丁铃
- 作品数：14 被引量：41H指数：4
- 供职机构：贵阳中医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金贵州省中药现代化科技产业研究开发专项项目国家科技基础性工作专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一个太子参环肽HB前体蛋白基因及其应用
- 本发明公开一个太子参环肽HB前体蛋白基因PhHB的序列、克隆方法及其应用。该基因核苷酸序列长477bp，其中，编码区(CDS)为108bp(编码35个氨基酸)，含有172bp的5′非编码区(5′UTR)及197bp的3′...
- 周涛江维克郑伟李军赵丹丁铃龙登凯
- 文献传递
- 太子参玉米黄质环氧化酶基因的全长CDS序列的克隆与表达分析
- 目的：克隆、分析太子参Pseudostellaria heterophylla脱落酸生物合成中的玉米黄质环氧化酶(zeaxanthin epoxidase,ZEP)基因.方法：从本课题组已构建的太子参转录组数据库中挖掘与...
- 郑伟周涛李军龙登凯江维克丁铃
- 关键词：太子参克隆
- 太子参肌动蛋白基因PhACT2的全长cDNA克隆与生物信息学分析被引量：4
- 2017年
- 根据太子参肌动蛋白基因PhACT2的已知片段设计特异引物,采用RACE技术扩增全长cDNA,并通过生物信息学软件对该基因进行结构分析。通过测序及序列拼接获得PhACT2全长cDNA序列,开放阅读框为1 134 bp,编码377个氨基酸残基,分子量为41.79 k D,理论等电点为5.30。与其他植物同源序列进行分析表明,其核苷酸序列与甜菜的同源性较高为88%,氨基酸序列的同源性均在95%以上。进化分析表明,PhACT2与拟南芥At ACT7的氨基酸序列仅存在4个特异位点的氨基酸差异。实时荧光定量PCR分析结果显示,PhACT2在太子参的不同器官、组织中具有稳定的表达,可作为内参基因。PhACT2全长cDNA序列的成功克隆和生物信息学分析为其在分子生物学领域的应用奠定基础。
- 丁铃江维克周涛龙登凯郑伟李军肖承鸿
- 关键词：太子参肌动蛋白RACE
- 太子参分解代谢关键酶8'羟化酶基因的克隆及生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- ABA 8＇羟化酶是脱落酸（abscisic acid,ABA）分解代谢中的关键酶基因之一。采用同源检索的方法从太子参转录组数据库中获得7个ABA 8＇羟化酶（abscisic acid 8＇-hydroxylase）基因家族成员,对各家族成员进行转录分析组数据以及ABA 8＇羟化酶关键基因ABA8ox1编码区（coding sequence,CDS）的克隆与生物信息学分析。ABA8ox1基因CDS全长1 401 bp,编码480个氨基酸残基,等电点为8.55,相对分子质量为53 k Da,跨膜分析显示其为膜蛋白,1-21个氨基酸残基位于胞内,22-466个氨基酸残基位于胞外。转录组数据分析及定量PCR技术共同证明ABA8ox1在块根的韧皮部及须根中有较高的表达。多序列比对及聚类分析显示与其他植物CYP707A蛋白具有较高的同源性,且与模式植物拟南芥中ABA分解关键基因At CYP707A1和At CYP707A3聚为一类。该研究为太子参块根膨大及对逆境胁迫响应的分子机制奠定基础。
- 李军龙登凯周涛丁铃郑伟江维克
- 关键词：太子参脱落酸
- 太子参类胡萝卜素双加氧裂解酶家族4成员的克隆及表达特性分析被引量：7
- 2016年
- 为探讨太子参环肽成分与品质形成的分子机制,利用生物信息学方法从太子参转录组数据库中筛选出太子参类胡萝卜素双加氧裂解酶(carotenoid cleavage dioxygenases,CCDs)新基因,并设计引物对其进行全长扩增及克隆、生物信息学分析和基因表达分析。克隆得到的4条CCDs序列全长分别为1 617,1 461,1 746,1 875 bp,并根据其功能依次命名为Ph CCD1,Ph NCED2,Ph NCED3,Ph CCD4。序列分析结果表明,4个基因均含有REP65结构域,且均含有与亚铁离子结合的位点。系统进化分析表明,Ph NCED2,Ph NCED3聚为NCEDs一支,Ph CCD1,Ph CCD4聚为CCDs一支,且与拟南芥Arabidopsis thaliana的At CCDs家族相比,Ph CCD1与At CDD1同源性最高,Ph CCD4与At CCD4同源性最高,Ph NCED2,Ph NCED3与At NCED3同源性最高。实时荧光定量分析显示Ph CCD1和Ph CCD4 2个基因的表达主要在地上部分,其中Ph CCD1在叶中的表达量最高,Ph CCD4在茎叶具有高表达,可能参与太子参类胡萝卜素的生物合成;Ph NCED2和Ph NCED3 2个基因的表达主要在地下部分,其中Ph NCED2在须根中表达量最高,Ph NCED3在块根木部和皮部表达量较高,可能是脱落酸生物合成的关键酶基因。研究首次得到太子参CCDs基因,为进一步阐明太子参植株对于外界胁迫的应答机制,进而探讨太子参品质形成的生物途径奠定基础。
