马骞
- 作品数：21 被引量：63H指数：5
- 供职机构：中国水产科学研究院黄海水产研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山东省自主创新成果转化重大专项项目山东省“泰山学者”建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学天文地球更多>>
- 黄、渤海区不同生态类型鱼卵卵膜和受精孔区亚显微形态
- 2016年
- 黄、渤海区分布的硬骨鱼类鱼卵几乎涵盖了所有鱼卵生态类型。本研究借助扫描电镜观察技术对近年来黄、渤海渔业资源监测调查期间采集的15种不同生态类型鱼卵卵膜和受精孔区亚显微形态特征进行观察,以阐明其亚显微结构并总结提炼可用于鱼卵形态分类的特征,同时将相应鱼种产卵场环境因子引入到卵膜形态特征的认识中,以揭示其生境适应性。结果显示不同生态类型或不同鱼种卵膜形态不尽相同,浮性鱼卵和口含鱼卵卵膜较薄,沉性鱼卵和具卵膜丝鱼卵卵膜较厚;浮性鱼卵卵膜表面壁孔密度、卵膜外表面呈现的蚀刻或特殊结构以及受精孔形状类型,沉性鱼卵卵膜黏膜层表面结构、受精孔形状类型,具卵膜丝鱼卵卵膜丝数量、着生位置及受精孔形状类型,口含鱼卵受精孔区形状及周边附着丝数量等均可用于鱼卵形态分类。鱼卵卵膜和受精孔区亚显微结构差异与鱼种系统分类地位、产卵场环境和地理分布区相关联。鱼卵卵膜表面结构可以作为区分鱼类科或属的性状,卵膜壁孔密度、表面呈现的蚀刻或奇异结构是鱼卵形态分类的重要依据;受精孔结构则一般具有物种特异性。卵膜结构与厚度可反映鱼卵对不同生境的适应性,而卵膜表面的许多特殊结构和装饰被认为是鱼卵应对产卵场环境的保护和适应性策略。本研究将为黄、渤海区硬骨鱼类早期生活史阶段个体发生和鱼卵形态分类研究积累基础资料。
- 卞晓东万瑞景金显仕张秀梅马骞
- 关键词：鱼卵卵膜亚显微形态生态类型
- 半滑舌鳎Dorsalin-1-like基因的克隆与表达
- 2013年
- Dorsalin-1是骨形态发生蛋白(bone morphogenetic proteins,BMPs)家族成员,在调控脊椎动物神经系统的发育中具有重要作用。目前,国内外有关脊椎动物Dorsalin-1的研究报道十分有限。本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Dorsalin-1-like基因的cDNA序列,并分析了Dorsalin-1-like mRNA在半滑舌鳎成鱼的组织表达差异及其在早期发育阶段的表达水平变化。研究结果表明,半滑舌鳎Dorsalin-1-like基因cDNA全长为1 961 bp,包括了153 bp的5′非翻译区(5′UTR)、编码419个氨基酸的1 260 bp的开放读码框(ORF),以及548 bp的3′非翻译区(3′UTR)。同源性分析和分子进化聚类分析结果显示,半滑舌鳎Dorsalin-1-like鲀与红鳍东方(Taleifugu rubripes)、尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)等的同源性最高,并与之共同聚为鱼类Dorsalin-1分支。此外,Dorsalin-1-like mRNA在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有广泛的分布,并在心脏组织中表达量最高,在肝、脊髓等组织中次之。在半滑舌鳎早期发育阶段(卵期、仔鱼、稚鱼、幼鱼)中,Dorsalin-1-like在卵期中的胚胎期表达量最高,其次为前期仔鱼期。上述实验结果表明,Dorsalin-1在调控卵期和仔鱼期的早期发育中具有重要作用,并可能通过调节神经系统的发育进而参与心脏、骨骼等组织的发育调控。本研究旨在揭示Dorsalin-1-like基因在调控半滑舌鳎早期神经系统发育的重要作用,并为筛选半滑舌鳎骨骼发育的调控因子奠定理论基础。
- 马骞庄志猛柳淑芳唐启升
- 关键词：半滑舌鳎MRNA表达早期发育骨骼发育神经系统
- 半滑舌鳎微卫星标记三重PCR家系识别引物及方法
- 一种半滑舌鳎微卫星标记三重PCR家系识别引物及方法，利用两种荧光对三对微卫星引物进行标记，根据其PCR扩增产物的荧光色彩和片段大小进行区分；利用引物设计软件排除这三对引物在PCR反应过程中形成二聚体的可能；组合这三对引物...
