陈健
- 作品数：23 被引量：54H指数：5
- 供职机构：第四军医大学口腔医学系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- BMP2作用下人牙乳头细胞内Smad1 mRNA表达的变化被引量：3
- 2001年
- 目的 :观察人牙乳头细胞内Smad1mRNA的表达及在BMP2作用下 ,细胞内Smad1mRNA的表达变化 ,探讨人牙乳头细胞内Smad1信号途径在BMP2调控牙乳头细胞分化中的作用。方法 :原代培养的人牙乳头细胞用BMP2处理后 ,提取总RNA ,采用Northernblot法 ,从mRNA水平观察Smad1基因的表达及含量变化。结果 :从mRNA水平观察到Smad1基因在人牙乳头细胞内的表达 ,但在BMP2作用 6、12、2 4h后 ,Smad1mRNA表达量无显著变化。结论 :人牙乳头细胞内存在Smad1信号转导途径 ,牙乳头细胞内Smad1mRNA表达量不受BMP2调控。
- 何文喜牛忠英赵守亮陈健
- 关键词：人牙乳头细胞SMAD1BMP2
- Smad1在人牙胚发育过程中的表达变化被引量：5
- 2000年
- 目的 :观察骨形成蛋白特异的细胞内信号转导分子Smad1在人牙胚发育过程中的表达变化 ,探讨Smad1在牙齿发育过程中的作用。方法 :制备人牙胚发育各期标本 ,免疫组化方法观察Smad1在人牙胚发育过程中的表达情况。结果 :Smad1在牙胚发育的不同时期均可见不同的时空表达模式。结论 :观察到Smad1信号分子在人牙胚发育过程中的表达 ,Smad1可能在牙胚各期的发育起一定的作用。
- 何文喜牛忠英陈健包柳郁
- 关键词：SMAD1牙胚发育免疫组织化学
- Smad2蛋白在人牙乳头细胞内的表达及信号转位过程被引量：9
- 2000年
- 目的 :观察体外原代培养的人牙乳头细胞内Smad2蛋白的表达 ,以及Smad2蛋白在转化生长因子 - β1(transforminggrowthfactor- β1,TGF - β1)信号转导中的作用。 方法 :原代培养人牙乳头细胞 ,用TGF -β1和骨形成蛋白 - 2 (bonemorphogeneticprotein ,BMP2 )刺激培养的细胞 ,免疫组化观察。结果 :TGF - β1和BMP2刺激组均可见Smad2蛋白表达 ,但与对照组相比无明显差异。TGF - β1组可见Smad2从胞浆转位至核内聚集 ,BMP2组未见此作用。结论 :人牙乳头细胞内存在Smad2蛋白的表达 ,Smad2能特异地转导TGF - β1信号至核内发挥作用 ,提示TGF - β1调控成牙本质细胞分化的作用可能是通过Smad2信号途径实现的。
- 何文喜牛忠英陈健岳玲包柳郁
- 关键词：人牙乳头细胞SMAD2骨形成蛋白-2
- 人牙乳头细胞内Smad4表达的免疫组化研究被引量：10
- 2000年
- 目的 :观察转化生长因子 - β超家族的细胞内信号转导分子Smad4在人牙乳头细胞内的表达及信号转位过程。从细胞内信号转导水平探讨牙齿发育过程中成牙本质细胞的分化机制。方法 :原代培养人牙乳头细胞 ,用转化生长因子 - β1(transforminggrowthfactor- β1,TGF - β1)和骨形成蛋白 - 2 (recombinanthu manbonemorphogennticprotein ,rhBMP - 2 )刺激培养的细胞 ,免疫组化观察。结果 :TGF - β1和rhBMP - 2实验组胞核内均可见Smad4蛋白强阳性表达 ,但胞浆内未见Smad4蛋白阳性表达 ;对照组胞浆内可见Smad4蛋白阳性表达 ,核内未见阳性表达。结论 :观察到Smad4在人牙乳头细胞内的表达并参与信号转位过程 ,提示Smad4可能同时参与TGF - βs和BMPs的细胞内信号转导过程。TGF - βs和BMPs在牙齿发育中信号传递可能都是通过Smad4的信号传导途径实现的。
- 何文喜牛忠英陈健包柳郁王景杰
- 关键词：人牙乳头细胞SMAD4TGF-Β1免疫组化
- 人牙髓细胞Smad2基因MH2结构域的cDNA克隆和序列测定被引量：2
- 1999年
- 目的：从人牙髓细胞内克隆转化生长因子－β特异的细胞内信号转导基因Ｓｍａｄ２的功能性结构域———ＭＨ２结构域。方法：原代培养人牙髓细胞，从培养的细胞中提取总ＲＮＡ，逆转录合成ｃＤＮＡ第１条链；设计内、外侧两对引物，进行巢式ＰＣＲ，扩增Ｓｍａｄ２基因ＭＨ２结构域的基因片段；将所获得的基因片段定向插入ｐＢｌｕｓｃｒｉｐｔⅡＳＫ（＋）载体；转化大肠杆菌ＪＭ１０９，挑选阳性克隆并鉴定；用ＰＥ３１７－Ａ型自动测序仪进行核苷酸序列测定分析。结果：测序结果与国外从人肾ｃＤＮＡ文库中克隆的基因序列完全一致。结论：首次从人牙髓细胞中克隆成功Ｓｍａｄ２基因的ＭＨ２结构域，证实了Ｓｍａｄ２基因在人牙髓细胞中的表达；提示人牙髓细胞内存在Ｓｍａｄ２信号转导途径，ＴＧＦ－β对人牙髓细胞分化的调节可能是通过Ｓｍａｄ２信号转导途径实现的。
- 陈健牛忠英药立波范金水
- 关键词：人牙髓细胞SMAD2克隆
