黄维
- 作品数：18 被引量：74H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 核孔蛋白p62促进非受体型酪氨酸激酶c-Abl进入细胞核
- 非受体酪氨酸激酶c-Abl广泛表达于各组织细胞中，其序列高度保守。它的亚细胞定位与其功能密切相关。细胞核内的c-Abl在细胞凋亡调控以及DNA损伤修复过程中起重要作用，而胞质中的c-Abl则与细胞黏附、细胞分化和氧化应激...
- 黄维
- 关键词：C-ABL细胞核细胞凋亡调控酵母双杂交
- 文献传递
- 一种新型疟疾核酸疫苗生产工艺的初步研究被引量：5
- 2005年
- 疟疾是危害人类健康和生命的主要寄生虫病之一,寻找合适的疫苗一直是该病控制的重要方向。在疟疾核酸疫苗方面作了系列尝试,取得较好研究结果,并最终构建了以胸腺嘧啶合成酶基因为筛选标记的、具有大肠杆菌平衡致死特征的新一代疟疾核酸疫苗pThyAAWTE。对影响工程菌高密度发酵的几个因素进行了分析,所优化程序可使工程菌发酵密度达OD60 0 60以上;此外,还对质粒初步纯化过程中的几个重要参数进行了分析,初步结果表明,悬浮液体积(ml) :菌体湿重(g)在2 :1以上,对质粒的得率没有明显影响;碱裂解时间在一定范围内不影响质粒的质量;合适的悬浮液体积/裂解液/中和液比能明显提高质粒产量;用优化程序所提取的质粒其产量与试剂盒提取的量相当。为pThyAAWTE的大规模纯化打下了基础。
- 胥全彬任冽张艳红黄维靳彦文李晓荣李平钟辉刘传暄马清钧曹诚
- 关键词：疟疾核酸疫苗生产工艺高密度发酵
- 核孔复合物的结构、组装及功能被引量：1
- 2005年
- 核孔复合物(NPC)是一个巨型分子复合物,相对分子质量约125×106。脊椎动物的NPC由大约30种蛋白质组成,这些蛋白质的序列大多具有FG(苯丙氨酸-甘氨酸)重复序列。NPC锚定于双层核膜上,并且是物质跨核膜运输的惟一通道,它可快速介导小分子物质的被动运输以及大分子物质的主动运输过程。虽然NPC具有较大的相对分子质量和复杂的结构,但它可在细胞分裂过程中分离并重新组装。生物大分子经NPC的跨核膜运输直接影响真核细胞的生长、增殖、分化、发育等多种生命活动。本文重点介绍NPC的结构、组装及其功能特点。
- 黄维曹诚刘传暄
- 以霍乱毒素B亚基为佐剂的SARS病毒核酸疫苗的构建被引量：6
- 2003年
- 由于冠状病毒主要通过粘膜系统侵人细胞,因此有效的粘膜免疫效应对于SARS的免疫预防具有重要作用。通过将SARS冠状病毒免疫保护相关的核衣壳蛋白和辐条蛋白与霍乱毒素B亚基基因融合,并克隆至真核基因表达载体,所构建的DNA候选疫苗在细胞内可表达霍乱毒素B亚基与SARS抗原的融合蛋白,从而可用于评价是否可有效产生粘膜免疫。
- 靳彦文李平黄维刘萱李楚芳易艳萍李晓荣马清钧曹诚
- 关键词：SARS病毒核酸疫苗冠状病毒粘膜免疫
- 预防SARS病毒核酸疫苗的构建被引量：3
- 2003年
- 本研究通过反转录-PCR获得了SARS冠状病毒辐条样蛋白、核衣壳蛋白和膜蛋白基因,将所获得的可能与免疫保护相关的基因克隆至核酸疫苗表达载体pcDNA-ThyA中,酶切及序列分析结果均表明载体构建正确,该候选DNA疫苗已用于动物免疫实验。
- 易艳萍李平李楚芳刘萱黄维靳彦文李晓荣马清钧曹诚
- 关键词：SARS病毒核酸疫苗核衣壳蛋白冠状病毒
- 大肠杆菌胸腺嘧啶合成酶thyA缺失突变菌株的构建被引量：2
- 2004年
- 大肠杆菌K 1 2DY330菌株的染色体上整合有一种新型的同源重组系统———缺陷型λ原噬菌体同源重组系统。以DY330为出发菌 ,通过同源重组构建大肠杆菌thyA- 株DY330 TI,其基因组特点是 :thyA基因除保留N端的1～ 4 9氨基酸残基相对应的必需核苷酸序列外 ,将其余部分全部缺失 ;此外 ,还敲除了DY330 TI中与缺陷型λ原噬菌体同源重组功能相关的基因 ,从而尽可能避免了通过同源重组产生回复突变的可能性。通过大肠杆菌thyA基因对该突变株的转化实验 ,检测转化子的回复突变率 ,进一步证实该突变株的突变性状稳定 ,为构建以thyA为选择标志的大肠杆菌染色体
