郭维
- 作品数：82 被引量：341H指数：11
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程更多>>
- 表达bFGF蛋白的重组腺病毒载体的构建及其在体内耳转染的应用
- 本发明涉及一种表达bFGF蛋白的腺病毒载体及其转化体，以及该载体的构建方法。由此方法获得的表达bFGF蛋白的重组腺病毒可以克服现有给药途径的一种或多种缺陷，安全有效地用于耳聋治疗。
- 杨仕明翟所强郭维胡吟燕陈伟申卫东侯昭晖韩东一杨伟炎
- 文献传递
- NT3重组腺病毒对耳蜗螺旋神经节的保护作用被引量：4
- 2002年
- 目的 观察含有神经营养素 - 3(neurotrophin - 3,NT3)的重组腺病毒在豚鼠耳蜗中的表达及其在噪声损伤后对螺旋神经节的保护作用。方法 2 7只白色纯种豚鼠 ,暴露于 135dBSPL、4kHz的窄带噪声中 4h。 7天后 ,12只经圆窗注入ad -NT3,12只经圆窗注入腺病毒携带的Lac2基因 (adenviruslacopron ,ad -LacZ) ,3只注入人工外淋巴液。分别于 1、4、8周后取材 ,石蜡包埋中轴切片后 ,用免疫组化方法 (ABC法 )检测NT3的表达。于光镜下计数螺旋神经节细胞。结果 在耳蜗各回中NT3均有表达 ,4、8周组动物较 1周组动物染色弱。注入ad -NT3组较ad -LacZ组和人工外淋巴组螺旋神经节发生退行性病变的数目少 ,螺旋神经节细胞计数结果经t检验有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论 含有NT3的重组腺病毒在耳蜗中能高效表达 。
- 郭维胡吟燕周娜翟所强杨伟炎
- 关键词：螺旋神经节神经营养素-3耳蜗腺病毒
- 鼻腔鼻窦恶性肿瘤p53基因突变的检测及临床意义被引量：4
- 1997年
- 应用聚合酶链反应-单链构象多态性分析（PCR－SSCP）方法，检测21例鼻腔易窦恶性肿瘤新鲜及石蜡包理组织中，p53基因第6外显子的突变率发现p53基因第6外显子突变14例，突变率为67％。其Ⅰ～Ⅳ期的分布分别为33％（1／3）、50％（3／6）、67％（4／6）、100％（6／6）；其分化程度分布为33％（2／6）、67％（4／6）、89％（8／9）；有淋巴结转移者为100％（4／4），无转移为59％（10／17）。经χ2检验，差异均无显著意义，但其突变率有随临床分期的增加、肿瘤分化程度的降低及淋巴结转移而呈升高趋势。提示该检测方法敏感快速，对判断鼻腔鼻窦肿瘤恶性度及估计预后有参考意义。
- 杨卫平郭维姜泗长杨伟炎
- 关键词：鼻腔肿瘤鼻窦肿瘤P53基因突变
- 半定量检测胆管癌组织中人fxyd6基因的表达被引量：7
- 2008年
- 目的研究人fxyd6基因在正常胆管与胆管癌组织中的表达,检测该基因在胆管癌组织切片中的亚细胞表达定位。方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测人fxyd6基因在正常胆管和胆管癌新鲜组织中的表达;采用原位RT-PCR(IS-RT-PCR)方法原位检测该基因在胆管癌石蜡组织切片中的亚细胞表达定位,并应用多媒体图像分析软件进行半定量分析。结果人fxyd6基因在正常胆管和胆管癌组织中存在差异性表达;原位RT-PCR检测表明人fxyd6基因定位于胆管癌上皮细胞胞浆内,在肿瘤细胞中的表达明显高于在正常胆管细胞中的表达(P<0.05)。结论人fxyd6基因在胆管癌的转化、演进过程中可能起重要作用。
- 肖梅周宁新高丽杰张爱群郭维高亚兵彭瑞云张效东万涛
- 关键词：胆管癌离子转运生物信息学聚合酶链反应
- SAMD4基因在听觉发育中的作用
- 柳柯杨冠郭维杨晓杨仕明
- 新生大鼠耳蜗基底膜上皮细胞层的分离:酶消化与机械解剖可否使分离部分细胞失去活性
- 2005年
- 目的:探讨利用酶消化和机械解剖相结合方法分离新生大鼠耳蜗上皮细胞层的方法。方法:实验于2003-02/06在解放军总医院耳鼻咽喉科研究所进行。取新出生SD大鼠耳蜗基底膜后,将其放入含有嗜热菌蛋白酶的D-Hank溶液中,37℃孵箱孵育25min进行酶消化,然后在高倍显微镜下应用自制的超细钨丝刀进行显微机械分离。对分离的耳蜗上皮细胞层进行半薄切片硼砂甲苯胺蓝染色与耳蜗冰冻切片苏木精-伊红染色进行形态对比。结果:①分离后的耳蜗基底膜上皮层在显微镜下呈透明的薄片样组织,其内的各种细胞形态保持完好。②硼砂甲苯胺蓝染色与苏木精-伊红染色进行形态比较发现,分离的耳蜗基底膜上皮层只含有基底膜上的上皮组织,包括耳蜗感觉上皮和非感觉上皮,即只有内毛细胞、外毛细胞、小上皮嵴、大上皮嵴和支持细胞,是纯净的上皮组织而没有任何的结缔组织。结论:利用37℃和25min时间的酶消化法及机械解剖相结合的实验技术可以分离出纯粹的耳蜗上皮细胞层,为进一步纯化上皮内的各种细胞,进行各种基因转染试验以及耳蜗内的各种基础实验建立细胞模型并提供有效地实验手段。
- 宋巍胡吟燕郭维郑贵亮翟所强
- 关键词：耳蜗上皮细胞嗜热菌蛋白酶细胞分离
- 一种耳蜗大上皮嵴细胞系及其应用
- 本发明公开了一种保藏编号为CGMCC No.4719的耳蜗大上皮嵴细胞系。该细胞系通过病毒载体将SV40大T抗原转染入耳蜗大上皮嵴细胞，再将编码Math1基因的真核表达质粒prv5-EGFP导入，然后应用G418筛选获得...
