陈广响
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 血红素氧合酶-1对缺氧引起肠黏膜损伤保护作用的实验研究
- 目的: 肠道不仅是营养物质消化和吸收的重要场所，而且还具有内分泌功能、免疫调节和黏膜屏障功能。其中肠黏膜屏障是维持肠道正常功能的基础，在严重创伤、急性胰腺炎、大面积烧、腹部手术、出血性休克、弥漫性腹膜炎、肠梗阻等应激状...
- 陈广响
- 关键词：肠黏膜损伤血红素氧合酶-1分子机制
- 文献传递
- 人血红素氧化酶-1基因pShuttle-CMV穿梭载体在Caco-2细胞株的表达及意义被引量：2
- 2013年
- 目的 构建血红素氧化酶-1（HO-1）基因的真核过表达载体,观察转染人结肠癌细胞株Caco-2细胞后对其生长的影响和细胞定位.方法 构建人pShuttle-CMV-HO1载体,经测序、酶切鉴定正确后,采用脂质体转染法将载体转入Caco-2细胞中,经G418筛选并建立稳定过表达Caco-2细胞HO-1基因的细胞株.实验分为2组,分别为实验组（Caco-2-pS/HO-1）、对照组（Caco-2-pS）,每组设3个复孔,应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）法和Western blot法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达水平；通过免疫荧光法观察HO-1分子在细胞内的分布；采用细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测HO-1基因过表达后对Caco-2细胞的增殖影响.结果 酶切及测序显示pShuttle-CMV-HO1载体构建符合预期.与Caco-2-pS组比较,Caco-2-pS/HO-1组细胞HO-1基因mRNA表达明显增加（63.55±0.86比3.66±0.36,P＜0.05）,HO-1蛋白表达呈现相同趋势；对转染目的载体的细胞应用m-CY3标记的抗体进行免疫荧光实验,激光共聚焦显微镜观察到HO-1分子主要分布于细胞质与细胞膜；Caco-2-pS/HO-1组较Caco-2-pS组细胞增殖数量明显增加[（5.43±0.24）个比（3.25±0.25）个,P＜0.05].结论 成功构建HO-1基因真核过表达载体,HO-1蛋白主要表达于细胞膜及细胞质中,HO-1蛋白异常表达可以促进Caco-2细胞增殖,从而对体外肠黏膜屏障模型起到保护作用.
- 刘玉林陈广响武继红郭晓波崔彬张黎
- 关键词：CACO-2细胞肠黏膜屏障
- 缺氧条件下血红素氧合酶-1对肠黏膜屏障的保护作用被引量：4
- 2014年
- 目的 观察缺氧条件下血红素氧合酶-1（HO-1）对肠黏膜屏障功能的影响.方法 HO-1真核过表达载体转染Caeo-2细胞,分为常氧组、缺氧组、转染组、质粒对照组.实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Western blot方法检测肠上皮细胞紧密连接蛋白Occludin和HO-1的mRNA和蛋白的表达水平变化.免疫荧光法观察Occludin在细胞内的分布.结果 与常氧组比较,缺氧组Occludin的mRNA（0.43±0.03比1.0,P＜0.01）、蛋白（0.62±0.07比1.0,P＜0.01）表达水平均明显降低;与缺氧组比较,转染组Occludin的mRNA（0.65 ±0.04比0.43 ±0.03,P＜0.05）、蛋白（0.89±0.06比0.62 ±0.07,P＜0.05）表达水平明显升高;缺氧组与质粒对照组Occludin的mRNA（0.43±0.03比0.40±0.05,P＞0.05）、蛋白（0.62 ±0.07比0.61 ±0.04,P＞0.05）表达无明显变化.免疫荧光染色见Occludin沿细胞膜分布,呈线性荧光,缺氧引起其形态破坏,转染HO-1后破坏减轻.结论 缺氧条件下,HO-1可增加肠道紧密连接蛋白Occludin的表达水平,减轻缺氧对肠黏膜屏障的损伤.
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- 关键词：血红素氧合酶-1肠黏膜屏障