- 人牙乳头细胞内Smad5蛋白表达的免疫组化研究被引量：1
- 2001年
- 目的 :观察Smad5蛋白在体外原代培养的人牙乳头细胞内的表达及其在转化生长因子 - β超家族信号转导中的作用。方法 :原代培养的人牙乳头细胞 ,分别以骨形成蛋白 - 2 (bonemorphogeneticprotein -2 ,BMP - 2 )和转化生长因子 - β1(transforminggrowthfactor- β1,TGF - β1)刺激 ,免疫组化检测Smad5的表达 ,图像分析仪半定量。结果 :人牙乳头细胞 (空白对照组 )胞浆内可见Smad5阳性表达 ,胞核内未见阳性表达 ;BMP- 2实验组胞核内Smad5强阳性表达 ,胞浆内为弱阳性表达 ;TGF - β1实验组细胞胞浆Smad5阳性 ,胞核未见表达。结论 :人牙乳头细胞内存在Smad5的表达 ,Smad5能转导BMP - 2信号至核内发挥作用 ,但不能转导TGF -β1信号 ,提示BMP - 2在牙齿发育过程中信号传递可能是通过Smad5的信号转导途径实现的。
- 臧晓霞牛忠英包柳郁何文喜王捍国陈健
- 关键词：人牙乳头细胞SMAD5骨形成蛋白-2转化生长因子-Β1免疫组化
- Smad2、3在人牙髓组织中的表达及意义被引量：1
- 2001年
- 目的 :观察转化生长因子β特异的细胞内信号转导分子 Smad2、3在人牙髓组织中的表达及其变化 ,探讨 Smad2、3在牙髓损伤修复过程中的作用。方法 :用免疫组化方法检测 Smad2、3在正常、龋坏及炎症牙髓组织中的表达。结果 :Smad2 ,3在正常和龋坏牙髓的成牙本质细胞层呈强阳性表达 ,在下方的多细胞区及中心部牙髓有阳性或弱阳性表达 ,炎症牙髓浸润的炎细胞中 Smad2、3呈强阳性表达 ,各类牙髓中 Smad2的表达较 Smad3略强。结论 :Smad2、3在正常、龋坏及炎症牙髓组织中有表达 ,提示 Smad2、3可能在 TGF-β调节牙髓细胞增殖、分化的信号转导途径中发挥一定的作用。
- 包柳郁牛忠英陈健何文喜臧晓霞
- 关键词：SMAD2牙髓免疫组织化学
- p38 MAPK在LPS诱导牙龈成纤维细胞表达uPA中作用的研究被引量：4
- 2002年
- 目的 :研究 p38MAPK在LPS诱导牙龈成纤维细胞表达uPA中的作用。 方法 :采用West ernblotting观察LPS对牙龈成纤维细胞内 p38MAPK活性的影响 ;蛋白激酶活性实验观察SB2 0 35 80对 p38MAPK活性的抑制作用 ;Northernblotting观察SB2 0 35 80对LPS诱导uPA表达的影响。 结果 :LPS能够迅速地激活牙龈成纤维细胞内 p38MAPK的活性 ;SB2 0 35 80能够有效地抑制牙龈成纤维细胞内的 p38MAPK的活性 ;经SB2 0 35 80处理后 ,LPS对uPA的诱导作用受到显著的抑制。结论 :LPS通过p38MAPK信号转导途径诱导牙龈成纤维细胞表达uPA。
- 陈健牛忠英药立波
- 关键词：牙龈成纤维细胞内毒素脂多糖尿激酶型纤溶酶原激活剂
- 骨形成蛋白-2对人牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量的影响被引量：1
- 2002年
- 目的 观察人牙乳头细胞内Smad1蛋白的表达及骨形成蛋白 - 2 (bonemorphogeneticprotein - 2 ,BMP2 )对人牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量影响。方法 原代培养的人牙乳头细胞用BMP2处理 6h、12h、2 4h、48h后 ,提取总蛋白质 ,采用WesternBolt法 ,从翻译水平观察Smad1基因的表达变化。结果 从翻译水平观察到Smad1基因在人牙乳头细胞内的表达 ,但在BMP2作用 48h内 ,Smad1蛋白表达量无显著变化。结论 人牙乳头细胞内存在Smad1信号转导途径 ,牙乳头细胞内Smad1蛋白表达量不受BMP2影响。
- 何文喜牛忠英赵守亮陈健
- 关键词：人牙乳头细胞BMP2骨形成蛋白-2
- 人牙乳头细胞Smad1基因MH2结构域的cDNA的分子克隆被引量：1
- 2001年
- 目的 :从人牙乳头细胞内克隆骨形成蛋白 (BMP)细胞内信号转导基因 Smad1的功能性结构域— MH2结构域。方法 :原代培养人牙乳头细胞 ,从培养的细胞中提取总 RNA,逆转录合成 c DNA第 1条链 ;设计上下游引物 ,进行 RT- PCR,扩增 Smad1基因 MH2结构域的基因片段 ;将所获得的基因片段定向插入 PUC19载体 ;转化大肠杆菌 JM10 9,挑选阳性克隆 ,鉴定后进行序列测定。结果 :获得的 Smad1MH2 结构域的 c DNA片段大小为 44 4bp,并且成功构建 PU C19/ MH2重组质粒。结论 :人牙乳头细胞内存在 Smad1信号转导途径 ,BMP调控人牙乳头细胞分化可能是通过
- 何文喜牛忠英赵守亮陈健
- 关键词：人牙乳头细胞SMAD1分子克隆
