韩春光
- 作品数：56 被引量：106H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学环境科学与工程更多>>
- PPARβ激动剂对肥大心肌细胞蛋白合成及IL-1β表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的探讨过氧化物酶体增殖物活化型受体β亚型(PPARβ)激动剂对体外肥大心肌细胞蛋白合成及相关炎性因子IL-1β表达的影响。方法体外培养新生大鼠的心室肌细胞,以血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导建立心肌细胞肥大模型,将适宜浓度PPARβ激动剂GW0742作用于心肌细胞,用3H-亮氨酸掺入法检测心肌细胞蛋白合成速率,RT-PCR及Western印迹方法分别检测IL-1βmRNA和蛋白水平的表达变化。结果与结论 GW0742在抑制肥大心肌细胞蛋白合成速率的同时,下调其IL-1βmRNA和蛋白的表达,而作为溶剂的DMSO则无此影响,说明GW0742抑制AngⅡ介导的体外心肌细胞肥大,其机制可能与调控炎性因子IL-1β密切相关。
- 盛莉叶平韩春光刘永学
- 关键词：心肌细胞肥大白细胞介素-1Β
- 人GPR81-Gi1α融合蛋白在杆状病毒系统中的表达及优化被引量：1
- 2008年
- 旨在建立获得融合蛋白GPR81-Gi1α的方法和最优条件。采用RT-PCR从人胚胎肾及大脑组织总RNA中分别扩增孤儿G蛋白偶联受体GPR81和Gi1α的完整表达序列(分别为1 041bp和1 065bp),并构建各自的重组质粒pcDNA3.1(+)-GPR81及pcDNA3.1(+)-Gi1α,再以重组质粒为模板,运用重叠延伸PCR法扩增得到融合基因GPR81-Gi1α,测序无误后将融合基因与pFASTBac1重组得重组质粒pFASTBac1-GPR81-Gi1α,而后转化DH10Bac,使该融合基因重组质粒发生特异性的转座和病毒重组,获得杆状病毒表达穿梭质粒pBacmid-GPR81- Ci1α,再将该重组杆粒转染昆虫sf9细胞,获得含杆状病毒的细胞分泌上清,以上清在不同条件下(包括不同感染时间、滴度等)感染sf9细胞以优化融合蛋白在昆虫sf9细胞的表达条件。结果表明,感染72h且感染强度moi为5时是融合蛋白在sf9细胞中高效表达的理想条件。该表达体系的建立及蛋白表达条件的优化,保证了足量GPR81- Gi1α融合蛋白的制备。
- 吴芳明韩春光彭明丽黄琳仪王琼朱欣凯刘永学
- 关键词：融合蛋白
- 卵白蛋白诱发变应性鼻炎豚鼠模型的特点及鉴定被引量：8
- 2012年
- 目的:建立卵白蛋白(ovalbumin,OVA)诱发的变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)豚鼠模型,观察其临床症状、病理学和免疫炎症反应有关指标的变化特点。方法:实验豚鼠分为正常组和模型组。模型组动物经腹腔注射0.8ml的OVA混悬液进行全身致敏,并经双侧鼻腔按每侧20μl的OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻进行局部致敏,致敏期限为21d;间隔1周后,以OVA生理盐水溶液(60mg/ml)滴鼻激发,每天1次,连续7d,而后改为两天1次,连续14d,剂量均为50μl/kg。正常组动物以生理盐水代替OVA悬液或OVA生理盐水溶液,用法用量与模型组相同。激发阶段,动态观察各组豚鼠喷嚏、抓鼻、眼泪、鼻涕及呼吸困难症状变化;激发期结束,动物取血制备血清用于IgE含量检测,剥取鼻黏膜用于组织病理学观察及组胺含量测定。结果:与正常组比较,模型组豚鼠出现典型的变应性鼻炎症状,喷嚏数增加并伴有严重抓鼻现象,血清IgE及鼻黏膜组胺含量均明显升高(P<0.01);鼻黏膜组织出现嗜酸粒细胞浸润、血管扩张及上皮脱落等典型的炎性病理变化。结论:OVA诱发的变应性鼻炎豚鼠模型,可较好模拟人类变应性鼻炎的临床特征,该模型是研究变应性鼻炎机制及治疗药物的良好模型。