- 柳淑芳白翠翠王伟继马骞庄志猛
- 半滑舌鳎微卫星标记三重PCR家系识别引物及方法
- 一种半滑舌鳎微卫星标记三重PCR家系识别引物及方法，利用两种荧光对三对微卫星引物进行标记，根据其PCR扩增产物的荧光色彩和片段大小进行区分；利用引物设计软件排除这三对引物在PCR反应过程中形成二聚体的可能；组合这三对引物...
- 柳淑芳白翠翠王伟继马骞庄志猛
- 半滑舌鳎骨形态发生蛋白4基因的克隆和表达分析被引量：4
- 2016年
- 本研究克隆了半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的c DNA序列,并分析其在半滑舌鳎成鱼的组织表达分布及其在早期发育阶段的定位和表达变化趋势。结果表明,半滑舌鳎BMP4基因c DNA全长为1680 bp,包括了419 bp的5′非翻译区(5′UTR)、编码403个氨基酸的1212 bp的开放阅读框(ORF)以及49 bp的3′非翻译区(3′UTR)。同源性分析和分子进化聚类分析结果显示,半滑舌鳎与已报道慈鲷科(Cichlidae)各鱼种的同源性最高,并与之共同聚为鱼类BMP4分支。BMP4 m RNA在半滑舌鳎成鱼的13个组织中具有广泛的分布,并在鳃组织中表达量最高,其次在背鳍、软骨等组织具有中等水平的表达。此外,BMP4基因在早期胚胎发育阶段(卵裂期和原肠期)具有极高水平的表达,此后其表达水平逐渐降低;但在后期仔鱼期(孵化后3日龄和4日龄),其表达水平再次升高。整体原位杂交检测结果表明,BMP4 m RNA在早期仔鱼期主要在头部及躯干前部表达;后期仔鱼BMP4基因主要在冠状幼鳍、上下颌及胸鳍处表达;进入稚鱼期后在鳃盖骨及各鳍均有表达。上述研究结果揭示了BMP4在半滑舌鳎早期骨骼发育中的重要作用,为揭示海水硬骨鱼类骨骼发生、发育的调控机制奠定了理论基础。
- 马骞冯文荣柳淑芳庄志猛马慧
- 关键词：半滑舌鳎BMP4克隆整体原位杂交骨骼发育
- 半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis Günther)α-淀粉酶基因的克隆及牛磺酸对其表达的影响被引量：4
- 2013年
- 采用RT-PCR及RACE技术首次获得总长为1667bp的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)α-淀粉酶(Amy)基因cDNA序列,其开放阅读框为1539bp,编码512个氨基酸,已录入GenBank(登录号:KC122678)。同源性分析结果显示,与斑点绿河豚(Tetraodon nigroviridis)、美洲拟鲽(Pseudopleuronectes americanus)等同源性较高(86%、83%)。采用邻接法构建系统进化树,发现半滑舌鳎与点带石斑、鳜鱼等聚为一支。用分别添加0%、0.5%、1%、2%牛磺酸的微颗粒饲料投喂23日龄半滑舌鳎稚鱼28天,采用相对定量法检测Amy基因表达水平。结果表明,1%组和0.5%组显著高于0%组(P<0.05),1%组与0%组差异极显著(P<0.01);2%组与0%组无显著差异。上述结果表明,半滑舌鳎稚鱼Amy基因表达受饲料中牛磺酸含量影响,1%添加量作用显著。
- 秦帮勇常青于朝磊柳淑芳马骞郑珂珂
- 关键词：半滑舌鳎Α-淀粉酶克隆牛磺酸
- 养殖半滑舌鳎仔稚鱼骨骼畸形的发生过程被引量：8
- 2011年
- 采用硬骨-软骨双染色技术对半滑舌鳎（Cynoglossus semilaevis Günther）早期发育阶段仔稚鱼全骨骼进行染色, 研究其骨骼畸形发生的时间与部位及相应部位的畸形类型。实验结果表明, 1-50日龄半滑舌鳎仔稚鱼的32批次495个骨骼标本中, 骨骼畸形类型有14种, 主要表现为脊椎骨的融合、增生、局部肥大, 髓棘和脉棘的分叉和分离, 尾鳍的分叉等。骨骼畸形主要发生于变态后期（25日龄）和变态后（40日龄）, 2个发育阶段的畸形率分别31.58%和25%。骨骼畸形的部位多见于脊柱的PH、HE和CA区, CE区尚未发现畸形。骨骼畸形会严重影响鱼类的外部形态、减缓生长及降低其市场价值。本研究初步探讨了养殖条件下半滑舌鳎骨骼畸形的发生过程, 为阐明其早期发育机制及优化苗种培育和养殖条件等提供基础资料。