- 翟所强杨仕明郭维
- 强噪声引起的耳蜗毛细胞核形态学变化被引量：7
- 2002年
- 为定量观察噪声引起的耳蜗毛细胞核形态学变化 ,将豚鼠暴露于 115dBSPL的 4kHz窄带噪声 4h。 14天后解剖取耳蜗 ,应用细胞核DNA染料Hoechst 3334 2标记毛细胞核 ,荧光显微镜下观察毛细胞核形态和数量的变化。结果发现 ,毛细胞核同时出现的 3种形态学改变 :核肿胀、核固缩和核消失 ,其中核肿胀细胞数目多于核消失 ,核固缩较为少见。爆震后毛细胞的损伤是一个复杂的、长期的、非同步的病理变化过程 ,存在较多核肿胀的毛细胞。提示 ,此期耳蜗可能仍存在大量可逆变化的受损毛细胞。
- 杨卫平郭维胡博华胡吟燕王沛英杨伟炎
- 关键词：耳蜗毛细胞细胞核噪声形态学
- 热休克蛋白70抗体检测对自身免疫性聋诊断的意义被引量：2
- 2004年
- 目的 分析自身免疫性聋的听力学特点 ,探讨用免疫印迹法 (Westernblot)检测热休克蛋白 70抗体在自身免疫性耳聋诊断中的意义。方法 自身免疫性聋 14例 2 8耳 ,其它感音神经性聋 8例 16耳 ,正常对照 6例 12耳 ,采用免疫印迹法检测各组受试者血清中的热休克蛋白 70抗体 ,并分别作临床听力学检查。结果 自身免疫性耳聋者纯音听力图多数为平坦型 ,TEOAE和 或DPOAE未引出 ,听性脑干反应多数正常 ,轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射 ,该组 8例 ( 5 7.1% )热休克蛋白 70抗体阳性。其它感音神经性聋者纯音听力图多数为高频减退型和平坦型 ,TEOAE和DPOAE未引出 ,重度耳聋者ABR未引出 ,轻、中度耳聋者可引出镫骨肌声发射 ,1例 ( 12 .5 % )热休克蛋白 70抗体阳性。正常对照组 1例 ( 16 .7% )热休克蛋白 70抗体阳性。结论 免疫印迹法检测热休克蛋白 70抗体对自身免疫性耳聋诊断有参考价值 ,对该病的确诊还应结合临床听力学特点。
- 韩维举顾瑞郭维曹菊阳于黎明周娜
- 关键词：听力丧失热休克蛋白
- 小鼠耳蜗胚胎发育过程中Smad4基因的表达被引量：3
- 2006年
- 目的探讨小鼠内耳胚胎发育演变过程,检测Smad4基因在小鼠耳蜗中的表达情况。方法选用耳廓反应灵敏、健康的C57BL/6小鼠作为种鼠交配,用观察阴栓方法获得适龄胎鼠,≤17天取胚胎头,≥18天在显微镜下取耳蜗,胚胎头水平冰冻切片,耳蜗平行于蜗轴冰冻切片,HE染色方法观察小鼠耳蜗发育形态演变过程,免疫组织化学方法检测Smad4蛋白在小鼠胚胎10～20天耳蜗中的表达情况。结果胚胎10天,听泡发育,胚胎12天听泡下部有蜗管始基形成并开始发育。胚胎18天,蜗管发育2圈,形成了可以辨认的内、外毛细胞,血管纹开始分化。Smad4从胚胎15天才开始表达,最初表达部位为耳蜗底转将发育成蜗轴以及柱状上皮分化为感觉细胞及支持细胞的区域,但在胚胎早期表达较弱,后期在耳蜗内广泛表达,在螺旋器、血管纹、前庭膜均有表达,且表达逐渐增强,而在蜗轴部位的表达逐渐减弱。结论Smad4在小鼠内耳分化期有阳性表达,且表达具有明显的阶段性和区域性,说明其参与内耳听觉器官的发育过程并且可能在耳蜗的形成过程中起着重要的作用。
- 宇雅苹杨仕明胡吟燕郭维孙建和于宁韩东一杨伟炎
- 关键词：内耳发育耳蜗小鼠SMAD4