- 邸婵娟李海兵韩春光胡明原美茹刘永学
- 关键词：卵白蛋白变应性鼻炎
- 过氧化体增殖物激活型受体β/δ激活剂抑制体外血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大被引量：2
- 2007年
- 目的探讨过氧化体增殖物激活型受体β/δ激活剂GW0742在体外对血管紧张素Ⅱ诱导的肥大心肌细胞的作用,分析过氧化体增殖物激活型受体β/δ在其中的可能作用。方法体外培养新生大鼠的心室肌细胞,用血管紧张素Ⅱ诱导建立心肌肥厚模型,在模型中加入GW0742,用软件分析心肌细胞表面积观察心肌细胞面积,3H-亮氨酸的掺入检测心肌细胞蛋白合成速率及使用逆转录聚合酶链反应半定量测定心房钠尿肽、脑钠尿肽和过氧化体增殖物激活型受体β/δmRNA的表达变化,用免疫荧光方法测定过氧化体增殖物激活型受体β/δ的蛋白表达水平。结果血管紧张素Ⅱ可使体外培养的心肌细胞面积和3H-亮氨酸的掺入增加,升高心房钠尿肽和脑钠尿肽的表达,过氧化体增殖物激活型受体β/δ表达下降;GW0742可逆转上述变化。结论GW0742具有抑制血管紧张素Ⅱ诱导的体外心肌细胞肥大的作用,很可能通过活化过氧化体增殖物激活型受体β/δ途径。
- 盛莉叶平刘永学韩春光
- 关键词：过氧化体增殖物激活型受体激活剂心肌肥厚心房钠尿肽脑钠尿肽
- 衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ表达水平的影响
- 2009年
- 目的观察衰老对大鼠心肌过氧化物酶体增殖物激活型受体γ(peroxlsome proliferator activated receptor γ,PPARγ)表达水平的影响及阿托伐他汀的干预作用。方法选择30只20月龄的Wistar大鼠,随机分为老年组、大剂量阿托伐他汀处理组(大剂量组,10 mg·kg^(-1)·d^(-1))和小剂量阿托伐他汀处理组(小剂量组,1mg·kg^(-1)·d^(-1),每组10只;另选10只3月龄Wistar大鼠为青年组。小剂量组和大剂量组大鼠每天给予相应剂量的阿托伐他汀灌胃,共4个月。老年组给予相同体积的生理盐水灌胃,共4个月,青年组未灌胃。采用RT-PCR方法检测大鼠心肌PPARγ mRNA含量,用Western blot方法检测大鼠心肌PPARγ蛋白表达水平。结果与青年组比较;老年组大鼠心肌PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著降低(P<0.01);与老年组比较,小剂量组和大剂量组大鼠PPARγ mRNA含量和蛋白表达水平显著增加(P<0.01),并呈剂量依赖性。结论衰老大鼠心肌PPARγ表达水平显著降低,阿托伐他汀可显著上调老年大鼠心肌PPARγ的表达。
- 韩磊叶平刘永学韩春光
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体心肌降血脂药衰老干预性研究
- BLT2受体拮抗剂对肿瘤细胞增殖的抑制效应
- 目的探讨白三烯B4受体BLT2拮抗剂LY255283对培养肿瘤细胞增殖的抑制作用。方法 RT-PCR法检测9种人源肿瘤细胞(7721、A549、Bel7402、BGC823、Ecol-109、Hela、HL-60、MCF...