- 黄维钟辉李平曹诚马清钧
- 关键词：大肠杆菌同源重组
- 热休克蛋白65增强小鼠对HBV DNA疫苗免疫反应的研究被引量：3
- 2006年
- 目的：观察热休克蛋白65的真核表达载体（pHSP65）对HBVDNA疫苗诱导BALB／c小鼠（H-2^d）免疫应答的调节作用。方法：肌内注射空栽体pcDNA3，HBVDNA疫苗加HSP65佐剂（pHBVS2S＋pHSP65）或不加佐剂（pHBVS2S）；ELISA法测定血清抗HBs抗体；ELISPOT检测分泌IFN-γ的脾淋巴细胞；4h^51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTLs活性。结果：HBVDNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度虽高于不加佐剂组，但无显著性差异；其IgG1／IgG2a的比例不同于多肽免疫组，二者分别为0．395与10。佐剂组小鼠分泌IFN-γ的脾淋巴细胞量是不加佐剂组的2—3倍。CTL与细胞杀伤活性（E：T=100）佐剂组与不加佐剂组分别为：（53．68±7．5）％、（42．81±7．7）％，差异显著（P〈0．05）。结论：HBVDNA疫苗具有较强的免疫原性，能够诱导机体产生特异性的抗体及CTLs反应；HSP65佐剂能够有效提高小鼠对DNA疫苗的细胞免疫应答，有望成为DNA疫苗的免疫佐剂。
- 靳彦文曹诚李平刘萱黄维马清钧
- 关键词：热休克蛋白65小鼠佐剂免疫
- SARS病毒核衣壳蛋白、膜蛋白在大肠杆菌中的高效表达和纯化被引量：22
- 2003年
- 通过反转录 PCR获得了SARS冠状病毒核衣壳蛋白 (N)和膜蛋白 (M)基因 ,其序列分析结果与加拿大多伦多株完全一致。将M基因和N基因克隆到大肠杆菌表达载体pET2 2b和pBV2 2 2上 ,并在大肠杆菌中以包涵体及可溶形式获得高效表达。通过离子交换、金属螯合层析纯化获得电泳纯制品。所获得的核衣壳蛋白具有良好的抗原性 。
- 易艳萍李楚芳石玉岭李林海李平黄维王升启马清钧曹诚
- 关键词：SARS病毒核衣壳蛋白膜蛋白大肠杆菌纯化
- 超抗原SEA增强小鼠对HBV DNA疫苗的免疫反应被引量：5
- 2005年
- 观察超抗原SEA(D227A)的真核表达载体(pmSEA),对HBVDNA疫苗诱导Balbc小鼠(H2d)免疫应答的调节作用。肌内注射空载体pcDNA3、HBVDNA疫苗加pmSEA佐剂(pHBVS2S+pmSEA)或不加佐剂(pHBVS2S);ELISA法测定血清抗HBs;ELISPOT检测分泌IFNγ的脾淋巴细胞;4h51Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL活性。HBVDNA佐剂组免疫小鼠抗HBsAg抗体滴度明显高于不加佐剂组,其IgG1IgG2a的比例不同于多肽免疫组,二者分别为0.282与10。HBVDNA佐剂组均能增强IgG1和IgG2a的产生,是不加佐剂组的1.36、1.73倍。佐剂组小鼠脾淋巴细胞IFNγ的分泌量是不加佐剂组2～3倍。CTL细胞杀伤活性(E:T=100)佐剂组与不加佐剂组分别为:69.77%±7.5%、42.81%±7.7%,差异显著(P<0.05)。HBVDNA疫苗具有较强的免疫原性,能够诱导机体产生特异性的抗体及CTL反应;pmSEA佐剂能够提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答,有望成为DNA疫苗的免疫佐剂。
- 靳彦文李平胥全彬刘萱黄维王云龙曹诚马清钧
- 关键词：DNA疫苗乙型肝炎表面抗原SEA小鼠
- 通过大肠杆菌thyA染色体质-粒平衡致死系统构建无抗性基因表达载体被引量：9
- 2003年
- 克隆了大肠杆菌和霍乱弧菌胸腺嘧啶合成酶基因thyA ,并以pcDNA3质粒为基础 ,分别用两种来源的thyA基因替代其氨苄抗性基因Amp,构建了不含抗性基因 ,且可在thyA营养缺陷型大肠杆菌中基于染色体 质粒平衡致死系统稳定传代的真核表达载体。该载体可有效表达红色荧光蛋白报告基因。
- 黄维曹诚李平钟辉马清钧
- 关键词：基因疫苗核酸疫苗