- 马慧庄志猛柳淑芳马骞王秀利
- 关键词：半滑舌鳎仔稚鱼骨骼发育畸形
- 半滑舌鳎生长激素及其受体基因的原核表达被引量：5
- 2012年
- 根据已克隆的半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)生长激素(GH)基因和生长激素受体Ⅰ(GHR-Ⅰ)基因的cDNA序列信息设计引物,用于扩增半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因序列。随后,分别利用表达载体pET-32a和pGEX-6P-1成功构建了包含半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ基因ORF全序列及不同ORF片段的6个重组质粒,并将获得的重组质粒在表达宿主菌大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳结果显示:重组GH的pET-32a-CSGH质粒在40 kD处有特异性的蛋白条带,重组GHR-Ⅰ胞内区的pGEX-6P-1-CSGHR1-2质粒在70 kD处发现诱导的蛋白条带,其表达量分别占细胞蛋白总量的37.6%和20.2%;而构建的pGEX-6P-1-CSGH重组质粒和含有GHR-Ⅰ基因跨膜区的重组质粒(pET-32a-CSGHR1-1、pET-32a-CSGHR1-2和pGEX-6P-1-CSGHR1-1)均未获得表达产物。由此可见,半滑舌鳎GHR-Ⅰ基因的跨膜区可能影响其在大肠杆菌中的表达。研究结果为实现半滑舌鳎GH、GHR-Ⅰ制剂的开发及应用于养殖生产实践奠定基础。
- 马骞柳淑芳庄志猛唐启升
- 关键词：半滑舌鳎生长激素基因原核表达
- 半滑舌鳎线粒体DNA含量测定方法的建立与优化被引量：1
- 2014年
- 本研究旨在应用实时荧光定量PCR技术,建立半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)线粒体DNA(mtDNA)含量测定方法并进行优化。通过质粒标准品的线性化处理、模板DNA的酶切和超声处理、mtDNA和核DNA(nDNA)基因引物的筛选实验,建立半滑舌鳎mtDNA含量测定方法。结果表明,质粒标准品的构象对荧光定量PCR标准曲线影响较大,线性化的质粒更适合用作标准品;酚-氯仿方法提取的模板DNA适用于mtDNA含量测定,无需进行预处理;用D-loop和ND1这2对引物所得的拷贝数较小且结果一致,适用于mtDNA拷贝数的测定;以不同核基因为参照所得的mtDNA含量可能存在差异,当以单拷贝核基因ENC1和MYH6为参照时,可以计算出单个细胞中mtDNA含量,若以多拷贝基因GAPDH为参照,mtDNA含量测定值则较小。采用本方法分别对半滑舌鳎肝、肾、脾和肌肉组织的mtDNA含量进行重复性检测实验,结果表明,相同组织的mtDNA含量显示出良好的重复性(P>0.05),而不同组织中mtDNA含量具有差异性,可见该方法稳定可靠,能为海洋鱼类mtDNA含量检测提供借鉴。
- 冯文荣柳淑芳庄志猛马骞苏永全唐启升
- 关键词：实时荧光定量PCR半滑舌鳎
- 半滑舌鳎早期发育过程中骨骼发育及骨骼畸形
- 为了解半滑舌鳎早期发育中骨骼发生发育及骨化、返祖特征出现和消失、骨骼畸形常见类型与发生部位等骨骼系统发育的基础资料，本研究采硬骨-软骨双染色技术，对孵化后至变态发育完成的半滑舌鳎人工繁殖仔稚鱼骨骼发育进行连续观察。研究所...
- 柳淑芳马慧马骞庄志猛
- 关键词：半滑舌鳎人工繁殖变态发育骨骼畸形
- 文献传递