- 龙登凯李军周涛郑伟丁铃江维克
- 关键词：太子参生物信息学分析
- 杜仲药材特异性PCR的鉴定方法研究被引量：4
- 2015年
- 目的:利用杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列差异设计DNA特异引物,实现杜仲药材的快速分子标记鉴定。方法:从NCBI数据库下载杜仲药材及其混伪品的rDNA-ITS序列,比对获得差异DNA片段,设计特异性引物,优化PCR扩增条件和检测方法。结果:扩增产物经琼脂糖凝胶电泳和荧光反应检测,杜仲药材能扩增400bp的鉴定条带,加入SYBR GreenⅠ染料后在紫外光下有绿色荧光,而其混伪品不具特异条带和绿色荧光。结论:特异性PCR能有效鉴别杜仲药材及其混伪品,通过条件优化显著缩短PCR扩增时间,荧光染料检测能更直观显示鉴定结果,为杜仲药材的快速鉴定提供了新的思路和方法。
- 丁铃赵丹周涛江维克肖承鸿
- 关键词：RDNA-ITS荧光检测分子鉴定
- 太子参GAPDH基因的克隆及序列分析被引量：2
- 2016年
- 为了获取可靠内参基因,采用同源克隆技术和c DNA末端快速延伸技术,首次从太子参中克隆3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)的部分c DNA序列,命名为Ph GAPDH,序列长度为981 bp,包含699 bp的部分阅读框,推测其编码232个氨基酸,还含有282 bp的3'UTR。序列分析结果表明,太子参Ph GAPDH基因编码的氨基酸序列与同科植物香石竹(Dianthus caryophyllus)氨基酸序列同源性高达99%。PCR分析结果表明,Ph GAPDH基因在太子参不同种源块根、同一种源不同组织及不同生长时期的表达水平较稳定,可以作为太子参功能基因研究的内部参考基因。
- 龙登凯丁铃李军周涛江维克肖承鸿
- 关键词：太子参CDNA末端快速扩增
- 贵州金银花与山银花的产业现状调查被引量：12
- 2014年
- 为了对贵州金银花、山银花产业的发展决策提供参考，对金银花、山银花的主要种植基地和种植大户进行了生产情况调查，对制药企业和医院药房进行了使用情况调查，对全国主要中药材市场和中药材相关网站进行市场、价格情况的调查。结果表明：近几年，全国金银花、山银花的市场需求逐年增加，种植规模得到较快发展；金银花、山银花种植是贵州近几年发展最快、面积最大的中药材品种，种植年限多为2～4年，少数为5年以上，尚未进入丰产期，未来3～5年产量将逐渐增加；规模化种植品种主要有灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬和忍冬，其中黄褐毛忍冬是贵州的特色品种；贵州省金银花、山银花药材主要销往全国各大医药专业市场，具有明显的价格优势。最后分析了贵州金银花、山银花产业情况和产业发展存在的主要问题，并提出了建议。
- 童红江维克周涛熊厚溪康传志杨昌贵丁铃
- 关键词：金银花山银花
- 粗毛淫羊藿性状比较及相互关系研究
- 2015年
- 目的:对贵州省毕节地区野生粗毛淫羊藿进行农艺性状观察与比较,为毕节粗毛淫羊藿的选育工作提供指导。方法:采用SPSS 17.0软件进行变异性、相关性和多元回归分析。结果:结果表明,粗毛淫羊藿各农艺性状均存在不同程度的差异;多个农艺性状之间存在显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的相关性;叶柄数、株高、叶柄长、根茎长、根茎粗、须根长、芽数、左叶长、中叶长、中叶宽、叶柄鲜重、须根鲜重、根茎鲜重是影响粗毛淫羊藿叶片鲜重的主要因子。结论:叶片鲜重是粗毛淫羊藿高产选育的农艺性状直接指标,叶柄数、根茎粗是粗毛淫羊藿高产选育的农艺性状辅助指标。
- 熊厚溪许海孙勇熊灿霞陆祖霞周礼超张耀丹丁铃
- 关键词：粗毛淫羊藿农艺性状
- 贵州栽培灰毡毛忍冬的遗传多样性ISSR与SCoT标记被引量：3
- 2014年
- 为了考察贵州栽培灰毡毛忍冬种源的遗传多样性水平,采用ISSR标记与SCoT标记分析方法对贵州省黔西县、绥阳县、金沙县和道真县的灰毡毛忍冬栽培类群进行遗传多样性分析。结果显示:1)ISSR标记与SCoT标记分析的多样性指数值趋势一致,在物种水平上的多态位点百分率(PPL)分别为72.73%和67.78%,基因分化系数(Gst)为0.329 7和0.415 0,栽培类群内的个体遗传差异大于类群间。2)在栽培类群间,黔西类群的遗传多样性水平、有效等位基因数高于其他类群,其次是绥阳类群,道真类群最低。3)遗传聚类显示,道真栽培类群独立为一类,黔西、绥阳与金沙类群聚为一类。SCoT标记方法更适合于灰毡毛忍冬种质资源遗传多样性的分子评价。
- 赵丹丁铃周涛魏升华熊厚溪肖承鸿艾强
- 关键词：灰毡毛忍冬ISSR标记
