年
- 根据已克隆的苎麻CCoAOMT(咖啡酰辅酶-A-氧甲基转移酶)基因cDNA序列,以其编码纤维素合成酶底物结合和催化合成结构域的cDNA序列为目标,采用PCR扩增方法引入克隆的酶切位点,分别将其正、反方向克隆到植物RNA干扰表达质粒PFGC5941T-DNA上CHSA内含子两侧,构建了植物表达苎麻CCoAOMT基因的干扰重组Ti载体.将该载体转入根癌农杆菌LBA4404后,采用农杆菌介导法对木质素研究的模式烟草WS38进行了遗传转化,抗性筛选和分子检测表明,成功获得了转基因植株.转基因植株生长延缓,表明可能存在基因表达干扰现象.
- 邓晶刘峰郭清泉陈建荣张学文
- 关键词：苎麻