- 孙晓丽韩春光王立杰李海兵高志清王琼刘永学
- 关键词：药理肿瘤细胞
- 文献传递
- 孤儿G蛋白偶联受体hGPCRc的亚细胞定位及组织分布被引量：5
- 2005年
- 利用相关生物信息学软件,对从人结肠组织克隆所得某一孤儿G蛋白偶联受体(orphanGprotein_coupledreceptors ,oGPCRs)成员hGPCRc的氨基酸序列进行分析显示,hGPCRc对应的氨基酸序列组成了七个跨膜区段的结构域,具备GPCR的结构特征;然后,将hGPCRc之cDNA与绿色荧光载体pEGFP_N1 构建GFP_hGPCRc表达载体,以空白质粒pEGFP_N1 作对照,转染CHO_K1 细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察到空白质粒pEGFP_N1 转染的细胞表达了GFP并均匀分布于整个细胞,而GFP_hGPCRc转染的细胞观察到荧光清晰聚集于细胞膜和各细胞器质膜上,因而hGPCRc蛋白定位于膜上并稳定表达,与软件分析结果相一致;最后,以RT_PCR检测hGPCRc在2 0周龄胎儿重要组织器官及部分成人组织中的表达情况,结果显示hGPCRc在人心、肾、小脑及结肠等组织均有表达,但在肝、大脑、小肠及肌肉等组织里未检测到表达。该表达谱对于进一步认识hGPCRc在胚胎发育中的作用及生理功能提供了线索。
- 袁广胜潘光堂吴芳明韩春光黄火高胡明盛莉陈静刘永学
- 甘氨酸类化合物对PPARα及γ亚型的激活作用被引量：3
- 2008年
- 目的利用适于PPAR转录激活效应检测的细胞模型,分析系列化合物对PPARα及γ亚型的活化作用。方法将PPARα(或PPARγ)表达质粒、报告基因质粒和内参照质粒共转染HepG2细胞,并以仅转染报告基因质粒和内参照质粒的细胞作为对照。5个化合物(LTD-1,3,4,6,7)分别以不同浓度作用于转染细胞24h,然后裂解细胞,测定细胞内报告基因质粒的荧光素酶活性,后者表示化合物对PPARα(或PPARγ)的激活强度。结果细胞模型稳定可靠,能够灵敏反映PPAR的特异激活效应。甘氨酸类化合物的检测表明,LTD-4、LTD-6、LTD-7均具有激活PPARα和PPARγ的双重效应,LTD-1则仅能激活PPARγ,而LTD-3对PPARα和PPARγ均无明显的激活作用。结论所建细胞模型适于PPARα和PPARγ转录激活作用的分析,化合物LTD-4,6,7具有激活PPARα和PPARγ的双重作用,为作为双激动剂先导化合物的深入研发提供了依据。
- 罗文艳韩春光李庶心薛阳赵砚瑾匡先兆刘永学
- 关键词：PPARΑPPARΓ荧光素酶
- 抗心肌缺血损伤活性多肽的分离纯化与鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:分离纯化心肌肽混合溶液中具有心肌损伤保护活性的单一有效成分。方法:采用体外活性测定追踪、反相色谱分离结合生物质谱检测技术对心肌肽溶液中的活性成分进行纯化及结构鉴定。结果:从心肌肽混合溶液中分离出一活性多肽并确定了其氨基酸序列为KGAW SNVLRGMGGAF;人工合成上述肽段,体外多柔比星(阿霉素)损伤心肌细胞活性测定结果表明,此多肽能明显抑制阿霉素对心肌细胞的损伤。结论:得到一种新的具有心肌细胞保护活性的多肽。
- 曹冬张养军唐敏梁强韩春光邓玉林蔡耘钱小红
- 关键词：HSP70热休克蛋白质类肽类质谱分析法
- 吡格列酮对大鼠痛风性关节炎滑膜细胞因子表达的作用被引量：3
- 2007年
- 目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisomeproliferator-activatedreceptorgamma,PPARγ)激动剂吡格列酮,对大鼠急性痛风性关节炎滑膜表达细胞因子的调控作用,探讨其作用机制。方法:大鼠单侧踝关节注射人工尿酸钠晶体制作急性痛风性关节炎模型,于注射48h后取关节滑膜,以RT-PCR法检测吡格列酮(20mg·kg-1·d-1)口服给药对滑膜表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、白介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)、细胞因子诱导中性粒细胞化学趋化因子(CINC,相当于人的白介素8)、干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)的作用。结果:吡格列酮用药组滑膜表达TNF-α、CINC和IFN-γ显著低于对照组,抑制率分别为81.7%、90.9%、65.3%;IL-4表达高于对照组,增加率为340.0%;IFN-γ/IL-4比值显著低于对照组,抑制率为92.6%。2组IL-1β和IL-1Ra的表达差别无统计学意义。结论:吡格列酮对急性痛风性关节炎的抗炎作用与抑制TNF-α和CINC的表达,并促使Th1/Th2平衡向Th2为优势转化有关。
- 黄火高王兆君张彦彬施海燕韩春光刘永学
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体噻唑烷二酮类
